| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 本论文常用中英文缩写词 | 第15-16页 |
| 综述 | 第16-26页 |
| 1 拟态弧菌的危害 | 第16页 |
| 2 DNA疫苗的研究及其应用 | 第16页 |
| 3 菌影及其作为递送载体的应用 | 第16-17页 |
| 4 鱼类肠巨噬细胞 | 第17-18页 |
| 4.1 鱼类肠巨噬细胞的概述 | 第17页 |
| 4.2 鱼类巨噬细胞活性与吞噬能力的概述 | 第17-18页 |
| 5 巨噬细胞抗原递呈相关分子概述 | 第18-25页 |
| 5.1 MHC类分子 | 第18-21页 |
| 5.2 细胞因子Ii的作用机制 | 第21-24页 |
| 5.3 细胞因子STING的概述 | 第24-25页 |
| 6 总结与展望 | 第25-26页 |
| 引言 | 第26-28页 |
| 1.材料与方法 | 第28-42页 |
| 1.1 实验动物 | 第28页 |
| 1.2 主要试剂及试剂盒 | 第28-29页 |
| 1.3 菌株与质粒 | 第29页 |
| 1.4 主要仪器 | 第29-30页 |
| 1.5 主要溶液与培养基的配制 | 第30-31页 |
| 1.6 大肠杆菌 DH5a 冻干菌影的制备 | 第31-33页 |
| 1.6.1 重组大肠杆菌DH5α(pBV220-LysisE)的复苏与鉴定 | 第31-32页 |
| 1.6.2 大肠杆菌DH5α菌影的大量制备与冻干 | 第32-33页 |
| 1.7 拟态弧菌靶向 DNA 疫苗的制备 | 第33-35页 |
| 1.7.1 拟态弧菌内靶向 DNA 疫苗的制备 | 第33页 |
| 1.7.2 拟态弧菌外靶向 DNA 疫苗的制备 | 第33-34页 |
| 1.7.3 拟态弧菌双靶向 DNA 疫苗的制备 | 第34-35页 |
| 1.8 动物免疫与疫苗基因转录水平检测 | 第35-37页 |
| 1.8.1 实验草鱼的饲养 | 第35页 |
| 1.8.2 疫苗的安全性检测 | 第35页 |
| 1.8.3 实验草鱼的分组与免疫 | 第35页 |
| 1.8.4 疫苗基因在不同组织中转录水平的检测 | 第35-37页 |
| 1.9 免疫前后草鱼肠巨噬细胞的活性/功能及抗原递呈相关基因转录检测 | 第37-42页 |
| 1.9.1 草鱼肠巨噬细胞的分离培养 | 第37页 |
| 1.9.2 草鱼肠巨噬细胞的纯化 | 第37-38页 |
| 1.9.3 肠巨噬细胞的氧呼吸活性检测 | 第38页 |
| 1.9.4 肠巨噬细胞的氮呼吸活性检测 | 第38-39页 |
| 1.9.5 肠巨噬细胞的吞噬功能检测 | 第39页 |
| 1.9.6 肠巨噬细胞中抗原加工递呈相关基因的转录表达水平检测 | 第39-42页 |
| 2.结果与分析 | 第42-57页 |
| 2.1 重组大肠杆菌DH5α(pBV220-LysisE)的鉴定 | 第42页 |
| 2.2 大肠杆菌DH5α菌影的最佳裂解条件 | 第42-44页 |
| 2.2.1 大肠杆菌DH5α的溶菌动力曲线及裂解效率 | 第42-43页 |
| 2.2.2 大肠杆菌DH5α菌影的形态与结构 | 第43-44页 |
| 2.3 菌影装载拟态弧菌DNA疫苗的最佳条件 | 第44-46页 |
| 2.3.1 新鲜、冻干菌影以及膜囊对装载量的影响 | 第44-45页 |
| 2.3.2 不同比例的菌影、质粒和膜囊对装载量的影响 | 第45-46页 |
| 2.4 四种拟态弧菌DNA疫苗在草鱼不同组织中的转录表达 | 第46-47页 |
| 2.5 免疫前后草鱼肠巨噬细胞的活性/功能 | 第47-49页 |
| 2.5.1 分离的草鱼肠巨噬细胞的原代培养 | 第47页 |
| 2.5.2 免疫前后肠巨噬细胞的氧呼吸爆发活性 | 第47-48页 |
| 2.5.3 免疫前后肠巨噬细胞的氮呼吸爆发活性 | 第48页 |
| 2.5.4 免疫前后肠巨噬细胞的吞噬功能 | 第48-49页 |
| 2.6 肠巨噬细胞中抗原加工递呈相关基因的转录表达水平 | 第49-57页 |
| 2.6.1 实时荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第49-53页 |
| 2.6.2 免疫前后肠巨噬细胞中Iclp基因转录表达水平的动态变化 | 第53-54页 |
| 2.6.3 免疫前后肠巨噬细胞中STING基因转录表达水平的动态变化 | 第54页 |
| 2.6.4 免疫前后肠巨噬细胞中MHC-Iα基因转录表达水平的动态变化 | 第54-55页 |
| 2.6.5 免疫前后肠巨噬细胞中MHC-IIβ基因转录表达水平的动态变化 | 第55-57页 |
| 讨论 | 第57-60页 |
| 1、大肠杆菌DH5α菌影最佳裂解条件的优化 | 第57页 |
| 2、大肠杆菌DH5α菌影最佳装载条件的优化 | 第57-58页 |
| 3、免疫前后肠巨噬细胞的活性及抗原递呈相关基因转录水平分析 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
