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探讨酵母菌中与RPL36A和RPL36B重叠的LncRNAs的生理功能

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
第1章 前言第10-21页
    1.1 核糖体的生物合成第10-11页
    1.2 长片段非编码RNA第11-13页
    1.3 长片段非编码RNA功能的研究策略第13-15页
    1.4 长片段非编码RNA的功能和作用机制第15-16页
    1.5 酿酒酵母第16-17页
    1.6 核糖蛋白第17-19页
    1.7 研究目标及意义第19-21页
第2章 材料与方法第21-44页
    2.1 实验材料第21-30页
        2.1.1 菌株,质粒与培养条件第21-22页
        2.1.2 培养基第22-27页
        2.1.3 酶与化学试剂第27页
        2.1.4 抗体第27-28页
        2.1.5 主要仪器设备第28页
        2.1.6 试剂的配制第28-30页
    2.2 实验方法第30-44页
        2.2.1 酵母基因组的抽提第30-31页
        2.2.2 引物设计及序列第31-33页
        2.2.3 降落PCR第33页
        2.2.4 DNA产物纯化回收第33-34页
        2.2.5 酶切第34页
        2.2.6 酶连体系第34页
        2.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备第34-35页
        2.2.8 大肠杆菌转化第35页
        2.2.9 构建验证第35页
        2.2.10 酵母电转化第35-36页
        2.2.11 酵母菌落PCR第36-37页
        2.2.12 spottingassay第37页
        2.2.13 酵母总RNA的抽提第37-38页
        2.2.14 RNA甲醛变性电泳第38-39页
        2.2.15 反转录第39-40页
        2.2.16 荧光定量PCR第40-41页
        2.2.17 酵母总蛋白的抽提第41-42页
        2.2.18 免疫印迹第42-44页
第3章 结果与分析第44-61页
    3.1 不同条件下的RPL36和重叠lncRNAs第45-48页
    3.2 RPL36A与RPL36B的关系第48-49页
    3.3 RPL36A和AO193、RPL36B和BO250在转录层面的关系第49-51页
    3.4 高量表达lncRNAs对野生型菌株FY251的影响第51-52页
    3.5 降低lncRNAs转录水平对菌的影响第52-56页
        3.5.1 敲除RPL36A的内含子对RPL36A的影响第52-53页
        3.5.2 替换RPL36B的3'UTR对RPL36B的影响第53-56页
    3.6 质粒回补第56-61页
        3.6.1 AO193的回补第56-57页
        3.6.2 BO250的回补第57-61页
第4章 讨论与展望第61-64页
    4.1 讨论第61-63页
    4.2 展望第63-64页
致谢第64-65页
参考文献第65-71页
附录第71-74页
攻读学位期间的研究成果第74页

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