致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩略词表 | 第8-11页 |
1.引言 | 第11-17页 |
2.材料与方法 | 第17-29页 |
2.1.实验材料,试剂及相关仪器 | 第17-19页 |
2.1.1.实验材料 | 第17页 |
2.1.2.实验试剂 | 第17-18页 |
2.1.3.主要实验仪器 | 第18-19页 |
2.2.实验方法 | 第19-29页 |
2.2.1.Tert和Terc敲除小鼠基因型鉴定 | 第19-22页 |
2.2.1.1.小鼠基因组DNA抽提 | 第19-20页 |
2.2.1.2.小鼠基因型鉴定 | 第20-22页 |
2.2.1.2.1. Tert敲除小鼠基因型鉴定 | 第20-21页 |
2.2.1.2.2.Terc敲除小鼠基因型鉴定 | 第21-22页 |
2.2.2 小鼠生育能力检测 | 第22页 |
2.2.3 小鼠卵巢HE染色 | 第22-25页 |
2.2.3.1 小鼠卵巢组织分离方法 | 第22-23页 |
2.2.3.2 小鼠卵巢固定包埋 | 第23页 |
2.2.3.3.小鼠卵巢石蜡切片步骤 | 第23-24页 |
2.2.3.4 小鼠卵巢切片的HE染色 | 第24-25页 |
2.2.4 小鼠卵巢切片 β-gal染色 | 第25页 |
2.2.4.1 小鼠卵巢组织冰冻切片的制备 | 第25页 |
2.2.4.2 卵巢冰冻切片 β-gal染色 | 第25页 |
2.2.5 小鼠卵巢颗粒细胞RNAseq分析 | 第25-29页 |
2.2.5.1 卵巢颗粒细胞分离 | 第26页 |
2.2.5.2 卵巢颗粒细胞总RNA抽提 | 第26页 |
2.2.5.3 RNA逆转录为c DNA | 第26-27页 |
2.2.5.4 RT-PCR分析 | 第27页 |
2.2.5.5 RNAseq实验流程 | 第27-29页 |
3.实验结果 | 第29-47页 |
3.1.Tert敲除效率检测 | 第29页 |
3.2.端粒酶敲除对小鼠生育能力的影响 | 第29-30页 |
3.3.端粒酶敲除对小鼠卵巢形态结构的影响 | 第30-32页 |
3.4 端粒酶Tert敲除对卵巢颗粒细胞衰老的影响 | 第32-34页 |
3.5 端粒酶在卵巢功能调节中潜在的靶基因 | 第34-42页 |
3.5.1.端粒酶敲除导致卵巢颗粒细胞转录组差异情况 | 第34-36页 |
3.5.2.RNAseq差异基因功能分类 | 第36-41页 |
3.5.3 端粒酶敲除对卵巢颗粒细胞衰老的影响 | 第41-42页 |
3.6 端粒酶敲除后卵巢中失调的miRNA筛查 | 第42-47页 |
4.讨论 | 第47-48页 |
5.结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-51页 |