| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 Bt杀虫晶体蛋白对昆虫的控制作用 | 第12-15页 |
| 1.1 Bt杀虫晶体蛋白的分类 | 第12页 |
| 1.2 Bt杀虫晶体蛋白的杀虫机理 | 第12-13页 |
| 1.3 昆虫对Bt杀虫晶体蛋白产生抗性的机制 | 第13-15页 |
| 1.3.1 中肠蛋白酶与昆虫Bt杀虫晶体蛋白抗性关系 | 第13-14页 |
| 1.3.2 蛋白受体与昆虫Bt杀虫晶体蛋白抗性关系 | 第14-15页 |
| 2 Bt杀虫晶体蛋白受体鞘糖脂的研究进展 | 第15-21页 |
| 2.1 GSLs的分类及其在生物体内的分布与功能 | 第15-16页 |
| 2.1.1 GSLs的分类及其在生物体内的分布 | 第15-16页 |
| 2.1.2 GSLs的功能 | 第16页 |
| 2.2 GSLs结构分析方法 | 第16-17页 |
| 2.3 GSLs与昆虫Bt杀虫晶体蛋白抗性关系 | 第17-18页 |
| 2.4 参与GSLs合成的相关糖基转移酶 | 第18-21页 |
| 2.4.1 β1,4-甘露糖基转移酶(β1,4-Mannosyltransferase,β1,4ManT) | 第18-20页 |
| 2.4.2 β1,3-N-乙酰葡萄糖氨基转移酶(β1,3-GlcNAcTransferase,β1,3GlcNAcT) | 第20页 |
| 2.4.3 β1,4-N-乙酰半乳糖氨基转移酶(β1,4-GalNAcTransferase,β1,4GalNAcT) | 第20-21页 |
| 2.4.4 其他合成酶 | 第21页 |
| 2.5 小结与展望 | 第21页 |
| 3 立题依据、研究目的与技术路线 | 第21-24页 |
| 3.1 立题依据和研究目的 | 第21-22页 |
| 3.2 技术路线 | 第22-24页 |
| 第二章 小菜蛾对Cry1Ac和Bt制剂的敏感性变化 | 第24-29页 |
| 1 材料和方法 | 第24-26页 |
| 1.1 供试药剂 | 第24页 |
| 1.2 供试作物和昆虫 | 第24页 |
| 1.3 小菜蛾饲养 | 第24-25页 |
| 1.4 抗性汰选 | 第25页 |
| 1.5 生物测定 | 第25-26页 |
| 1.6 数据处理 | 第26页 |
| 2 结果与讨论 | 第26页 |
| 3 小结 | 第26-29页 |
| 第三章 小菜蛾Bt毒素抗性种群的生物学研究 | 第29-42页 |
| 1 材料和方法 | 第29-31页 |
| 1.1 试验器材 | 第29页 |
| 1.2 供试药剂 | 第29页 |
| 1.3 供试作物和昆虫 | 第29-30页 |
| 1.4 抗性汰选 | 第30页 |
| 1.5 生物测定 | 第30页 |
| 1.6 种群生命表的建立 | 第30页 |
| 1.7 生命表数据处理 | 第30-31页 |
| 2 结果与讨论 | 第31-39页 |
| 2.1 DBM1Ac-S、DBM1Ac-R和DBM.Bt-R品系生物学参数与相对适合度 | 第31-32页 |
| 2.2 DBM1Ac-S、DBM1Ac-R和DBM.Bt-R品系成虫寿命和产卵量 | 第32-34页 |
| 2.3 DBM1Ac-S、DBM1Ac-R和DBMBt-R品系特定龄期存活率 | 第34-35页 |
| 2.4 DBM1Ac-S、DBM1Ac-R和DBMBt-R品系生命期望值 | 第35-37页 |
| 2.5 DBM1Ac-S、DBM1Ac-R和DBMBt-R品系的繁殖值 | 第37-39页 |
| 3 小结 | 第39-42页 |
| 第四章 小菜蛾GSLs合成酶基因的克隆及序列分析 | 第42-60页 |
