| 摘要 | 第2-6页 |
| abstract | 第6-10页 |
| 引言 | 第15-19页 |
| 第一部分 环介导等温扩增法快速鉴定V. alginolyticus不同感染模型 | 第19-34页 |
| 1. 实验材料及实验方法 | 第19-25页 |
| 1.1. 实验试剂和实验仪器 | 第19-20页 |
| 1.2. 实验菌株及实验动物 | 第20-21页 |
| 1.3. 实验试剂的配制 | 第21页 |
| 1.4. 16srDNA引物设计 | 第21页 |
| 1.5. LAMP引物设计 | 第21页 |
| 1.6. 细菌的纯化及传代培养 | 第21页 |
| 1.7. 细菌全基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| 1.8. toxR-T重组质粒的构建 | 第22-23页 |
| 1.9. 实时LAMP反应 | 第23-24页 |
| 1.10. 16s rDNA测序鉴定 | 第24页 |
| 1.11. LAMP法检测V. alginolyticus小鼠感染模型 | 第24-25页 |
| 1.12. LAMP法检测V. alginolyticus扇贝感染模型 | 第25页 |
| 1.13. 数据分析 | 第25页 |
| 2. 实验结果 | 第25-30页 |
| 2.1. LAMP法灵敏度结果 | 第25-26页 |
| 2.2. LAMP法检测V. alginolyticus特异性结果 | 第26-28页 |
| 2.3. 16s rDNA验证结果 | 第28-29页 |
| 2.4. 小鼠血液样本的检测结果 | 第29页 |
| 2.5. 扇贝浸出液样本的检测结果 | 第29-30页 |
| 3. 讨论 | 第30-33页 |
| 3.1. LAMP法与传统菌株检测方法的比较 | 第30-32页 |
| 3.2. LAMP法的优点 | 第32页 |
| 3.3. LAMP法检测不同感染模型的结果评估 | 第32-33页 |
| 4. 本章结论 | 第33-34页 |
| 第二部分 V. alginolyticus QS信号分子AHLS产生谱的鉴定及其产生规律分析 | 第34-51页 |
| 1. 实验材料及实验方法 | 第34-38页 |
| 1.1. 实验试剂和实验仪器 | 第34-35页 |
| 1.2. 实验菌株及培养条件 | 第35页 |
| 1.3. 实验试剂的配制 | 第35-36页 |
| 1.4. 细菌的纯化及传代培养 | 第36页 |
| 1.5. 16srDNA测序及系统进化分析 | 第36页 |
| 1.6. 交叉培养法检测V. alginolyticus AHLs产生 | 第36-37页 |
| 1.7. HPLC-MS/MS菌株预处理与AHLs粗提 | 第37页 |
| 1.8. HPLC-MS/MS条件优化 | 第37页 |
| 1.9. HPLC-MS/MS标准曲线的制备 | 第37页 |
| 1.10. HPLC-MS/MS测定V. alginolyticus AHLs产生谱 | 第37页 |
| 1.11. 数据分析 | 第37-38页 |
| 2. 实验结果 | 第38-48页 |
| 2.1. V. alginolyticus系统进化分析 | 第38页 |
| 2.2. AHLs的产生范围 | 第38-42页 |
| 2.3. AHLs粗提结果 | 第42页 |
| 2.4. HPLC-MS/MS条件的优化结果 | 第42-44页 |
| 2.5. 47株V. alginolyticus的AHLs产生谱 | 第44-48页 |
| 3. 讨论 | 第48-50页 |
| 4. 本章结论 | 第50-51页 |
| 第三部分 重要N-酰基高丝氨酸内脂类信号分子的人工合成及其生物活性评价 | 第51-71页 |
| 1. 实验材料及实验方法 | 第51-59页 |
| 1.1. 实验试剂和实验仪器 | 第51页 |
| 1.2. 实验菌株及培养条件 | 第51-52页 |
| 1.3. 实验试剂的配制 | 第52页 |
| 1.4. 细菌的纯化及传代培养 | 第52页 |
| 1.5. N-高丝氨酸内酯所需原材料的制备 | 第52页 |
