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COUP-TFI基因在端脑腹侧及皮层中间神经元发育中的作用

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
第一章 前言第9-18页
    1.1 概述第9页
    1.2 端脑早期发育第9-11页
        1.2.1 端脑结构第9-10页
        1.2.2 早期端脑背-腹轴分化机制第10页
        1.2.3 端脑区域化第10-11页
    1.3 中间神经元第11-13页
        1.3.1 中间神经元的发育第11页
        1.3.2 中间神经元的切线迁移第11-12页
        1.3.3 由放射状胶质细胞引导的径向迁移第12-13页
    1.4 中间神经元与神经系统发育疾病第13-16页
        1.4.1 中间神经元与皮层兴奋性-抑制性平衡第14-15页
        1.4.2 中间神经元与精神分裂症第15页
        1.4.3 中间神经元与自闭症第15-16页
        1.4.4 中间神经元与其他神经系统发育疾病第16页
    1.5 COUP-TFI基因第16-18页
        1.5.1 COUP-TFI基因简介第16页
        1.5.2 COUP-TFI基因与端脑背侧发育第16-17页
        1.5.3 COUP-TFI基因与中间神经元第17页
        1.5.4 COUP-TFI基因与神经系统发育疾病第17-18页
第二章 材料与方法第18-36页
    2.1 实验材料第18-21页
        2.1.1 实验小鼠第18-19页
        2.1.2 实验试剂第19-20页
        2.1.3 实验耗材及仪器第20-21页
    2.2 溶液的配制第21-23页
    2.3 实验方法第23-24页
        2.3.1 小鼠基因型鉴定第23-24页
            2.3.1.1 PCR模板制备第23页
            2.3.1.2 PCR第23-24页
    2.4 小鼠样本取材第24-25页
        2.4.1 小鼠脑组织取材第24-25页
        2.4.2 小鼠胚胎收取第25页
    2.5 石蜡包埋与切片第25-27页
        2.5.1 石蜡包埋第25-26页
        2.5.2 石蜡切片第26-27页
    2.6 组织染色第27-30页
        2.6.1 尼氏(Nissl)染色第27页
        2.6.2 免疫荧光染色第27-28页
        2.6.3 TSA试剂盒免疫荧光染色第28-29页
        2.6.4 免疫荧光染色相关抗体第29页
        2.6.5 图像采集第29页
        2.6.6 细胞计数与数据分析第29-30页
    2.7 激光显微切割收集RNA样品及RNA-Seq测序第30-36页
        2.7.1 小鼠胚胎冷冻包埋第30页
        2.7.2 冰冻切片第30页
        2.7.3 甲酚紫(cresyl violet)切片染色第30-31页
        2.7.4 激光显微切割(laser capture microdessection)第31页
        2.7.5 样品裂解及RNA提取第31-32页
        2.7.6 RNA溶解及变性第32页
        2.7.7 反转录第32-33页
        2.7.8 cDNA预扩增第33页
        2.7.9 PCR产物质量检测第33-34页
        2.7.10 cDNA样品的磁珠纯化第34-35页
        2.7.11 纯化后样品质量检测及建库、测序第35页
        2.7.12 RNA-Seq数据分析第35-36页
第三章 实验结果第36-47页
    3.1 COUP-TFI基因在小鼠胚胎端脑腹侧表达第36-37页
    3.2 COUP-TFI基因在中间神经元中表达第37-38页
    3.3 RXCre重组酶能在端脑腹侧高效剔除COUP-TFI基因第38-40页
    3.4 成年COUP-TFI基因条件性突变小鼠端脑在形态学上发育异常第40-41页
    3.5 成年COUP-TFI基因条件性突变小鼠端脑腹侧在分子水平上发育异常第41-42页
    3.6 COUP-TFI基因条件性突变小鼠皮层GABA能中间神经元数目减少第42-44页
    3.7 COUP-TFI基因条件性突变小鼠皮层神经元电生理功能异常第44页
    3.8 COUP-TFI基因的作用机制第44-47页
第四章 讨论第47-49页
    4.1 COUP-TFI基因是参与端脑腹侧发育的关键调控基因第47页
    4.2 COUP-TFI基因是调控MGE来源的中间神经元发育的关键基因第47-48页
    4.3 COUP-TFI基因作用分子机制第48-49页
第五章 结果与结论第49-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-58页
附录 缩略词第58-60页
攻读硕士学位期间的研究成果第60页

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