| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-26页 |
| 1.1 昆虫病原线虫共生菌 | 第13-14页 |
| 1.1.1 昆虫病原线虫共生菌简介 | 第13页 |
| 1.1.2 嗜线虫致病杆菌 YL001 简介 | 第13-14页 |
| 1.2 昆虫病原线虫共生菌生物学特性 | 第14-18页 |
| 1.2.1 生活史 | 第14-15页 |
| 1.2.2 型态变异 | 第15页 |
| 1.2.3 毒素蛋白研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.4 次级代谢产物合成与调控 | 第16-18页 |
| 1.3 微生物菌种改良 | 第18-22页 |
| 1.3.1 发酵条件优化 | 第18-19页 |
| 1.3.2 诱变育种结合生物活性筛选 | 第19页 |
| 1.3.3 核糖体工程 | 第19-20页 |
| 1.3.4 代谢工程 | 第20-22页 |
| 1.4 细菌中的 Pta-AckA 途径与双组份信号转导系统 CpxA/CpxR | 第22-24页 |
| 1.4.1 Pta-AckA 途径简介 | 第22页 |
| 1.4.2 信号分子乙酰磷酸 | 第22-23页 |
| 1.4.3 双组份信号转导系统 CpxA/CpxR | 第23-24页 |
| 1.5 昆虫病原线虫共生菌遗传操作方法 | 第24-25页 |
| 1.5.1 全基因组测序 | 第24页 |
| 1.5.2 遗传转化方法 | 第24-25页 |
| 1.6 本论文研究内容和意义 | 第25-26页 |
| 第二章 材料与方法 | 第26-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 试剂 | 第26页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第26页 |
| 2.1.3 培养基 | 第26-27页 |
| 2.1.4 仪器 | 第27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-37页 |
| 2.2.1 YL001 菌种活化 | 第27页 |
| 2.2.2 YL001 基因组 DNA 提取 | 第27-28页 |
| 2.2.3 ackA 与 ackA-pta 两侧同源臂扩增与融合 | 第28页 |
| 2.2.4 重组自杀载体构建 | 第28-31页 |
| 2.2.5 接合转移 | 第31-33页 |
| 2.2.6 重组自杀载体转化与突变体筛选 | 第33页 |
| 2.2.7 野生株 YL001、突变株ΔackA-pta 和突变株 HS-YL001 的生长代谢差异分析 | 第33-35页 |
| 2.2.8 野生株 YL001、突变株ΔackA-pta 和突变株 HS-YL001 代谢谱差异分析 | 第35页 |
| 2.2.9 抗菌物质合成相关基因及 CpxRA 途径主要基因的表达差异分析 | 第35-37页 |
| 第三章 结果与分析 | 第37-48页 |
| 3.1 YL001 基因组 DNA 的提取 | 第37页 |
| 3.2 overlap PCR 合成目的基因缺失的融合片段 | 第37-38页 |
| 3.3 重组自杀载体的构建 | 第38-39页 |
| 3.4 YL001 对几种抗生素最小抑制浓度 | 第39页 |
| 3.5 转化转移与突变体筛选 | 第39-40页 |
| 3.6 野生株 YL001、突变株ΔackA-pta 与 HS-YL001 生长代谢差异比较 | 第40-45页 |
| 3.6.1 在 NA 培养基上的培养特征 | 第40-41页 |
| 3.6.2 不同菌株的生长特征 | 第41页 |
| 3.6.3 摇瓶与发酵罐培养过程中 pH 的变化动态 | 第41-44页 |
| 3.6.4 发酵罐培养过程碳代谢情况 | 第44页 |
| 3.6.5 发酵罐培养过程溶氧浓度（DO）变化动态 | 第44-45页 |
| 3.6.6 野生株 YL001、突变株ΔackA-pta、突变株 HS-YL001 抑菌活性分析 | 第45页 |
| 3.7 野生株 YL001、突变株ΔackA-pta、突变株 HS-YL001 代谢谱差异分析 | 第45-46页 |
| 3.8 野生株 YL001、突变株ΔackA-pta 和 HS-YL001 相关基因表达差异分析 | 第46-48页 |
| 3.8.1 总 RNA 的提取 | 第46页 |
| 3.8.2 qRT-PCR | 第46-48页 |
| 第四章 讨论 | 第48-50页 |
| 4.1 X．nematophila YL001 接合转移方法的探索 | 第48页 |
| 4.2 热击转化对 X．nematophila YL001 的影响 | 第48-49页 |
| 4.3 Pta-AckA 途径在 X．nematophila YL001 中的作用 | 第49页 |
| 4.4 CpxR 对 X．nematophila YL001 的抑菌活性调控作用 | 第49-50页 |
| 第五章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 附件 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
