| 缩略语表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-14页 |
| ABSTRACT | 第14-20页 |
| 前言 | 第20-21页 |
| 文献回顾 | 第21-33页 |
| 耳蜗前体细胞的研究进展 | 第21-24页 |
| miRNA 与耳蜗发育相关研究进展 | 第24-27页 |
| miRNA 表达水平研究方法的进展 | 第27-29页 |
| 使细胞过表达目的基因方法的研究进展 | 第29-33页 |
| 实验一 耳蜗前体细胞和神经干细胞分离培养和分化 | 第33-43页 |
| 1 材料 | 第33-34页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·主要实验器材 | 第33页 |
| ·细胞培养试剂 | 第33页 |
| ·细胞增殖及分化鉴定相关试剂 | 第33-34页 |
| 2 方法 | 第34-38页 |
| ·耳蜗前体细胞分离、培养 | 第34-36页 |
| ·神经干细胞的分离、培养 | 第36-37页 |
| ·耳蜗前体细胞和神经干细胞的体外诱导分化 | 第37页 |
| ·耳蜗前体细胞增殖能力的鉴定 | 第37-38页 |
| ·耳蜗前体细胞分化生成毛细胞能力的初步鉴定 | 第38页 |
| 3 结果 | 第38-41页 |
| ·新生大鼠耳蜗内可分离出增殖的前体细胞 | 第38-40页 |
| ·胎鼠嗅球中可分离出神经干细胞 | 第40页 |
| ·耳蜗前体细胞可分化出毛细胞样细胞 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| 实验二 微芯片技术检测耳蜗前体细胞分化过程中 miRNA 的表达变化 | 第43-50页 |
| 1 材料 | 第43-44页 |
| ·细胞样品 | 第43页 |
| ·实验器材 | 第43-44页 |
| ·实验试剂及耗材 | 第44页 |
| 2 方法 | 第44-46页 |
| ·收集未分化的耳蜗前体细胞 | 第44页 |
| ·收集耳蜗前体细胞来源的分化细胞 | 第44-45页 |
| ·芯片杂交 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-48页 |
| ·miRNA 芯片扫描得到荧光信号 | 第46-47页 |
| ·miRNA 在耳蜗前体细胞分化过程中的表达变化 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 实验三 实时定量PCR技术比较miRNA在不同种类细胞中的表达模式 | 第50-64页 |
| 1 材料 | 第50-51页 |
| ·核酸样品 | 第50页 |
| ·主要实验仪器 | 第50页 |
| ·qRT-PCR 试剂与耗材 | 第50-51页 |
| 2 方法 | 第51-53页 |
| ·反转录 | 第51页 |
| ·实时定量PCR | 第51-53页 |
| ·数据采集及统计学分析 | 第53页 |
| 3 结果 | 第53-60页 |
| ·miRNA 在耳蜗前体细胞分化过程中有不同的表达变化模式 | 第53-57页 |
| ·miR-183 家族在耳蜗前体细胞的分化过程中具有细胞特异性 | 第57-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| 实验四 耳蜗前体细胞过表达目的基因方法的建立 | 第64-75页 |
| 1 材料 | 第64页 |
| ·主要实验设备 | 第64页 |
| ·主要实验试剂及耗材 | 第64页 |
| 2 方法 | 第64-67页 |
| ·脂质体为载体介导EGFP 转染耳蜗前体细胞 | 第64-65页 |
| ·电穿孔方法介导EGFP 转染耳蜗前体细胞 | 第65-66页 |
| ·腺病毒载体介导EGFP 感染耳蜗前体细胞 | 第66页 |
| ·EGFP 转基因表达分析 | 第66-67页 |
| ·各转染方法存活率分析 | 第67页 |
| 3 结果 | 第67-69页 |
| ·脂质体转染法的转染率 | 第67-68页 |
| ·电穿孔转染法的转染率 | 第68页 |
| ·腺病毒感染法的转导率 | 第68-69页 |
| 4 讨论 | 第69-75页 |
| 小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-87页 |
| 个人简历和研究成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
