摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略语 | 第11-15页 |
前言 | 第15-17页 |
第一部分 :含胆碱能细胞杂合假胰岛的构建及体外功能的鉴定 | 第17-39页 |
1 材料及方法 | 第17-27页 |
1.1 材料与试剂 | 第17-20页 |
1.1.1 细胞 | 第17页 |
1.1.2 试剂与耗材 | 第17-19页 |
1.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
1.2 实验方法 | 第20-27页 |
1.2.1 细胞培养 | 第20页 |
1.2.2 表达绿色荧光蛋白INS-1-GFP细胞的构建 | 第20-21页 |
1.2.3 表达红色荧光蛋白NG108-15-RFP细胞的构建 | 第21页 |
1.2.4 CCK-8检测细胞活力 | 第21-22页 |
1.2.5 单层共培养方法 | 第22页 |
1.2.6 三维共培养方法(假胰岛构建方法) | 第22页 |
1.2.7 葡萄糖刺激胰岛素分泌功能检测样品的制备 | 第22-23页 |
1.2.8 ELISA法检测葡萄糖刺激胰岛素分泌功能 | 第23页 |
1.2.9 免疫荧光检测单层细胞E-钙黏素表达 | 第23-24页 |
1.2.10 免疫荧光检测杂合假胰岛E-钙黏素表达 | 第24-25页 |
1.2.11 Western-blot蛋白印记检测E-钙黏素表达 | 第25-26页 |
1.2.12 E-钙黏素抗体封闭实验 | 第26-27页 |
1.2.13 结果分析与统计学分析 | 第27页 |
2 结果 | 第27-37页 |
2.1 含1×HT的INS-1培养基是较为理想的短期共培养培养基 | 第27-29页 |
2.2 共培养体系下的细胞形态学特征 | 第29-32页 |
2.3 共培养系统的葡萄糖刺激胰岛素分泌能力 | 第32-34页 |
2.4 E-钙黏素是杂合假胰岛形成的关键因素 | 第34-37页 |
3 讨论 | 第37-38页 |
4 结论 | 第38-39页 |
第二部分 :含胆碱能细胞杂合假胰岛皮下移植治疗糖尿病的实验研究 | 第39-56页 |
1 材料及方法 | 第39-46页 |
1.1 材料与试剂 | 第39-41页 |
1.1.1 细胞与动物 | 第39页 |
1.1.2 试剂与耗材 | 第39-40页 |
1.1.3 主要仪器 | 第40-41页 |
1.2 实验方法 | 第41-46页 |
1.2.1 细胞培养 | 第41页 |
1.2.2 CCK-8检测细胞活力 | 第41-42页 |
1.2.3 EdU检测细胞增殖 | 第42-43页 |
1.2.4 糖尿病裸鼠模型的构建 | 第43页 |
1.2.5 假胰岛的皮下移植 | 第43-44页 |
1.2.6 皮下移植后血糖检测 | 第44页 |
1.2.7 腹腔注射糖耐量试验 | 第44页 |
1.2.8 样品石蜡切片的制备 | 第44-45页 |
1.2.9 HE染色 | 第45页 |
1.2.10 免疫组化染色 | 第45-46页 |
1.2.11 结果分析与统计学分析 | 第46页 |
2 结果 | 第46-54页 |
2.1 共培养系统不影响INS-1细胞的增殖 | 第46-49页 |
2.2 皮下假胰岛移植对糖尿病裸鼠血糖的影响 | 第49-51页 |
2.3 皮下假胰岛移植对糖尿病裸鼠糖耐量的影响 | 第51-52页 |
2.4 杂合假胰岛移植物的HE染色及免疫组化染色 | 第52-54页 |
3 讨论 | 第54-55页 |
4 结论 | 第55-56页 |
对本研究创新性的自我评价 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-60页 |
综述 | 第60-70页 |
参考文献 | 第66-70页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
个人简历 | 第72页 |