草菇漆酶基因异源表达的研究
| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-17页 |
| 1.1 草菇 | 第8-9页 |
| 1.1.1 营养价值 | 第8页 |
| 1.1.2 生物学特性 | 第8-9页 |
| 1.1.3 生长发育条件 | 第9页 |
| 1.2 漆酶 | 第9-13页 |
| 1.2.1 漆酶的结构和催化机制 | 第10页 |
| 1.2.2 漆酶的生理作用 | 第10-11页 |
| 1.2.3 漆酶的应用 | 第11-13页 |
| 1.3 漆酶的异源表达 | 第13-15页 |
| 1.4 毕赤酵母表达系统 | 第15-16页 |
| 1.4.1 宿主菌 | 第15页 |
| 1.4.2 载体 | 第15-16页 |
| 1.4.3 启动子 | 第16页 |
| 1.5 研究的意义 | 第16-17页 |
| 第二章 草菇漆酶基因的异源表达 | 第17-32页 |
| 2.1 材料 | 第17-20页 |
| 2.1.1 供试菌株及质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要化学试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 溶液 | 第18-19页 |
| 2.1.5 培养基 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-26页 |
| 2.2.1 草菇的培养 | 第20页 |
| 2.2.2 草菇基因组 RNA 的提取 | 第20页 |
| 2.2.3 cDNA 的合成 | 第20-21页 |
| 2.2.4 PCR 扩增与产物纯化 | 第21-22页 |
| 2.2.5 目的基因的克隆连接、转化与测序 | 第22-23页 |
| 2.2.6 表达载体的构建 | 第23-24页 |
| 2.2.7 毕赤酵母感受态的制备和转化 | 第24-25页 |
| 2.2.8 重组子的筛选 | 第25页 |
| 2.2.9 重组蛋白的表达和酶活测定 | 第25-26页 |
| 2.3 结果分析 | 第26-30页 |
| 2.3.1 目的基因的 PCR 扩增 | 第26页 |
| 2.3.2 表达载体的构建及鉴定 | 第26-28页 |
| 2.3.3 重组子的活性筛选 | 第28页 |
| 2.3.4 多克隆酵母转化子的筛选 | 第28-29页 |
| 2.3.5 蛋白表达及测定 | 第29-30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 2.4.1 重组子的漆酶活性 | 第30-31页 |
| 2.4.2 漆酶蛋白的表达 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-36页 |
| 致谢 | 第36-37页 |
| 作者简介 | 第37页 |
