| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 缩写词 | 第11-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-27页 |
| ·概述 | 第13页 |
| ·核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶的研究进展 | 第13-18页 |
| ·Rubisco的分子结构特征 | 第14-16页 |
| ·Rubisco的分子大小及序列特征 | 第14页 |
| ·Rubisco的结构分类 | 第14-15页 |
| ·Rubisco的立体结构模型 | 第15-16页 |
| ·高等植物Rubisco的特点 | 第16页 |
| ·Rubisco的催化作用及活性调节 | 第16-17页 |
| ·Rubisco的催化作用 | 第16-17页 |
| ·Rubisco的活性调节 | 第17页 |
| ·Rubisco的基因工程 | 第17-18页 |
| ·核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶活化酶的研究进展 | 第18-23页 |
| ·Rubisco活化酶的分子结构特征 | 第18-20页 |
| ·Rubisco活化酶在植物体内的存在形式 | 第18-19页 |
| ·Rubisco活化酶的主要结构域 | 第19-20页 |
| ·Rubisco活化酶的功能研究 | 第20-21页 |
| ·Rubisco活化酶表达特性研究及对环境因子的响应 | 第21-23页 |
| ·Rubisco活化酶的表达特性研究 | 第21-22页 |
| ·Rubisco活化酶对环境因子的响应 | 第22-23页 |
| ·Rubisco活化酶的基因工程 | 第23页 |
| ·本研究的目的与内容 | 第23-27页 |
| ·研究目的 | 第23-24页 |
| ·研究内容与技术路线 | 第24-27页 |
| ·研究内容 | 第24-25页 |
| ·技术路线 | 第25-27页 |
| 2 麦冬rbcL和RCA基因的克隆及序列分析 | 第27-43页 |
| ·材料与方法 | 第27-32页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·菌株和载体 | 第27页 |
| ·酶和试剂 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| ·PCR引物设计与合成 | 第27-28页 |
| ·Trizol法提取麦冬总RNA | 第28页 |
| ·RNA纯度及完整性检测 | 第28页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第28-29页 |
| ·麦冬rbcL和RCA基因片段的扩增 | 第29-31页 |
| ·目的片段的回收 | 第31页 |
| ·克隆片段的连接 | 第31页 |
| ·载体转化大肠杆菌 | 第31页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒 | 第31-32页 |
| ·阳性克隆检测 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-41页 |
| ·麦冬叶片总RNA的提取 | 第32页 |
| ·麦冬rbcL基因的扩增 | 第32-33页 |
| ·麦冬rbcL基因的克隆 | 第33-34页 |
| ·麦冬rbcL基因的序列分析 | 第34-36页 |
| ·麦冬rbcL基因的同源性比对 | 第34页 |
| ·麦冬rbcL基因的系统发育分析 | 第34-36页 |
| ·麦冬RCA基因的扩增 | 第36页 |
| ·麦冬RCA基因的克隆 | 第36-37页 |
| ·麦冬RCA基因的序列分析 | 第37-41页 |
| ·麦冬RCA基因的开放阅读框(ORF)框分析 | 第37-38页 |
| ·麦冬RCA基因的功能域分析 | 第38页 |
| ·麦冬RCA基因的同源性比对 | 第38-40页 |
| ·麦冬RCA基因的系统发育分析 | 第40页 |
| ·麦冬RCA基因编码蛋白的理化性质分析 | 第40页 |
| ·麦冬RCA基因编码蛋白的跨膜结构域分析 | 第40-41页 |
| ·结论与讨论 | 第41-43页 |
| ·麦冬rbcL与RCA基因的克隆 | 第41页 |
| ·麦冬rbcL与RCA基因的序列分析 | 第41-43页 |
| 3 麦冬RCA基因植物表达载体的构建 | 第43-48页 |
| ·材料与方法 | 第43-46页 |
| ·试验材料 | 第43页 |
| ·菌株和载体 | 第43页 |
| ·酶和试剂 | 第43页 |
| ·培养基 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-46页 |
| ·PCR引物设计与合成 | 第43页 |
| ·麦冬RCA基因编码区片段的扩增 | 第43-44页 |
| ·目的片段的回收 | 第44页 |
| ·克隆片段的连接 | 第44页 |
| ·载体转化大肠杆菌 | 第44页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒 | 第44页 |
| ·提取质粒的酶切与检测 | 第44-45页 |
| ·pBI121载体质粒的提取 | 第45页 |
| ·pBI121载体质粒的酶切与检测 | 第45页 |
| ·连接转化及重组子筛选 | 第45-46页 |
| ·结果与分析 | 第46-47页 |
| ·麦冬RCA基因编码区的克隆 | 第46页 |
| ·麦冬RCA基因植物表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·结论与讨论 | 第47-48页 |
| 4 麦冬RCA基因对烟草的转化 | 第48-55页 |
| ·材料与方法 | 第48-51页 |
| ·试验材料 | 第48-49页 |
| ·植物材料 | 第48页 |
| ·菌株 | 第48页 |
| ·试剂 | 第48页 |
| ·培养基 | 第48-49页 |
| ·试验方法 | 第49-51页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第49页 |
| ·农杆菌转化及鉴定 | 第49-50页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第50页 |
| ·PCR检测转基因植株 | 第50-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-53页 |
| ·重组质粒转化农杆菌效果的检测 | 第51-52页 |
| ·转基因烟草的获得 | 第52页 |
| ·转基因烟草的分子鉴定 | 第52-53页 |
| ·结论与讨论 | 第53-55页 |
| 5 干旱、盐迫条件下麦冬RCA基因表达模式分析 | 第55-60页 |
| ·材料与方法 | 第55-56页 |
| ·试验材料 | 第55页 |
| ·植物材料 | 第55页 |
| ·植物材料的处理 | 第55页 |
| ·试验方法 | 第55-56页 |
| ·各个处理时期植物总RNA的提取 | 第55页 |
| ·RNA纯度及完整性检测 | 第55页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第55页 |
| ·cDNA模板量的调平 | 第55-56页 |
| ·麦冬RCA基因胁迫处理下的RT-PCR分析 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-58页 |
| ·不同时期麦冬叶片总RNA的提取 | 第56-57页 |
| ·干旱胁迫(25%PEG)处理对麦冬RCA基因表达调控的影响 | 第57页 |
| ·高盐(250mM NaCl)处理对麦冬RCA基因表达调控的影响 | 第57-58页 |
| ·结论与讨论 | 第58-60页 |
| 6 结论与研究展望 | 第60-62页 |
| ·结论 | 第60-61页 |
| ·研究展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 附图 | 第68-70页 |
| 个人简介 | 第70-71页 |
| 导师简介 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
