| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略语 | 第11-16页 |
| 第一部分 ：PA对骨髓间充质干细胞的脂毒性作用研究 | 第16-38页 |
| 1 前言 | 第16-19页 |
| 2 研究资料与方法 | 第19-28页 |
| 2.1 研究资料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第19页 |
| 2.1.2 主要材料 | 第19-20页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-28页 |
| 2.2.1 不同浓度棕榈酸的制备 | 第21页 |
| 2.2.2 细胞复苏与培养 | 第21页 |
| 2.2.3 细胞传代 | 第21-22页 |
| 2.2.4 细胞冻存 | 第22页 |
| 2.2.5 细胞计数 | 第22页 |
| 2.2.6 MTT检测细胞活力 | 第22页 |
| 2.2.7 流式细胞术检测细胞凋亡(AnnexinV-FITC/PI) | 第22-23页 |
| 2.2.8 Westernblot检测相关蛋白 | 第23-25页 |
| 2.2.9 透射电镜观察自噬小体形态和数量 | 第25-26页 |
| 2.2.10 免疫荧光检测细胞内源性LC3分布 | 第26-27页 |
| 2.2.11 统计学分析方法 | 第27-28页 |
| 3 结果 | 第28-33页 |
| 3.1 棕榈酸以浓度时间依赖的方式促进细胞凋亡 | 第28-30页 |
| 3.1.1 PA对骨髓间充质干细胞活力的影响(MTT法) | 第28页 |
| 3.1.2 PA对骨髓间充质干细胞凋亡的影响(流式细胞术) | 第28-29页 |
| 3.1.3 PA促进凋亡相关标志蛋白的表达 | 第29-30页 |
| 3.2 PA诱导骨髓间充质干细胞产生自噬 | 第30-33页 |
| 3.2.1 PA增加骨髓间充质干细内自噬体数量(透射电镜) | 第30页 |
| 3.2.2 PA增加骨髓间充质干细内LC3内源性聚集 | 第30-31页 |
| 3.2.3 PA以浓度依赖的方式增加自噬正相关蛋白的表达,减少负相关蛋白的表达 | 第31-32页 |
| 3.2.4 PA长时间作用于细胞后自噬负相关蛋白p62表达增多 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-37页 |
| 5 结论 | 第37-38页 |
| 第二部分 ：调控自噬对PA诱导骨髓间充质干细胞凋亡的影响 | 第38-51页 |
| 1 前言 | 第38-40页 |
| 2 研究资料与方法 | 第40-44页 |
| 2.1 研究资料 | 第40-41页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第40页 |
| 2.1.2 主要材料 | 第40-41页 |
| 2.1.3 实验仪器： | 第41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 2.2.1 不同浓度棕榈酸的制备 | 第41-42页 |
| 2.2.2 MTT检测细胞活力 | 第42页 |
| 2.2.3 凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9的活性检测(分光光度法) | 第42页 |
| 2.2.4 流式细胞术检测细胞凋亡(AnnexinV-FITC/PI) | 第42页 |
| 2.2.5 Westernblot检测相关蛋白 | 第42页 |
| 2.2.6 统计学分析方法 | 第42-44页 |
| 3 结果 | 第44-48页 |
| 3.1 自噬参与PA对骨髓间充质干细胞活力抑制作用的调节 | 第44-48页 |
| 3.1.1 自噬对凋亡相关标志蛋白活性的影响(分光光度法) | 第44-45页 |
| 3.1.2 自噬参与PA诱导骨髓间充质干细胞凋亡的调节(流式细胞术) | 第45-46页 |
| 3.1.3 自噬对凋亡相关标志蛋白的表达调节 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 第三部分 ：PA通过ROS-JNK/p38MAPK信号通路诱导骨髓间充质干细胞自噬 | 第51-66页 |
| 1 前言 | 第51-53页 |
| 2 研究资料与方法 | 第53-57页 |
| 2.1 研究资料 | 第53-54页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第53页 |
| 2.1.2 主要材料 | 第53-54页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第54页 |
| 2.2 实验方法 | 第54-57页 |
| 2.2.1 不同浓度棕榈酸的制备 | 第54-55页 |
| 2.2.2 流式细胞术检测细胞内ROS含量 | 第55页 |
| 2.2.3 荧光显微镜技术检测细胞内ROS含量 | 第55页 |
| 2.2.4 免疫荧光检测细胞内源性LC3分布 | 第55-56页 |
| 2.2.5 Westernblot检测相关蛋白 | 第56页 |
| 2.2.6 统计学分析方法 | 第56-57页 |
| 3 结果 | 第57-62页 |
| 3.1 PA上调骨髓间充质干细胞内ROS含量 | 第57-58页 |
| 3.2 PA通过ROS-JNK/p38MAPK信号通路诱导骨髓间充质干细胞自噬 | 第58-62页 |
| 3.2.1 抗氧化剂NAC抑制PA作用下骨髓间充质干细内LC3内源性聚集 | 第58页 |
| 3.2.2 PA促进通路相关蛋白P-JNK、P-p38MAPK的表达 | 第58-59页 |
| 3.2.3 抗氧化剂NAC抑制PA作用下自噬相关蛋白LC3II及通路相关蛋白P-JNK、P-p38MAPK的表达 | 第59-61页 |
| 3.2.4 SP600125和SB203580抑制细胞内LC3II蛋白的表达,促进p62蛋白表达 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-65页 |
| 5 结论 | 第65-66页 |
| 本研究创新性的自我评价 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 综述 | 第77-89页 |
| 参考文献 | 第83-89页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-91页 |
| 个人简介 | 第91页 |
