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IGFBP4、5、7和胰岛素样蛋白在杂色鲍幼虫附着变态过程中的作用研究

摘要第4-6页
abstract第6-7页
第1章 引言第11-20页
    1.1 杂色鲍的养殖现状及幼虫研究第11页
    1.2 无脊椎动物幼虫附着变态的研究进展第11-12页
        1.2.1 鲍幼虫发育研究第11-12页
        1.2.2 海洋无脊椎动物幼虫附着变态的研究进展第12页
    1.3 IGFs系统及胰岛素样蛋白概述第12-18页
        1.3.1 IGF信号通路研究进展第12-14页
        1.3.2 IGFBP4的研究进展第14-15页
        1.3.3 IGFBP5的研究进展第15页
        1.3.4 IGFBP7的研究进展第15-16页
        1.3.5 无脊椎动物胰岛素样生长因子研究进展第16-18页
    1.4 本研究的目的与意义第18-19页
    1.5 主要研究内容和技术路线第19-20页
        1.5.1 主要研究内容第19页
        1.5.2 主要技术路线第19-20页
第2章 材料与方法第20-33页
    2.1 材料第20-22页
        2.1.1 实验动物第20页
        2.1.2 主要仪器和试剂第20-21页
        2.1.3 引物第21-22页
    2.2 实验方法第22-33页
        2.2.1 总RNA的提取 (TRIzol法) 和去除DNA的污染第22页
        2.2.2 合成RT-PCR cDNA第一链和PCR扩增获取基因cDNA片段第22-23页
        2.2.3 SMART-RACE技术获取基因全长第23-24页
        2.2.4 割胶纯化基因片段第24-25页
        2.2.5 与质粒载体连接第25页
        2.2.6 感受态细胞的转化及筛选第25页
        2.2.7 质粒插入片段的检测第25-26页
        2.2.8 质粒测序第26页
        2.2.9 目的基因的生物信息学分析第26页
        2.2.10 实时荧光定量PCR (Real-time PCR) 反应体系及条件第26-27页
        2.2.11 RNAi实验第27-30页
        2.2.12 原核表达第30-33页
第3章 结果第33-71页
    3.1 杂色鲍各组织总RNA的抽提结果第33页
    3.2 RACE-PCR扩增结果第33-35页
    3.3 hdIGFBP4、5、7、hdMIRP生物信息学分析第35-57页
        3.3.1 hdIGFBP4 生物信息学分析第35-40页
        3.3.2 hdIGFBP5 生物信息学分析第40-45页
        3.3.3 hdIGFBP7 生物信息学分析第45-51页
        3.3.4 hdMIRP 生物信息学分析第51-57页
    3.4 杂色鲍 hdIGFBP4、hdIGFBP5、hdIGFBP7、hdMIRP 基因的表达特征第57-65页
        3.4.1 RNAi技术干扰hdIGFBP4、hdIGFBP5、hdIGFBP7、hdMIRP基因幼虫的附着率与死亡率第57-58页
        3.4.2 RNAi后hdIGFBP4、hdIGFBP5、hdIGFBP7、hdMIRP基因的表达情况第58-62页
        3.4.3 干扰后,胰岛素/胰岛素样蛋白/胰岛素样生长因子结合蛋白相关通路的表达情况第62-65页
    3.5 原核表达第65-71页
        3.5.1 重组表达载体pET-22b-IGFBP4/IGFBP5/IGFBP7/MIRP的构建及表达第65-67页
        3.5.2 重组表达载体pET-32a-IGFBP4/IGFBP5/IGFBP7/MIRP的构建及表达第67-69页
        3.5.3 密码子预测分析第69-71页
第4章 讨论第71-76页
    4.1 胰岛素样生长因子结合蛋白 4第71-72页
    4.2 胰岛素样生长因子结合蛋白 5第72-73页
    4.3 胰岛素样生长因子结合蛋白 7第73-74页
    4.4 胰岛素样蛋白第74-76页
第5章 结论与展望第76-78页
致谢第78-79页
参考文献第79-84页
在校期间发表的文章第84页

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