| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-21页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第12-13页 |
| 1.2 文献综述 | 第13-19页 |
| 1.2.1 纤维素 | 第13-14页 |
| 1.2.2 纤维素酶 | 第14-15页 |
| 1.2.3 纤维低聚糖 | 第15-16页 |
| 1.2.4 重组内切葡聚糖酶研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2.5 内切葡聚糖酶应用 | 第18-19页 |
| 1.3 本论文的主要研究内容 | 第19-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 菌种与载体 | 第21页 |
| 2.1.2 酶和主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 常用试剂的配制 | 第21-23页 |
| 2.1.4 培养基 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-31页 |
| 2.2.1 黑曲霉基因组DNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.2.2 基因克隆 | 第24-27页 |
| 2.2.3 根癌农杆菌介导的黑曲霉的遗传转化 | 第27-28页 |
| 2.2.4 同源重组菌株中潮霉素抗性基因的消除 | 第28页 |
| 2.2.5 内切葡聚糖酶酶活测定 | 第28-29页 |
| 2.2.6 重组菌株分泌蛋白检测 | 第29页 |
| 2.2.7 重组菌株酶学性质分析 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-40页 |
| 3.1 内切葡聚糖酶基因engl的构建 | 第31-34页 |
| 3.1.1 黑曲霉基因组的提取 | 第31页 |
| 3.1.2 内切葡聚糖酶engl基因的克隆 | 第31-33页 |
| 3.1.3 内切葡聚糖酶engl基因黑曲霉表达载体pSZHG-engl的构建 | 第33-34页 |
| 3.2 农杆菌介导法对黑曲霉的遗传转化 | 第34-36页 |
| 3.2.1 采用冻融法转化农杆菌 | 第34页 |
| 3.2.2 农杆菌转化子与黑曲霉的共培养 | 第34-35页 |
| 3.2.3 黑曲霉转化子的筛选和鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3 黑曲霉同源重组转化子的筛选与鉴定 | 第36-37页 |
| 3.4 内切葡聚糖酶在重组菌株的表达 | 第37-40页 |
| 3.4.1 内切葡聚糖酶酶活性测定 | 第37页 |
| 3.4.2 内切葡聚糖酶在重组菌株中表达分析 | 第37-38页 |
| 3.4.3 内切葡聚糖酶在重组菌株中酶学性质分析 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-41页 |
| 5 结论 | 第41-42页 |
| 5.1 内切葡聚糖酶基因的克隆 | 第41页 |
| 5.2 内切葡聚糖酶engl基因黑曲霉表达载体pSZHG-engl的构建 | 第41页 |
| 5.3 黑曲霉重组转化子的筛选 | 第41页 |
| 5.4 同源重组转化子的筛选 | 第41页 |
| 5.5 重组菌株的酶活性检测 | 第41页 |
| 5.6 内切葡聚糖酶重组菌株蛋白分泌检测及酶学分析 | 第41-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第48页 |
