| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 常用中英文缩写词 | 第15-16页 |
| 文献综述 | 第16-25页 |
| 1 MHC研究概况 | 第17-21页 |
| 1.1 MHC分子的结构 | 第17-19页 |
| 1.1.1 MHC Ⅰ类分子的结构 | 第17-18页 |
| 1.1.2 MHC Ⅱ类分子的结构 | 第18-19页 |
| 1.2 MHC分子的功能 | 第19-21页 |
| 1.2.1 MHC Ⅰ类分子的功能 | 第19-20页 |
| 1.2.2 MHC Ⅱ类分子的功能 | 第20-21页 |
| 2 Ii研究概况 | 第21-23页 |
| 2.1 Ii的分子结构 | 第21-22页 |
| 2.2 Ii的生物学功能 | 第22-23页 |
| 2.2.1 Ii与MHC Ⅰ类分子相互作用 | 第22页 |
| 2.2.2 Ii与MHC Ⅱ类分子相互作用 | 第22-23页 |
| 3 研究目的与意义 | 第23-25页 |
| 引言 | 第25-26页 |
| 1 材料与方法 | 第26-39页 |
| 1.1 实验材料 | 第26-31页 |
| 1.1.1 实验动物 | 第26页 |
| 1.1.2 质粒与菌株细胞 | 第26页 |
| 1.1.3 酶类及相关试剂 | 第26页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第26-30页 |
| 1.1.5 主要仪器 | 第30-31页 |
| 1.2 草鱼Ii、Mhc Ⅰα、Mhc Ⅱβ不同功能域基因的原核表达 | 第31-38页 |
| 1.2.1 草鱼组织RNA的抽提与c DNA的合成 | 第31-32页 |
| 1.2.2 草鱼Ii、Mhc Ⅰα、Mhc Ⅱβ不同功能域基因的克隆 | 第32-34页 |
| 1.2.3 草鱼Ii、Mhc Ⅰα、Mhc Ⅱβ不同功能域重组质粒的鉴定 | 第34-36页 |
| 1.2.4 重组质粒的原核表达 | 第36-37页 |
| 1.2.5 融合蛋白的提取和纯化 | 第37-38页 |
| 1.3 原核表达系统检测目的蛋白相互作用 | 第38页 |
| 1.3.1 拉下法(Pull-down)检测目的蛋白间相互作用 | 第38页 |
| 1.3.2 免疫印迹(Western blot)鉴定结合蛋白的性质 | 第38页 |
| 1.4 真核表达系统检测目的蛋白相互作用 | 第38-39页 |
| 1.4.1 真核重组质粒转染 293T细胞与荧光显微镜观察 | 第38-39页 |
| 1.4.2 免疫印迹(Western blot)鉴定目的蛋白性质 | 第39页 |
| 1.4.3 重组质粒共转染 293T细胞与激光共聚焦显微镜上观察 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-56页 |
| 2.1 草鱼Mhc Ⅰα、Mhc Ⅱβ不同功能域基因的克隆及重组表达质粒的鉴定 | 第39-40页 |
| 2.2 重组质粒的原核表达 | 第40-41页 |
| 2.3 融合蛋白提取与纯化鉴定 | 第41-48页 |
| 2.3.1 融合蛋白的表达条件优化 | 第41-46页 |
| 2.3.2 融合蛋白的表达形式鉴定 | 第46-47页 |
| 2.3.3 融合蛋白的纯化鉴定 | 第47-48页 |
| 2.4 原核表达的草鱼Ii同MHC分子不同功能域相互作用的特征 | 第48-50页 |
| 2.4.1 应用Pull-down亲和层析检测目的蛋白间的相互作用 | 第48-49页 |
| 2.4.2 应用免疫印迹验证结合蛋白的性质 | 第49-50页 |
| 2.5 激光共聚焦观察草鱼Ii、MHC Ⅰα、MHC Ⅱβ分子在真核细胞中的共定位 | 第50-56页 |
| 2.5.1 草鱼Ii、MHC Ⅰα、MHC Ⅱβ分子在细胞器中的定位 | 第50-53页 |
| 2.5.2 草鱼Ii与MHC Ⅰα、MHC Ⅱβ分子不同功能域的共定位 | 第53-54页 |
| 2.5.3 免疫印迹验证结合蛋白的性质 | 第54-56页 |
| 3 讨论 | 第56-58页 |
| 3.1 MHC分子的肽结合区是结合Ii分子的功能域 | 第56页 |
| 3.2 带有肽结合区的功能域具有细胞内定位特性且可以和Ii聚合 | 第56页 |
| 3.3 细胞器定位验证MHC分子递呈抗原途径 | 第56-58页 |
| 4 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
