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苏云金芽胞杆菌杀线虫晶体蛋白Cry6Aa、Cry5Ba和Cry55Aa对南方根结线虫协同作用的研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略语表第10-11页
1 前言第11-24页
    1.1 植物寄生线虫概述第11-13页
        1.1.1 植物寄生线虫分类概述第11页
        1.1.2 植物寄生线虫分类鉴定第11-13页
    1.2 植物寄生线虫的危害第13-14页
    1.3 植物寄生线虫的防治第14-18页
        1.3.1 利用植物寄生线虫的天敌第15-17页
            1.3.1.1 利用真菌第15页
            1.3.1.2 利用细菌第15-16页
            1.3.1.3 利用放线菌第16-17页
        1.3.2 利用杀线虫植物第17页
        1.3.3 利用转基因技术第17-18页
    1.4 苏云金芽胞杆菌防治植物寄生线虫的研究进展第18-22页
        1.4.1 苏云金芽胞杆菌杀线虫蛋白基因克隆与表达第18-20页
        1.4.2 苏云金芽胞杆菌晶体蛋白防治植物线虫研究进展第20-22页
    1.5 苏云金芽胞杆菌杀虫活性成分协同作用的研究第22页
    1.6 本研究的目的和意义第22-24页
2 材料与方法第24-33页
    2.1 实验材料第24-26页
        2.1.1 菌株、质粒和引物第24页
        2.1.2 培养基第24-25页
        2.1.3 抗生素第25页
        2.1.4 药品和实验仪器第25-26页
            2.1.4.1 药品第25-26页
            2.1.4.2 实验仪器第26页
        2.1.5 供试根结线虫第26页
    2.2 实验方法第26-33页
        2.2.1 番茄根结线虫的分离第26-27页
        2.2.2 根结线虫总DNA的抽提第27页
        2.2.3 根结线虫的鉴定第27-28页
        2.2.4 晶体蛋白结构预测第28页
        2.2.5 根结线虫总蛋白的提取第28页
        2.2.6 Ligand blot分析晶体蛋白在根结线虫体内潜在的受体第28-29页
        2.2.7 显微镜观察苏云金芽胞杆菌伴胞晶体第29页
        2.2.8 晶胞混合物SDS-PAGE样品的制备第29页
        2.2.9 晶体蛋白的纯化第29-30页
        2.2.10 晶胞蛋白的SDS-PAGE检测第30页
        2.2.11 生物测定方法的改进第30页
        2.2.12 BSA法测定蛋白第30-31页
        2.2.13 纯化的晶体蛋白对根结线虫生物测定第31页
        2.2.14 纯化的晶体蛋白对根结线虫生物测定协同系数的计算第31-33页
3 结果与分析第33-46页
    3.1 番茄根结线虫分离、鉴定和保存第33-34页
    3.2 晶体蛋白Cry6Aa、Cry5Ba和Cry55Aa的结构分析第34-36页
    3.3 Cry6Aa、Cry5Ba和Cry55Aa与南方根结线虫总蛋白相互作用分析第36-37页
    3.4 晶体蛋白Cry6Aa、Cry5Ba和Cry55Aa的纯化第37-40页
    3.5 根结线虫生物测定方法的改进第40-41页
    3.6 晶体蛋白Cry6Aa和Cry5Ba不同配比对南方根结线虫生物活性测定第41-42页
    3.7 晶体蛋白Cry6Aa和Cry55Aa不同配比对南方根结线虫生物活性测定第42-43页
    3.8 晶体蛋白Cry5Ba和Cry55Aa不同配比对南方根结线虫生物活性测定第43-44页
    3.9 晶体蛋白Cry6Aa、Cry5Ba和Cry55Aa配比对南方根结线虫生物活性测定第44-46页
4 讨论第46-49页
5 总结第49-50页
参考文献第50-57页
致谢第57-58页
附录A 单因素多水平间多重比较——SAS程序第58页
附录B 变异系数分析——SAS程序第58-59页
附录C 半致死浓度(LC_(50))——SAS程序第59-61页
附录D 晶体蛋白Cry5Ba三维结构预测分析第61-62页
附录E 晶体蛋白Cry55Aa三维结构预测分析第62页

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