摘要 | 第6-8页 |
abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第15-26页 |
1.1 异三聚体G蛋白研究概况 | 第15-17页 |
1.1.1 植物G蛋白研究概述 | 第15-16页 |
1.1.2 超大G蛋白(XLG)的研究 | 第16-17页 |
1.2 G蛋白的调控功能研究 | 第17-22页 |
1.2.1 G蛋白对植物地上部分的调控研究 | 第17-19页 |
1.2.2 G蛋白对于气孔发育的调控 | 第19页 |
1.2.3 G蛋白对于细胞分裂的调控 | 第19-20页 |
1.2.4 G蛋白对根系发育的调控 | 第20-21页 |
1.2.5 G蛋白对植物糖信号的调控研究 | 第21页 |
1.2.6 G蛋白对抗逆反应的调控研究 | 第21-22页 |
1.3 植物氮素信号转导研究进展 | 第22-24页 |
1.3.1 硝态氮转运蛋白的功能与表达 | 第22-23页 |
1.3.2 植物体硝态氮在植物体内的调控作用 | 第23-24页 |
1.4 研究的目的与意义和技术路线图 | 第24-26页 |
1.4.1 研究的目的与意义 | 第24页 |
1.4.2 研究内容 | 第24-25页 |
1.4.3 技术路线图 | 第25-26页 |
第二章 试验材料与方法 | 第26-50页 |
2.1 试验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 cDNA文库和菌株 | 第26页 |
2.1.2 质粒和载体 | 第26页 |
2.1.3 拟南芥材料 | 第26-27页 |
2.1.4 烟草材料 | 第27页 |
2.1.5 水稻材料 | 第27页 |
2.2 主要仪器与设备 | 第27页 |
2.3 主要试剂以及试剂盒 | 第27-29页 |
2.4 主要溶液配制 | 第29-31页 |
2.5 主要方法 | 第31-49页 |
2.5.0 总RNA提取及cDNA的合成 | 第31-32页 |
2.5.1 目的基因的克隆 | 第32-34页 |
2.5.2 TOPO克隆和LR反应 | 第34-37页 |
2.5.3 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
2.5.4 酵母感受态细胞的制备和转化 | 第38页 |
2.5.5 酵母的自活化检测和毒性检测 | 第38-39页 |
2.5.6 酵母文库的构建和保存 | 第39页 |
2.5.7 酵母杂交(Mating) | 第39-40页 |
2.5.8 酵母细胞的DNA提取 | 第40-41页 |
2.5.9 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第41-42页 |
2.5.10 烟草叶片的瞬时表达(BIFC) | 第42页 |
2.5.11 原生质体的制备和转化 | 第42-43页 |
2.5.12 叶绿素含量的测定(化学萃取法) | 第43页 |
2.5.13 实时荧光定量PCR | 第43-46页 |
2.5.14 拟南芥悬浮培养和盐胁迫处理 | 第46页 |
2.5.15 拟南芥平板培养 | 第46-47页 |
2.5.16 拟南芥水培培养 | 第47页 |
2.5.17 拟南芥氮素吸收测定 | 第47页 |
2.5.18 拟南芥硝态氮原初反应测定以及转录组测定 | 第47-48页 |
2.5.19 水稻根系构型测定系统 | 第48页 |
2.5.20 拟南芥GS活性测定 | 第48-49页 |
2.6 数据处理主要软件 | 第49-50页 |
第三章 XLG蛋白互作组的筛选以及功能分析 | 第50-69页 |
3.1 互作蛋白的筛选 | 第50-56页 |
3.2 GO分析结果显示在胁迫反应中的富集 | 第56-59页 |
3.3 XLG互作蛋白组基因表达的相关性分析 | 第59-60页 |
3.4 XLG核心互作蛋白组 | 第60页 |
3.5 XLG互作蛋白决定XLG蛋白的亚细胞定位 | 第60-65页 |
3.6 XLGs与SZFs和DCDs在细胞核中互作 | 第65-67页 |
3.7 新发现的蛋白参与XLG调控的反应 | 第67-68页 |
3.8 小结 | 第68-69页 |
第四章 G蛋白对盐分胁迫的调控机理研究 | 第69-76页 |
4.1 AtSZF1和AtSZF2的盐分胁迫诱导受到G蛋白的调控 | 第69-71页 |
4.2 G蛋白相关突变体以及SZFs突变体盐分胁迫的表型 | 第71-73页 |
4.3 G蛋白调控盐分胁迫的简单模型 | 第73-74页 |
4.4 小结 | 第74-76页 |
第五章 G蛋白对氮素胁迫的调控机理研究 | 第76-120页 |
5.1 快速无损技术测定叶绿素含量 | 第76-81页 |
5.1.1 测量方法构建 | 第76-78页 |
5.1.2 方法步骤 | 第78-80页 |
5.1.3 结果与讨论 | 第80-81页 |
5.2 G蛋白对外源C/N供应的响应 | 第81-90页 |
5.3 G蛋白通过响应氮素浓度调控根系构型 | 第90-103页 |
5.3.1 水稻G蛋白突变体生长对氮素的响应 | 第90-92页 |
5.3.2 氮素浓度植物根系构型的影响 | 第92-93页 |
5.3.3 氮素对植物根系密度的影响 | 第93-94页 |
5.3.4 氮素对植物根系空间分布的影响 | 第94-98页 |
5.3.5 水稻根系鲜重与根系构型指标的相关性分析 | 第98-100页 |
5.3.6 拟南芥G蛋白调控高氮条件下的根系生长 | 第100页 |
5.3.7 G蛋白信号通路通过响应氮素浓度调控根系构型 | 第100-103页 |
5.4 G蛋白通过氮素的再转移来调控氮素营养胁迫 | 第103-111页 |
5.4.1 低氮条件下AGB1突变体根系生长旺盛而地上部分生长受到抑制 | 第103-105页 |
5.4.2 ABG1突变体中氮素从源到库的运输受到影响 | 第105-107页 |
5.4.3 生殖生长阶段RGS1突变体的养分源到库的运输增加 | 第107-109页 |
5.4.4 AGB1和RGS1突变体根系GS活性降低 | 第109-111页 |
5.5 G蛋白对原初氮素反应的调控研究 | 第111-119页 |
5.5.1 AGB1和XLG突变体的NRT2.1和NRT2.2的基因表达受到抑制 | 第111-112页 |
5.5.2 G蛋白突变体中原初硝态氮反应并没有受到抑制 | 第112-115页 |
5.5.3 重要参与基因的RT-PCR检测结果 | 第115-116页 |
5.5.4 氮素响应过程中G蛋白突变体胁迫和光合作用相关的基因表达发生改变 | 第116-119页 |
5.6 小结 | 第119-120页 |
第六章 主要结论与展望 | 第120-123页 |
6.1 主要结论与讨论 | 第120-121页 |
6.2 文章创新点 | 第121-122页 |
6.3 论文存在的问题及后期研究方向 | 第122-123页 |
参考文献 | 第123-131页 |
英文缩略词 | 第131-132页 |
致谢 | 第132-133页 |
作者简介 | 第133页 |