| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7页 |
| 1 引言 | 第10-15页 |
| 1.1 细胞衰老及主要特点 | 第10页 |
| 1.2 P-ATPase及结构 | 第10-12页 |
| 1.3 P5-ATPase的结构和功能 | 第12页 |
| 1.4 小鼠atp13a3基因及蛋白的结构 | 第12-13页 |
| 1.5 人ATP13A3基因结构 | 第13-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-29页 |
| 2.1 实验材料、实验试剂及相关仪器 | 第15-19页 |
| 2.1.1 细胞培养耗材 | 第15页 |
| 2.1.2 其他实验所需耗材 | 第15-16页 |
| 2.1.3 实验所需试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.4 本实验中所使用到的试剂盒如下 | 第17页 |
| 2.1.5 本实验中所使用到的自配试剂及其配制方法如下 | 第17-18页 |
| 2.1.6 本实验所使用的仪器设备如下 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-29页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第19-20页 |
| 2.2.2 RNA的提取 | 第20页 |
| 2.2.3 蛋白质的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.4 培养ATP1A3低表达细胞株以及细胞转染实验 | 第21-22页 |
| 2.2.5 免疫荧光实验 | 第22-23页 |
| 2.2.6 免疫荧光及原位杂交实验 | 第23-24页 |
| 2.2.7 细胞内溶酶体提取 | 第24页 |
| 2.2.8 细胞内神经酰胺提取 | 第24-25页 |
| 2.2.9 流式分析 | 第25页 |
| 2.2.10 SDS-PAGE电泳实验(Western Blot) | 第25-26页 |
| 2.2.11 β-gal检测 | 第26-27页 |
| 2.2.12 质粒提取 | 第27-29页 |
| 3 实验结果 | 第29-34页 |
| 3.1 ATP13A3基因敲低和过表达细胞模型 | 第29-30页 |
| 3.2 ATP13A3蛋白参与细胞衰老过程的调控 | 第30-32页 |
| 3.3 ATP13A3基因诱导端粒损伤 | 第32-33页 |
| 3.4 增加ATP13A3基因的表达时,细胞内Ceramide的摄取量降低 | 第33-34页 |
| 4 结论 | 第34-36页 |
| 参考文献 | 第36-40页 |
| 附录 | 第40-43页 |
