| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 1 引言 | 第7-16页 |
| ·miRNA及其生物合成 | 第7-8页 |
| ·miRNA的生物功能 | 第8-11页 |
| ·miRNA与逆境胁迫应答 | 第8-10页 |
| ·miRNA与植物生长发育 | 第10页 |
| ·miRNA与植物信号转导 | 第10-11页 |
| ·miRNA与新陈代谢 | 第11页 |
| ·脂肪酸的生物合成及调控 | 第11-12页 |
| ·植物miRNA的研究方法 | 第12-14页 |
| ·克隆和测序、构建miRNA文库的方法 | 第12-13页 |
| ·结合生物信息学的方法 | 第13-14页 |
| ·利用miRNA芯片寻找miRNA的方法 | 第14页 |
| ·本研究目的与意义 | 第14页 |
| ·本研究的内容与预期目标 | 第14-16页 |
| ·研究内容 | 第14-15页 |
| ·预期目标 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-35页 |
| ·实验材料 | 第16页 |
| ·植物材料 | 第16页 |
| ·质粒载体及菌株 | 第16页 |
| ·实验方法 | 第16-35页 |
| ·重组质粒的转化 | 第16-17页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第17页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第17-18页 |
| ·重组质粒的提取 | 第18-20页 |
| ·农杆菌介导的基因瞬时表达 | 第20-21页 |
| ·拟南芥转化(Flower dip) | 第21页 |
| ·植物组织RNA的提取 | 第21-23页 |
| ·Northern Blotting | 第23-27页 |
| ·植物总蛋白的提取 | 第27页 |
| ·Western blot检测植物融合蛋白表达 | 第27-29页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第29-30页 |
| ·PCR产物回收 | 第30-31页 |
| ·DNA酶切反应 | 第31页 |
| ·脱磷反应 | 第31页 |
| ·酶切产物的回收与PCR产物回收 | 第31页 |
| ·DNA片段连接 | 第31页 |
| ·感受态细胞制备 | 第31-33页 |
| ·5'RLM-RACE | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-49页 |
| ·预测调控油脂代谢相关基因的miRNA及其5’RACE检测 | 第35-36页 |
| ·与油脂代谢相关基因高匹配的miRNA对靶标基因的可能调控作用 | 第36-40页 |
| ·载体构建 | 第36-37页 |
| ·烟草瞬时表达检测miRNA对油脂代谢相关基因在蛋白水平上的影响 | 第37-38页 |
| ·转基因拟南芥中检测miRNA对油脂代谢相关基因在蛋白水平上的影响 | 第38-39页 |
| ·转基因拟南芥中检测miRNA对油脂代谢相关基因在分子水平上的影响 | 第39-40页 |
| ·miRNA对其高匹配的与油脂代谢相关靶标基因LPD1的可能调控作用 | 第40-49页 |
| ·载体构建 | 第40-41页 |
| ·烟草中瞬时表达检测miR847对靶标基因的作用 | 第41-44页 |
| ·转基因拟南芥中检测miRNA对靶标基因的可能调控作用 | 第44-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| ·烟草瞬时表达系统中检测miRNA | 第49页 |
| ·拟南芥内源miRNA及LPD1的表达 | 第49页 |
| ·转基因拟南芥中检测miRNA | 第49页 |
| ·LPD1基因可能受miR847调控 | 第49-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 个人简介 | 第56-57页 |
| 导师简介 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
