| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第13-32页 |
| 第一章 饲养层及其培养体系 | 第13-21页 |
| 1.1 饲养层的来源 | 第13-14页 |
| 1.1.1 饲养层定义 | 第13页 |
| 1.1.2 鼠源饲养层细胞 | 第13-14页 |
| 1.1.3 人源饲养层细胞 | 第14页 |
| 1.2 饲养层的制备 | 第14-16页 |
| 1.2.1 丝裂霉素C法 | 第15页 |
| 1.2.2 射线法 | 第15页 |
| 1.2.3 其他方法 | 第15-16页 |
| 1.3 多能干细胞无饲养层培养体系 | 第16-21页 |
| 1.3.1 重组细胞外基质蛋白 | 第16-17页 |
| 1.3.2 合成大分子化合物 | 第17-18页 |
| 1.3.3 细胞提取物 | 第18页 |
| 1.3.4 物理方法处理培养皿 | 第18页 |
| 1.3.5 悬浮培养 | 第18-19页 |
| 1.3.6 3D培养 | 第19-21页 |
| 第二章 饲养层细胞与多能干细胞的相互作用 | 第21-32页 |
| 2.1 饲养层细胞外基质 | 第21-25页 |
| 2.1.1 细胞外基质与干细胞微环境 | 第21-23页 |
| 2.1.2 胶原蛋白 | 第23-24页 |
| 2.1.3 层粘连蛋白 | 第24-25页 |
| 2.1.4 玻璃粘连蛋白 | 第25页 |
| 2.1.5 纤维粘连蛋白 | 第25页 |
| 2.2 多能干细胞表面粘附分子 | 第25-30页 |
| 2.2.1 Integrin家族及其介导的信号通路 | 第25-28页 |
| 2.2.2 Cadherin家族及其介导的信号通路 | 第28-30页 |
| 2.3 饲养层细胞对多能干细胞的作用机制 | 第30-32页 |
| 2.3.1 多能干细胞概述 | 第30页 |
| 2.3.2 饲养层细胞在多能干细胞体外培养中的作用 | 第30-32页 |
| 试验研究 | 第32-76页 |
| 前言 | 第32-34页 |
| 第三章 甲醇固定法制备饲养层细胞 | 第34-49页 |
| 3.1 材料和方法 | 第34-42页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第34-36页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第36-42页 |
| 3.2 结果 | 第42-47页 |
| 3.2.1 戊二醛固定法和甲醇固定法的比较 | 第42页 |
| 3.2.2 优化甲醇：丙酮比例 | 第42-43页 |
| 3.2.3 优化甲醇固定剂浓度 | 第43-45页 |
| 3.2.4 饲养层细胞密度的确定 | 第45页 |
| 3.2.5 甲醇固定时间的确立 | 第45-46页 |
| 3.2.6 甲醇温度的比较 | 第46页 |
| 3.2.7 甲醇处理不同来源的细胞 | 第46-47页 |
| 3.3 讨论 | 第47-48页 |
| 3.4 小结 | 第48-49页 |
| 第四章 甲醇固定饲养层用于干细胞培养 | 第49-61页 |
| 4.1 材料和方法 | 第49-53页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第49-50页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第50-53页 |
| 4.2 结果 | 第53-59页 |
| 4.2.1 培养小鼠胚胎干细胞 | 第53-55页 |
| 4.2.2 培养小鼠iPS细胞 | 第55-57页 |
| 4.2.3 培养人iPS细胞 | 第57-58页 |
| 4.2.4 培养猪iPS细胞 | 第58-59页 |
| 4.3 讨论 | 第59-60页 |
| 4.4 小结 | 第60-61页 |
| 第五章 甲醇固定饲养层细胞的其他应用 | 第61-67页 |
| 5.1 材料和方法 | 第61-63页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第61-62页 |
| 5.1.2 试验方法 | 第62-63页 |
| 5.2 结果 | 第63-65页 |
| 5.2.1 药物筛选实验 | 第63页 |
| 5.2.2 重复利用 | 第63-64页 |
| 5.2.3 长期保存 | 第64-65页 |
| 5.3 讨论 | 第65-66页 |
| 5.4 小结 | 第66-67页 |
| 第六章 甲醇固定法的作用机制 | 第67-76页 |
| 6.1 材料和方法 | 第67-69页 |
| 6.1.1 试验材料 | 第67-68页 |
| 6.1.2 试验方法 | 第68-69页 |
| 6.2 结果 | 第69-74页 |
| 6.2.1 甲醇固定法对饲养层细胞表面结构的影响 | 第69页 |
| 6.2.2 蛋白酶处理甲醇固定的饲养层细胞 | 第69-70页 |
| 6.2.3 胞外基质蛋白对干细胞贴壁的影响 | 第70-72页 |
| 6.2.4 基质蛋白对多能干细胞基因表达的影响 | 第72-73页 |
| 6.2.5 饲养层细胞与多能干细胞相互作用机制 | 第73-74页 |
| 6.3 讨论 | 第74-75页 |
| 6.4 小结 | 第75-76页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 论文创新点及下一步研究方向 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-91页 |
| 附录 | 第91-92页 |
| 附表1 研究中使用到的引物列表 | 第91-92页 |
| 缩略词 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 作者简介 | 第94页 |