| 1 材料和方法 | 第42-51页 |
| 1.1 供试药剂 | 第42页 |
| 1.2 供试作物和昆虫 | 第42页 |
| 1.3 小菜蛾饲养 | 第42-43页 |
| 1.4 抗性汰选 | 第43页 |
| 1.5 生物测定 | 第43页 |
| 1.6 主要仪器 | 第43页 |
| 1.7 主要试剂盒 | 第43-44页 |
| 1.8 培养基及常用溶液 | 第44页 |
| 1.9 引物和测序 | 第44-45页 |
| 1.10 实验方法 | 第45-51页 |
| 1.10.1 小菜蛾四龄幼虫中肠总RNA提取 | 第45页 |
| 1.10.2 1%琼脂糖电泳检测RNA | 第45页 |
| 1.10.3 小菜蛾四龄幼虫中肠cDNA第一链的合成 | 第45-46页 |
| 1.10.4 小菜蛾四龄幼虫中肠GSLs合成酶基因扩增 | 第46页 |
| 1.10.5 PCR产物的回收与纯化 | 第46-49页 |
| 1.10.6 PCR纯化产物与pGM-T载体的连接 | 第49-50页 |
| 1.10.7 质粒DNA的提取 | 第50-51页 |
| 1.10.8 检测 | 第51页 |
| 2 结果与讨论 | 第51-58页 |
| 2.1 小菜蛾四龄中肠RNA提取 | 第51-52页 |
| 2.2 核苷酸和氨基酸序列结果比对与分析 | 第52-58页 |
| 2.2.1 bre-3核苷酸和氨基酸在DBM1Ac-S和DBM1Ac-R品系间比较 | 第52-54页 |
| 2.2.2 bre-4核苷酸和氨基酸在DBM1Ac-S和DBM1Ac-R品系间比较 | 第54-55页 |
| 2.2.3 bre-5核苷酸和氨基酸在DBM1Ac-S和DBM1Ac-R品系间比较 | 第55-57页 |
| 2.2.4 小菜蛾bre-2目的片段克隆 | 第57-58页 |
| 3 小结 | 第58-60页 |
| 第五章 Cry1Ac敏感和抗性小菜蛾bre-3和bre-5基因mRNA的表达差异分析 | 第60-70页 |
| 1 材料和方法 | 第61-63页 |
| 1.1 供试药剂 | 第61页 |
| 1.2 供试作物和昆虫 | 第61页 |
| 1.3 小菜蛾饲养 | 第61页 |
| 1.4 抗性汰选 | 第61页 |
| 1.5 生物测定 | 第61页 |
| 1.6 主要仪器 | 第61页 |
| 1.7 主要试剂盒 | 第61页 |
| 1.8 培养基及常用溶液 | 第61-62页 |
| 1.9 引物和测序 | 第62页 |
| 1.10 实验方法 | 第62-63页 |
| 1.10.1 总RNA的提取 | 第62页 |
| 1.10.2 cDNA合成 | 第62页 |
| 1.10.3 实时荧光定量PCR引物的设计 | 第62页 |
| 1.10.4 标准曲线的制作 | 第62-63页 |
| 1.10.5 real-time qPCR结果分析 | 第63页 |
| 2 结果与讨论 | 第63-68页 |
| 2.1 bre-3、bre-5和GAPDH的PCR产物鉴定和标准曲线绘制 | 第63-65页 |
| 2.2 不同龄期DBM1Ac-S和DBM1Ac-R品系bre-3表达量分析 | 第65-66页 |
| 2.3 不同龄期DBM1Ac-S和DBM1Ac-R品系bre-5 mRNA表达量分析 | 第66-67页 |
| 2.4 DBM1Ac-S和DBMlAc-R品系4龄中肠bre-3和bre-5表达量分析 | 第67-68页 |
| 3 小结 | 第68-70页 |
| 第六章 结论 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 附录 | 第85页 |
