摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第1章 引言 | 第12-22页 |
1.1 HIF信号通路相关基因的结构与功能的研究进展 | 第12-14页 |
1.1.1 HIF信号通路核心基因HIF-1 | 第12-14页 |
1.1.2 SBP1、NOS及TNF-α基因 | 第14页 |
1.2 HIF-1 的表达调控及靶基因引起的生物学效应研究进展 | 第14-19页 |
1.2.1 HIF-1 的表达调控 | 第14-16页 |
1.2.2 HIF-1 的靶基因 | 第16-18页 |
1.2.3 红细胞生成或铁代谢 | 第18页 |
1.2.4 血管生成 | 第18-19页 |
1.2.5 葡萄糖代谢 | 第19页 |
1.2.6 细胞增殖/生存及细胞凋亡 | 第19页 |
1.3 HIF信号通路相关基因在水生动物中的研究进展 | 第19-20页 |
1.4 本研究的内容和目的意义 | 第20-22页 |
1.4.1 研究的内容 | 第20页 |
1.4.2 目的与意义 | 第20-22页 |
第2章 材料与方法 | 第22-31页 |
2.1 材料 | 第22-24页 |
2.1.1 实验动物 | 第22页 |
2.1.2 主要仪器与试剂 | 第22页 |
2.1.3 引物 | 第22-24页 |
2.2 实验方法 | 第24-31页 |
2.2.1 总RNA的提取(RDP法)及去除DNA的污染 | 第24页 |
2.2.2 合成RT-PCR cDNA第一链和RT-PCR扩增获取基因片段 | 第24-25页 |
2.2.3 SMART-RACE技术获取基因全长 | 第25-26页 |
2.2.4 割胶纯化基因片段 | 第26-27页 |
2.2.5 与PET19-T质粒载体连接 | 第27页 |
2.2.6 JM109感受态细胞的转化及筛选 | 第27页 |
2.2.7 质粒插入片段的PCR检测 | 第27页 |
2.2.8 质粒测序 | 第27页 |
2.2.9 目的基因的生物信息学分析 | 第27-28页 |
2.2.10 缺氧、高温、缺氧&高温及弧菌注射的应激实验 | 第28-29页 |
2.2.11 dsRNA的合成 | 第29页 |
2.2.12 杂色鲍血细胞的培养实验 | 第29-30页 |
2.2.13 RNA干扰 | 第30页 |
2.2.14 实时荧光定量PCR反应体系及条件 | 第30-31页 |
第3章 结果 | 第31-64页 |
3.1 总RNA的抽提结果 | 第31页 |
3.2 RT-PCR扩增结果 | 第31-32页 |
3.3 杂色鲍HIF信号通路相关基因的序列分析 | 第32-48页 |
3.3.1 HdHIF-1α基因的序列分析 | 第32-37页 |
3.3.2 HdHIF-1β基因的序列分析 | 第37-43页 |
3.3.3 HdSBP1基因的序列分析 | 第43-48页 |
3.4 杂色鲍HdHIF-1α、HdHIF-1β和HdSBP1基因在不同组织器官中的表达分析 | 第48-50页 |
3.5 杂色鲍HIF信号通路相关基因在不同应激下的表达分析 | 第50-61页 |
3.5.1 杂色鲍HdHIF-1α基因在不同应激下的表达分析 | 第50-52页 |
3.5.2 杂色鲍HdHIF-1β基因在不同应激下的表达分析 | 第52-54页 |
3.5.3 杂色鲍HdSBP1基因在不同应激下的表达分析 | 第54-56页 |
3.5.4 杂色鲍HdNOS基因在不同应激下的表达分析 | 第56-59页 |
3.5.5 杂色鲍HdTNFα基因在不同应激下的表达分析 | 第59-61页 |
3.6 HdHIF-1α基因的RNA干扰之后表达 | 第61-64页 |
第4章 讨论 | 第64-68页 |
4.1 HdHIF-1 基因 | 第64-66页 |
4.2 HdSBP1、HdNOS及HdTNF-α基因 | 第66页 |
4.3 HIF-1 基因干扰后若干靶基因的表达 | 第66-68页 |
第5章 结论与展望 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-80页 |
在学期间发表的学术论文 | 第80页 |