| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 缩略词表 | 第14-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 第一章 酵母双杂交法筛选BRAP相互作用蛋白 | 第17-26页 |
| 1.1 材料 | 第17-18页 |
| 1.1.1 材料 | 第17-18页 |
| 1.1.2 主要仪器设备 | 第18页 |
| 1.2 方法 | 第18-22页 |
| 1.2.1 微量质粒提取纯化实验 | 第18-19页 |
| 1.2.2 酵母细胞培养及酵母转化实验 | 第19页 |
| 1.2.3 目的基因自身激活试验 | 第19页 |
| 1.2.4 酵母双杂交系统菌株接合实验 | 第19-20页 |
| 1.2.5 酵母总DNA的提取 | 第20-21页 |
| 1.2.6 目的基因片段的扩增及测序比对 | 第21-22页 |
| 1.2.7 初步验证所筛选蛋白与BRAP之间的相互作用 | 第22页 |
| 1.3 结果 | 第22-24页 |
| 1.3.1 BRAP-PBKT7质粒不具有自身激活的能力 | 第22页 |
| 1.3.2 酵母双杂交筛选结果 | 第22-23页 |
| 1.3.3 初步验证BRAP与部分相关蛋白具有相互作用 | 第23-24页 |
| 1.4 讨论 | 第24-26页 |
| 第二章 BRAP对细胞氧化应激水平的影响 | 第26-35页 |
| 2.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 DH5α感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.2 DH5α的转化 | 第28页 |
| 2.2.3 大量质粒提取纯化实验 | 第28页 |
| 2.2.4 人293T细胞的培养 | 第28-29页 |
| 2.2.5 细胞内活性氧检测 | 第29页 |
| 2.2.6 pARE-luc报告基因的双萤光素酶检测 | 第29-31页 |
| 2.2.7 统计学处理 | 第31页 |
| 2.3 结果 | 第31-33页 |
| 2.3.1 BRAP降低293T细胞内活性氧水平 | 第31-32页 |
| 2.3.2 BRAP降低293T细胞内报告基因pARE-Luc表达水平 | 第32-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 BRAP对细胞凋亡的影响 | 第35-41页 |
| 3.1 材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 材料 | 第35页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第35-36页 |
| 3.2 方法 | 第36-37页 |
| 3.2.1 细胞凋亡检测 | 第36页 |
| 3.2.2 Caspase-9检测 | 第36页 |
| 3.2.3 线粒体膜电位检测(JC-1) | 第36-37页 |
| 3.2.4 统计学处理 | 第37页 |
| 3.3 结果 | 第37-39页 |
| 3.3.1 BRAP减少臭氧应激下293T细胞的凋亡 | 第37-38页 |
| 3.3.2 BRAP降低臭氧应激状态下细胞内Caspase-9的活性 | 第38页 |
| 3.3.3 BRAP对臭氧应激后的线粒体膜电位高于对照组 | 第38-39页 |
| 3.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 综述 | 第47-59页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 攻读学位期间主要的研究成果 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
