摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 前言 | 第9-18页 |
1.1 概述 | 第9页 |
1.2 端脑早期发育 | 第9-11页 |
1.2.1 端脑结构 | 第9-10页 |
1.2.2 早期端脑背-腹轴分化机制 | 第10页 |
1.2.3 端脑区域化 | 第10-11页 |
1.3 中间神经元 | 第11-13页 |
1.3.1 中间神经元的发育 | 第11页 |
1.3.2 中间神经元的切线迁移 | 第11-12页 |
1.3.3 由放射状胶质细胞引导的径向迁移 | 第12-13页 |
1.4 中间神经元与神经系统发育疾病 | 第13-16页 |
1.4.1 中间神经元与皮层兴奋性-抑制性平衡 | 第14-15页 |
1.4.2 中间神经元与精神分裂症 | 第15页 |
1.4.3 中间神经元与自闭症 | 第15-16页 |
1.4.4 中间神经元与其他神经系统发育疾病 | 第16页 |
1.5 COUP-TFI基因 | 第16-18页 |
1.5.1 COUP-TFI基因简介 | 第16页 |
1.5.2 COUP-TFI基因与端脑背侧发育 | 第16-17页 |
1.5.3 COUP-TFI基因与中间神经元 | 第17页 |
1.5.4 COUP-TFI基因与神经系统发育疾病 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-36页 |
2.1 实验材料 | 第18-21页 |
2.1.1 实验小鼠 | 第18-19页 |
2.1.2 实验试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 实验耗材及仪器 | 第20-21页 |
2.2 溶液的配制 | 第21-23页 |
2.3 实验方法 | 第23-24页 |
2.3.1 小鼠基因型鉴定 | 第23-24页 |
2.3.1.1 PCR模板制备 | 第23页 |
2.3.1.2 PCR | 第23-24页 |
2.4 小鼠样本取材 | 第24-25页 |
2.4.1 小鼠脑组织取材 | 第24-25页 |
2.4.2 小鼠胚胎收取 | 第25页 |
2.5 石蜡包埋与切片 | 第25-27页 |
2.5.1 石蜡包埋 | 第25-26页 |
2.5.2 石蜡切片 | 第26-27页 |
2.6 组织染色 | 第27-30页 |
2.6.1 尼氏(Nissl)染色 | 第27页 |
2.6.2 免疫荧光染色 | 第27-28页 |
2.6.3 TSA试剂盒免疫荧光染色 | 第28-29页 |
2.6.4 免疫荧光染色相关抗体 | 第29页 |
2.6.5 图像采集 | 第29页 |
2.6.6 细胞计数与数据分析 | 第29-30页 |
2.7 激光显微切割收集RNA样品及RNA-Seq测序 | 第30-36页 |
2.7.1 小鼠胚胎冷冻包埋 | 第30页 |
2.7.2 冰冻切片 | 第30页 |
2.7.3 甲酚紫(cresyl violet)切片染色 | 第30-31页 |
2.7.4 激光显微切割(laser capture microdessection) | 第31页 |
2.7.5 样品裂解及RNA提取 | 第31-32页 |
2.7.6 RNA溶解及变性 | 第32页 |
2.7.7 反转录 | 第32-33页 |
2.7.8 cDNA预扩增 | 第33页 |
2.7.9 PCR产物质量检测 | 第33-34页 |
2.7.10 cDNA样品的磁珠纯化 | 第34-35页 |
2.7.11 纯化后样品质量检测及建库、测序 | 第35页 |
2.7.12 RNA-Seq数据分析 | 第35-36页 |
第三章 实验结果 | 第36-47页 |
3.1 COUP-TFI基因在小鼠胚胎端脑腹侧表达 | 第36-37页 |
3.2 COUP-TFI基因在中间神经元中表达 | 第37-38页 |
3.3 RXCre重组酶能在端脑腹侧高效剔除COUP-TFI基因 | 第38-40页 |
3.4 成年COUP-TFI基因条件性突变小鼠端脑在形态学上发育异常 | 第40-41页 |
3.5 成年COUP-TFI基因条件性突变小鼠端脑腹侧在分子水平上发育异常 | 第41-42页 |
3.6 COUP-TFI基因条件性突变小鼠皮层GABA能中间神经元数目减少 | 第42-44页 |
3.7 COUP-TFI基因条件性突变小鼠皮层神经元电生理功能异常 | 第44页 |
3.8 COUP-TFI基因的作用机制 | 第44-47页 |
第四章 讨论 | 第47-49页 |
4.1 COUP-TFI基因是参与端脑腹侧发育的关键调控基因 | 第47页 |
4.2 COUP-TFI基因是调控MGE来源的中间神经元发育的关键基因 | 第47-48页 |
4.3 COUP-TFI基因作用分子机制 | 第48-49页 |
第五章 结果与结论 | 第49-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
附录 缩略词 | 第58-60页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第60页 |