| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第10-21页 |
| 1.1 核糖体的生物合成 | 第10-11页 |
| 1.2 长片段非编码RNA | 第11-13页 |
| 1.3 长片段非编码RNA功能的研究策略 | 第13-15页 |
| 1.4 长片段非编码RNA的功能和作用机制 | 第15-16页 |
| 1.5 酿酒酵母 | 第16-17页 |
| 1.6 核糖蛋白 | 第17-19页 |
| 1.7 研究目标及意义 | 第19-21页 |
| 第2章 材料与方法 | 第21-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-30页 |
| 2.1.1 菌株,质粒与培养条件 | 第21-22页 |
| 2.1.2 培养基 | 第22-27页 |
| 2.1.3 酶与化学试剂 | 第27页 |
| 2.1.4 抗体 | 第27-28页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第28页 |
| 2.1.6 试剂的配制 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-44页 |
| 2.2.1 酵母基因组的抽提 | 第30-31页 |
| 2.2.2 引物设计及序列 | 第31-33页 |
| 2.2.3 降落PCR | 第33页 |
| 2.2.4 DNA产物纯化回收 | 第33-34页 |
| 2.2.5 酶切 | 第34页 |
| 2.2.6 酶连体系 | 第34页 |
| 2.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.8 大肠杆菌转化 | 第35页 |
| 2.2.9 构建验证 | 第35页 |
| 2.2.10 酵母电转化 | 第35-36页 |
| 2.2.11 酵母菌落PCR | 第36-37页 |
| 2.2.12 spottingassay | 第37页 |
| 2.2.13 酵母总RNA的抽提 | 第37-38页 |
| 2.2.14 RNA甲醛变性电泳 | 第38-39页 |
| 2.2.15 反转录 | 第39-40页 |
| 2.2.16 荧光定量PCR | 第40-41页 |
| 2.2.17 酵母总蛋白的抽提 | 第41-42页 |
| 2.2.18 免疫印迹 | 第42-44页 |
| 第3章 结果与分析 | 第44-61页 |
| 3.1 不同条件下的RPL36和重叠lncRNAs | 第45-48页 |
| 3.2 RPL36A与RPL36B的关系 | 第48-49页 |
| 3.3 RPL36A和AO193、RPL36B和BO250在转录层面的关系 | 第49-51页 |
| 3.4 高量表达lncRNAs对野生型菌株FY251的影响 | 第51-52页 |
| 3.5 降低lncRNAs转录水平对菌的影响 | 第52-56页 |
| 3.5.1 敲除RPL36A的内含子对RPL36A的影响 | 第52-53页 |
| 3.5.2 替换RPL36B的3'UTR对RPL36B的影响 | 第53-56页 |
| 3.6 质粒回补 | 第56-61页 |
| 3.6.1 AO193的回补 | 第56-57页 |
| 3.6.2 BO250的回补 | 第57-61页 |
| 第4章 讨论与展望 | 第61-64页 |
| 4.1 讨论 | 第61-63页 |
| 4.2 展望 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-74页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第74页 |
