| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-11页 |
| 第一章 组蛋白以及细胞重编程的研究进展及意义 | 第11-23页 |
| 1.1 组蛋白研究进展及意义 | 第11页 |
| 1.1.1 组蛋白 | 第11页 |
| 1.2 组蛋白变体研究进展及意义 | 第11-16页 |
| 1.2.1 体细胞组蛋白变体 | 第12-14页 |
| 1.2.2 生殖细胞特异性组蛋白变体与细胞重编程 | 第14-16页 |
| 1.3 细胞重编程研究进展 | 第16-18页 |
| 1.3.1 体细胞核移植技术 | 第16-17页 |
| 1.3.2 细胞融合技术 | 第17-18页 |
| 1.3.3 诱导多能性细胞技术 | 第18页 |
| 1.4 多能干细胞研究进展及意义 | 第18-23页 |
| 1.4.1 胚胎干细胞 | 第18-19页 |
| 1.4.2 诱导多能干细胞 | 第19-20页 |
| 1.4.3 猪诱导多能干细胞 | 第20-21页 |
| 1.4.4 上皮细胞和间质细胞 | 第21页 |
| 1.4.5 诱导多能干细胞的应用前景 | 第21-23页 |
| 第二章 猪组蛋白及其变体表达载体的构建及对猪体细胞重编程的影响 | 第23-69页 |
| 2.1 实验材料与设备 | 第23-24页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第23页 |
| 2.1.2 菌株、载体和细胞 | 第23页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.2 主要试剂与配制 | 第24-26页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第24-25页 |
| 2.2.2 主要试剂配制 | 第25-26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-44页 |
| 2.3.1 组蛋白H2A,H2B及其变体蛋白TH2A,TH2BmRNA的基因组学分析 | 第26-27页 |
| 2.3.2 提取猪卵母细胞RNA和RNA反转录 | 第27-28页 |
| 2.3.3 克隆猪组蛋白H2a,H2b基因及其变体Th2a,Th2b基因 | 第28-29页 |
| 2.3.4 构建pGEM-T-H2a、pGEM-T-H2b、pGEM-T-Th2a和pGEM-T-Th2b重组载体 | 第29-31页 |
| 2.3.5 构建pEGFP-H2a、pEGFP-H2b、pEGFP-Th2a和pEGFP-Th2b表达载体 | 第31-34页 |
| 2.3.6 构建pCMV-Red-H2a、pCMV-Red-H2b、pCMV-Red-Th2a和pCMV-Red-Th2b表达载体 | 第34-37页 |
| 2.3.7 猪胎儿成纤维细胞复苏、传代、冻存与生长曲线绘制 | 第37-38页 |
| 2.3.8 转染猪胎儿成纤维细胞鉴定构建的表达载体 | 第38-39页 |
| 2.3.9 重组表达载体转染猪胎儿成纤维细胞 | 第39-40页 |
| 2.3.10 阳性细胞筛选 | 第40-41页 |
| 2.3.11 猪胎儿成纤维细胞的诱导 | 第41页 |
| 2.3.12 猪胎儿成纤维细胞诱导后的鉴定 | 第41-44页 |
| 2.4 结果 | 第44-66页 |
| 2.4.1 组蛋白H2A,H2B及其变体TH2A,TH2B的基因组学分析 | 第44-49页 |
| 2.4.2 PCR扩增H2a、H2b、Th2a和Th2b基因结果 | 第49-50页 |
| 2.4.3 pGEM-T-H2a、pGEM-T-H2b、pGEM-T-Th2a和pGEM-T-Th2b重组载体的鉴定 | 第50-54页 |
| 2.4.4 重组表达载体的鉴定结果 | 第54-56页 |
| 2.4.5 猪胎儿成纤维细胞培养 | 第56-57页 |
| 2.4.6 建立稳定表达猪组蛋白及其变体的细胞系 | 第57-59页 |
| 2.4.7 筛选阳性细胞 | 第59-61页 |
| 2.4.8 诱导猪胎儿成纤维细胞 | 第61-63页 |
| 2.4.9 猪胎儿成纤维诱导过程中MET标志基因的鉴定 | 第63-66页 |
| 2.5 讨论 | 第66-68页 |
| 2.6 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
