| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第11-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-23页 |
| 第一章 庆大霉素的研究进展 | 第13-16页 |
| 1 庆大霉素特性 | 第13页 |
| 2 庆大霉素的抗菌机制 | 第13-14页 |
| 3 庆大霉素的临床应用 | 第14页 |
| 4 庆大霉素的毒性研究 | 第14-15页 |
| 4.1 庆大霉素的肾毒性 | 第14-15页 |
| 4.2 庆大霉素的耳毒性 | 第15页 |
| 5 庆大霉素肾毒性机制 | 第15-16页 |
| 5.1 庆大霉素蓄积影响细胞功能 | 第15页 |
| 5.2 氧化应激 | 第15-16页 |
| 5.3 庆大霉素诱导细胞凋亡 | 第16页 |
| 第二章 细胞凋亡 | 第16-20页 |
| 1 细胞凋亡概述 | 第16页 |
| 2 细胞凋亡途径 | 第16-18页 |
| 2.1 外源性途径-死亡受体通路 | 第16-17页 |
| 2.2 内源性途径-线粒体途径 | 第17-18页 |
| 2.3 内质网应激通路 | 第18页 |
| 3 线粒体膜通透性转换孔与细胞凋亡的关系 | 第18-20页 |
| 第三章 依达拉奉与细胞凋亡的关系 | 第20-22页 |
| 1 依达拉奉抗氧化特性 | 第20页 |
| 2 依达拉奉对凋亡的保护作用 | 第20-22页 |
| 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二部分 试验部分 | 第23-59页 |
| 第一章 庆大霉素对MDCK细胞的毒性作用 | 第23-38页 |
| 1 材料和方法 | 第23-27页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第23页 |
| 1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 1.3 主要仪器 | 第24页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第24页 |
| 1.5 MDCK细胞培养 | 第24-25页 |
| 1.6 细胞处理及分组 | 第25页 |
| 1.7 CCK-8法检测庆大霉素对MDCK细胞存活率的影响 | 第25页 |
| 1.8 ELISA检测KIM-1及NGAL含量 | 第25页 |
| 1.9 流式细胞术检测MPTP开放情况 | 第25-26页 |
| 1.10 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第26页 |
| 1.11 Hochest 33258染色观察细胞核形态的变化 | 第26页 |
| 1.12 免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的表达 | 第26页 |
| 1.13 数据分析 | 第26-27页 |
| 2 结果 | 第27-36页 |
| 2.1 庆大霉素对MDCK细胞存活率的影响 | 第27-28页 |
| 2.2 庆大霉素对MDCK细胞KIM-1和NGAL含量变化的影响 | 第28-29页 |
| 2.2.1 不同浓度庆大霉素对MDCK细胞KIM-1和NGAL含量变化的影响 | 第28页 |
| 2.2.2 庆大霉素处理不同时间对MDCK细胞KIM-1和NGAL含量变化的影响 | 第28-29页 |
| 2.3 庆大霉素对MDCK细胞MPTP开放的影响 | 第29-30页 |
| 2.4 庆大霉素对MDCK细胞凋亡率的影响 | 第30-32页 |
| 2.4.1 不同浓度庆大霉素对MDCK细胞凋亡率的影响 | 第30-31页 |
| 2.4.2 庆大霉素处理不同时间对MDCK细胞凋亡率的影响 | 第31-32页 |
| 2.5 庆大霉素对MDCK细胞核形态的影响 | 第32-34页 |
| 2.5.1 不同浓度庆大霉素对MDCK细胞核形态的影响 | 第32-33页 |
| 2.5.2 庆大霉素处理不同时间对MDCK细胞核形态的影响 | 第33-34页 |
| 2.6 庆大霉素对MDCK细胞Bax与Bcl-2蛋白表达的影响 | 第34-36页 |
| 2.6.1 不同浓度庆大霉素对MDCK细胞Bax与Bcl-2蛋白表达的影响 | 第34-35页 |
| 2.6.2 庆大霉素处理不同时间对MDCK细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响 | 第35-36页 |
| 3 讨论 | 第36-38页 |
| 第二章 MPTP在庆大霉素诱导MDCK细胞线粒体凋亡途径中的作用 | 第38-49页 |
| 1 材料和方法 | 第38-41页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第38页 |
| 1.2 主要试剂 | 第38页 |
| 1.3 主要仪器 | 第38-39页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第39页 |
| 1.5 MDCK细胞培养 | 第39页 |
| 1.6 流式细胞术检测MPTP开放情况 | 第39页 |
| 1.7 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第39页 |
| 1.8 荧光检测线粒体形态 | 第39-40页 |
| 1.9 ATP合成的检测 | 第40页 |
| 1.10 线粒体膜电位检测 | 第40页 |
| 1.11 线粒体与胞浆蛋白制备 | 第40页 |
| 1.12 免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的表达 | 第40-41页 |
| 1.13 数据分析 | 第41页 |
| 2 结果 | 第41-47页 |
| 2.1 庆大霉素与CsA对MDCK细胞MPTP开放的影响 | 第41页 |
| 2.2 庆大霉素与CsA对MDCK细胞线粒体的影响 | 第41-43页 |
| 2.3 庆大霉素与CsA对MDCK细胞线粒体膜电位的影响 | 第43-44页 |
| 2.4 庆大霉素与CsA对MDCK细胞凋亡的影响 | 第44页 |
| 2.5 庆大霉素与CsA对MDCK细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
| 2.6 庆大霉素与CsA对MDCK细胞caspase-9、caspase-3和PARP蛋白活化的影响 | 第45-46页 |
| 2.7 庆大霉素与CsA对MDCK细胞Cyt C和AIF释放的影响 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第三章 依达拉奉在庆大霉素诱导MDCK细胞凋亡中的保护效应 | 第49-59页 |
| 1 材料和方法 | 第49-51页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第49页 |
| 1.2 实验试剂 | 第49页 |
| 1.3 主要仪器 | 第49页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第49-50页 |
| 1.5 MDCK细胞培养 | 第50页 |
| 1.6 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第50页 |
| 1.7 Hochest 33258染色观察细胞核形态的变化 | 第50页 |
| 1.8 MDCK细胞内活性氧的检测 | 第50页 |
| 1.9 T-SOD、GSH-Px、CAT活力和MDA含量的测定 | 第50页 |
| 1.10 线粒体与胞浆蛋白的制备 | 第50页 |
| 1.11 免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的表达 | 第50-51页 |
| 1.12 数据分析 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-57页 |
| 2.1 庆大霉素与EDa对MDCK细胞凋亡的影响 | 第51-52页 |
| 2.2 庆大霉素与EDa对MDCK细胞ROS生成的影响 | 第52-53页 |
| 2.3 庆大霉素与EDa对MDCK细胞抗氧化酶活性的影响 | 第53-54页 |
| 2.4 庆大霉素与EDa对MDCK细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响 | 第54-55页 |
| 2.5 庆大霉素与EDa对MDCK细胞caspase-9、caspase-3和PARP蛋白活化的影响 | 第55-56页 |
| 2.6 庆大霉素与EDa对MDCK细胞Cyt C和AIF释放的影响 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| 全文结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第72-73页 |
