| 摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| 1.1 TGE的流行性及危害性 | 第11-12页 |
| 1.1.1 传染源、传播途径、宿主 | 第11页 |
| 1.1.2 流行特点 | 第11-12页 |
| 1.1.3 危害性 | 第12页 |
| 1.2 病原学 | 第12-15页 |
| 1.2.1 TGE病毒的分类地位 | 第12-13页 |
| 1.2.2 形态学特征及其培养特性 | 第13-14页 |
| 1.2.3 抗原性和变异性 | 第14页 |
| 1.2.4 物理性质和化学性质 | 第14-15页 |
| 1.3 TGE发病机理 | 第15页 |
| 1.4 病理变化及临床症状 | 第15-16页 |
| 1.4.1 病理变化 | 第15-16页 |
| 1.4.2 临床症状 | 第16页 |
| 1.5 分子生物学 | 第16-22页 |
| 1.5.1 基因组结构 | 第16-17页 |
| 1.5.2 TGEV的结构基因 | 第17-21页 |
| 1.5.3 非结构基因 | 第21-22页 |
| 1.6 TGE的分离 | 第22页 |
| 1.7 研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 病料来源及细胞 | 第24页 |
| 2.1.2 毒株、菌株 | 第24页 |
| 2.1.3 主要试验试剂 | 第24页 |
| 2.1.4 主要试验试剂及培养基的配制 | 第24-25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-34页 |
| 2.2.1 疑似病料的处理 | 第25页 |
| 2.2.2 组织总RNA的提取 | 第25页 |
| 2.2.3 病料处理液在ST细胞上的盲传及PCR鉴定 | 第25-26页 |
| 2.2.4 间接免疫荧光（Indirect immunofluorescence assay,IFA）实验 | 第26页 |
| 2.2.5 病毒粒子透射电镜观察 | 第26页 |
| 2.2.6 TGEV分离株全基因组片段的RT-PCR分段扩增 | 第26-28页 |
| 2.2.7 RACE法获取 5'末端和 3'末端非编码区片段 | 第28-31页 |
| 2.2.8 目的基因的克隆及序列测定 | 第31页 |
| 2.2.9 TGEV全基因组序列的生物信息学分析 | 第31-32页 |
| 2.2.10 病毒理化性质鉴定 | 第32-34页 |
| 3 结果 | 第34-49页 |
| 3.1 TGEV分离株的分离及细胞病变观察 | 第34-35页 |
| 3.2 TGEV分离株的间接免疫荧光鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3 TGEV分离株的电镜观察结果 | 第36页 |
| 3.4 全基因组RT-PCR分段扩增结果 | 第36-37页 |
| 3.5 全基因组序列的生物信息学分析 | 第37-47页 |
| 3.5.1 分离株全基因组序列拼接 | 第37页 |
| 3.5.2 全基因组基因组结构分析 | 第37-41页 |
| 3.5.3 全基因组序列同源性分析 | 第41-42页 |
| 3.5.4 系统进化树分析 | 第42-45页 |
| 3.5.5 TGEV S蛋白结构分析 | 第45-47页 |
| 3.6 病毒的理化性质实验 | 第47-49页 |
| 3.6.1 pH3.0 稳定实验 | 第47页 |
| 3.6.2 分离株氯仿敏感性实验 | 第47页 |
| 3.6.3 醚敏感性实验 | 第47-48页 |
| 3.6.4 热敏实验 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-54页 |
| 4.1 病毒的分离鉴定 | 第49页 |
| 4.2 病毒全基因组分段扩增 | 第49-50页 |
| 4.3 分离株生物信息学分析 | 第50-52页 |
| 4.4 S蛋白结构分析 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-66页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第66页 |