| 1.6. N-(3-氧代己酰)-L-高丝氨酸内酯（3-oxo-C6-HSL）的人工合成 | 第52-53页 |
| 1.7. N-(3-氧代癸酰)-L-高丝氨酸内酯（3-oxo-C10-HSL）的人工合成 | 第53页 |
| 1.8. N-十二烷酰高丝氨酸内酯（C12-HSL）的人工合成 | 第53-58页 |
| 1.9. 生物敏感菌株交叉培养法检测人工合成AHLs的生物活性 | 第58-59页 |
| 2. 实验结果 | 第59-68页 |
| 2.1. 三种AHLs的人工合成结果 | 第59页 |
| 2.2. 人工合成AHLs的1H-NMR鉴定结果 | 第59-60页 |
| 2.3. 人工合成AHLs的HPLC鉴定结果 | 第60页 |
| 2.4. 人工合成AHLs的MS鉴定结果 | 第60-64页 |
| 2.5. 人工合成 3-oxo-C6-HSL的交叉共培养结果 | 第64页 |
| 2.6. 人工合成 3-oxo-C10-HSL的交叉共培养结果 | 第64页 |
| 2.7. 人工合成C12-HSL的交叉共培养结果 | 第64-68页 |
| 3. 讨论 | 第68-70页 |
| 3.1. AHLs的化合物结构 | 第68页 |
| 3.2. AHLs的产生与失活 | 第68-69页 |
| 3.3. 人工合成AHLs的优势 | 第69-70页 |
| 4. 本章结论 | 第70-71页 |
| 第四部分 N-(3-oxodecanoyl)-homoserine lactone对V. alginolyticus生物膜形成的调控研究 | 第71-90页 |
| 1. 实验材料及实验方法 | 第71-75页 |
| 1.1. 实验试剂和实验仪器 | 第71-72页 |
| 1.2. 实验菌株及培养条件 | 第72页 |
| 1.3. 实验试剂的配制 | 第72页 |
| 1.4. V. alginolyticus的纯化及传代培养 | 第72-73页 |
| 1.5. 半定量黏附实验铺板及培养要求 | 第73页 |
| 1.6. 半定量黏附实验检测V. alginolyticus生物膜的形成 | 第73页 |
| 1.7. 荧光显微标记法（FLM）检测V. alginolyticus生物膜 | 第73-74页 |
| 1.8. 共聚焦显微检测法（CLSM）检测V. alginolyticus生物膜 | 第74页 |
| 1.9. 数据处理 | 第74-75页 |
| 2. 实验结果 | 第75-86页 |
| 2.1. V. alginolyticus的增殖曲线及生物膜分级 | 第75页 |
| 2.2. V. alginolyticus生物膜的形成周期 | 第75-78页 |
| 2.3. 温度对V. alginolyticus生物膜形成的影响 | 第78页 |
| 2.4. 盐度对V. alginolyticus生物膜形成的影响 | 第78-80页 |
| 2.5. 较低温度 3-oxo-C10-HSL对V. alginolyticus生物膜形成的影响 | 第80-81页 |
| 2.6. 中等温度下 3-oxo-C10-HSL对V. alginolyticus生物膜形成的影响 | 第81-86页 |
| 3. 讨论 | 第86-89页 |
| 3.1. V. alginolyticus实验菌株的筛选 | 第86页 |
| 3.2. 温度影响V. alginolyticus生物膜形成 | 第86-87页 |
| 3.3. 盐度影响V. alginolyticus生物膜形成 | 第87页 |
| 3.4. 3-oxo-C10-HSL影响V. alginolyticus生物膜形成 | 第87-89页 |
| 4. 本章结论 | 第89-90页 |
| 结论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-101页 |
| 综述 海洋弧菌群体感应信号分子N-酰基高丝氨酸内酯研究进展 | 第101-108页 |
| 综述参考文献 | 第105-108页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第108-109页 |
| 缩略词表 | 第109-111页 |
| 致谢 | 第111-112页 |
