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转移远缘物种基因组DNA创新水稻种质及分子机理研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
目录第9-12页
缩略词表第12-13页
1 绪论第13-22页
    1.1 利用远缘物种创新水稻种质的主要方法第13-17页
        1.1.1 远缘杂交第14页
        1.1.2 基因工程第14-15页
        1.1.3 外源DNA导入植物技术第15-17页
    1.2 外源DNA导入相关机理研究进展第17-18页
    1.3 基因组学研究进展第18-20页
        1.3.1 下一代测序技术及其应用第18-19页
        1.3.2 RAD(Restriction-site associated DNA tags)测序技术及其应用第19-20页
        1.3.3 水稻功能基因组组学研究进展第20页
    1.4 本课题研究内容和目的意义第20-22页
2 穗茎注射法创新水稻新种质及其遗传多样性分析第22-32页
    2.1 实验材料与试剂第22-23页
        2.1.1 用于穗茎注射法的水稻供体和受体第22页
        2.1.2 主要试剂与配方第22-23页
    2.2 实验方法第23-26页
        2.2.1 植物基因组DNA提取方法第23-24页
        2.2.2 穗茎注射法流程第24页
        2.2.3 PCR检测变异材料与亲本之间的遗传多样性第24-26页
    2.3 结果与分析第26-30页
        2.3.1 穗茎注射法历年所用供受体、变异单株数和变异率统计第26-27页
        2.3.2 变异单株与供受体之间的遗传多样性分析第27-28页
        2.3.3 变异单株和供受体之间的带型分布特点第28-30页
        2.3.4 外源基因组DNA导入过程中的“重组突变热点”现象第30页
    2.4 讨论第30-32页
3 导入紧穗野生稻D1代变异株和D2代自交群体遗传、分离规律研究第32-50页
    3.1 实验材料第32页
    3.2 实验方法第32-34页
        3.2.1 表型鉴定第32-33页
        3.2.2 RH78和ERV1基因组深度重测序第33页
        3.2.3 群体RAD测序及比较基因组分析第33-34页
    3.3 结果与分析第34-47页
        3.3.1 重测序样本表型鉴定及比较分析第34-35页
        3.3.2 重测序基本数据统计第35页
        3.3.3 ERV1和RH78之间SNP的检测及分析第35-39页
        3.3.4 群体RAD测序第39页
        3.3.5 群体基因分型和遗传连锁图谱构建第39-41页
        3.3.6 表型鉴定第41-42页
        3.3.7 QTL定位第42-44页
        3.3.8 D2代株系基因组纯合度,杂合度及自发突变率分析第44-47页
    3.4 讨论第47-50页
4 导入小粒野生稻高世代稳定变异系遗传、分离规律研究第50-111页
    4.1 实验材料第50-52页
        4.1.1 测序用水稻材料和群体第50-51页
        4.1.2 主要试剂与配方第51-52页
    4.2 实验方法第52-58页
        4.2.1 表型测定第52页
        4.2.2 片段PCR扩增第52-53页
        4.2.3 片段TA克隆及检测第53-55页
        4.2.4 RNA提取和cDNA第一链的合成第55页
        4.2.5 实时荧光定量PCR第55-56页
        4.2.6 Southern blotting第56-58页
    4.3 结果与分析第58-108页
        4.3.1 性状调查与表型比较分析第58-63页
        4.3.2 全基因组测序和比较基因组分析第63-100页
        4.3.3 解析YVB品质性状变异的分子机理-关联表型变异与基因型变异第100-108页
    4.4 讨论第108-111页
5 结论第111-116页
    5.1 主要结论及综合讨论第111-114页
        5.1.1 主要结论第111页
        5.1.2 综合讨论第111-114页
    5.2 本文特色与创新点第114页
        5.2.1 主要基于组学的外源DNA导入变异系性状变异分子机理研究有创新性第114页
        5.2.2 利用远缘物种间后代扩展比较基因组研究具有创新性第114页
        5.2.3 新基因的发掘途径上有特色第114页
    5.3 不足和下一步工作计划第114-116页
        5.3.1 变异单株的分子鉴定第114页
        5.3.2 不同世代变异单株的遗传、分离规律第114-115页
        5.3.3 外源特异片段的鉴定和验证第115页
        5.3.4 表型变异关联基因的定位与克隆第115-116页
参考文献第116-125页
附录A第125-127页
攻读学位期间发表的论文与成果第127-128页
致谢第128-129页

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