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肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡在重症急性胰腺炎肺损伤发病机制中的作用及清胰汤干预的实验研究

摘要第11-17页
Abstract第17-24页
前言第25-32页
第一部分 重症急性胰腺炎时肺泡Ⅱ上皮细胞凋亡及清胰汤干预的实验研究第32-72页
    前言第32-33页
    材料和方法第33-44页
        1. 动物及实验分组第33页
        2. 材料第33-36页
            2.1 主要设备、仪器第33-35页
            2.2 主要试剂第35-36页
            2.3 主要的药物第36页
        3. 实验过程和方法第36-44页
            3.1 动物模型的制备第36-37页
            3.2 实验标本的采集与保存第37-38页
            3.3 肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、鉴定第38-39页
            3.4 透射电镜行肺泡Ⅱ型上皮细胞的鉴定细胞中线粒体超微结构的变化第39-41页
            3.5 血清 TNF-α的检测第41页
            3.6 血清淀粉酶的检测第41-42页
            3.7 动脉血气分析第42页
            3.8 肺湿/干比值测定第42页
            3.9 流式细胞仪检测 AECⅡ凋亡比例第42页
            3.10 肺组织及胰腺组织苏木精—伊红染色及病理评分第42-44页
        4. 统计学方法第44页
    结果第44-55页
        1. 各组实验动物一般生命状况的比较第44-45页
        2. 病理改变的比较第45-47页
        3. 肺湿 /干 W /D比值的比较第47-49页
        4. 大鼠动脉血气分析的比较第49-51页
        5. 血清 T NF -α含量的对比第51-52页
        6. 大鼠血清淀粉酶含量的对比第52-53页
        7. 透射电镜下 AECⅡ鉴定第53页
        8. 透射电镜观察肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡时的线粒体结构变化第53-54页
        9. 流式细胞仪检测 AECⅡ细胞凋亡率的对比第54-55页
        10. 血清 TNF-α含量与 AECⅡ的凋亡的相关性第55页
    讨论第55-58页
        1. 重症急性胰腺炎相关肺损伤的发病机制第55-56页
        2. AECⅡ的凋亡在 ALI 的发生发展过程中的作用第56-58页
    结论第58-59页
    参考文献第59-68页
    附图第68-72页
第二部分 清胰汤干预重症急性胰腺炎时肺泡Ⅱ上皮细胞凋亡相关基因和蛋白表达及钙通道功能的实验研究第72-114页
    前言第72页
    材料和方法第72-86页
        1. 动物及实验分组第72-73页
        2. 材料第73-76页
            2.1 主要设备、仪器第73-74页
            2.2 主要试剂第74-75页
            2.3 主要的药物第75-76页
        3. 实验过程和方法第76-86页
            3.1 RT-PCR 检测 AECⅡ中 Caspase-8、Bax 基因表达情况第76-79页
            3.2 免疫组化检测肺组织 Caspase-8 蛋白及 Bax 蛋白表达情况第79-80页
            3.3 Western blot检测肺组织中 Bax 、 Bcl-2 、Caspase-3 、Caspase-9 蛋白量的表达第80-86页
            3.4 使用激光扫描共聚焦显微镜检测 AECⅡ内游离钙离子的浓度第86页
        4. 统计学方法第86页
    结果第86-96页
        1. 肺泡Ⅱ型上皮细胞 Caspase-8 和 BaxmRNA 表达的对比第86-88页
        2. 免疫组化检测大鼠肺组织 Caspase-8 蛋白和 Bax 蛋白表达的平均光密度的对比第88-90页
        3. Western blot 检测肺组织 Bcl-2、 Bax、Caspase-3、Caspase-9 表达第90-94页
        4. 激光共聚焦显微镜检测 AECⅡ胞内游离 Ca2+浓度的比较第94-95页
        5. Caspase-8mRNA、 BaxmRNA 与 AECⅡ凋亡的相关性第95页
        6. AECⅡ胞内游离钙离子浓度与 AECⅡ的凋亡的相关性第95-96页
    讨论第96-106页
        1. 与肺泡 II 上皮细胞细胞凋亡相关基因和蛋白的表达第96-101页
        2. 钙通道功能改变在 S A P 急性肺损伤中的作用第101-103页
        3. 急性胰腺炎的中医病因和病机及清胰汤对 S AP 时急性肺损伤的作用第103-106页
    结论第106-107页
    参考文献第107-111页
    附图第111-114页
第三部分 膜片钳技术探讨钙通道电流变化第114-128页
    前言第114-115页
    材料和方法第115-118页
        1. A549 细胞及实验分组第115页
        2. 材料第115-117页
            2.1 主要设备、仪器第115-116页
            2.2 主要试剂第116页
            2.3 实验所需溶液第116-117页
        3. 实验方法第117-118页
            3.1 实验分组第117页
            3.2 细胞系的复苏与传代第117页
            3.3 全细胞膜片钳的记录方法第117-118页
    结果第118-121页
        1. 正常 A549 细胞系的形态第118-119页
        2. LP S 处理对 A549 细胞系钙通道电流的影响及比较第119-121页
        3. 硝苯地平对 10μg/mL LPS 处理的 A549 细胞钙通道电流影响第121页
    讨论第121-122页
    结论第122-123页
    参考文献第123-128页
综述第128-140页
    1. 肺泡 II 型上皮细胞的功能及在 ALI 时的意义第128-129页
    2. 肺泡 II 型上皮细胞凋亡的信号通路第129-131页
    3. 钙离子与肺泡 II 型上皮细胞的凋亡第131-134页
    4. 肺泡 II 型上皮细胞凋亡的干预及意义第134-135页
    参考文献第135-140页
缩略词表第140-141页
攻读学位期间发表文章情况第141-142页
致谢第142-144页

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