| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第1章 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 秦艽概况 | 第13-18页 |
| 1.1.1 生物学特性 | 第13-14页 |
| 1.1.2 代谢产物研究进展 | 第14-16页 |
| 1.1.3 目前植物代谢产物合成途径的研究方法 | 第16页 |
| 1.1.4 龙胆科植物次生代谢产物通路研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2 诱导子的研究概况 | 第18-20页 |
| 1.2.1 概念及作用机理概述 | 第18-20页 |
| 1.2.2 诱导子对植物次生代谢的影响 | 第20页 |
| 1.3 NO信号分子 | 第20-23页 |
| 1.3.1 NO的基本特性 | 第21-22页 |
| 1.3.2 NO与诱导子胁迫 | 第22-23页 |
| 1.3.3 NO与植物次生代谢产物的关系研究进展 | 第23页 |
| 1.4 研究意义 | 第23-25页 |
| 第2章 不同诱导子对秦艽代谢产物的影响 | 第25-41页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 材料方法 | 第25-30页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.2.2 诱导子处理 | 第25-26页 |
| 2.2.3 真菌诱导子的制备 | 第26-27页 |
| 2.2.4 次生代谢产物的含量测定 | 第27-28页 |
| 2.2.5 HPLC方法学验证 | 第28-30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-36页 |
| 2.3.1 诱导子对环烯醚萜苷类次生代谢产物的含量的影响 | 第30-35页 |
| 2.3.1.1 真菌诱导子 | 第30-31页 |
| 2.3.1.2 AgNO_3诱导子 | 第31-32页 |
| 2.3.1.3 CuSO_4诱导子 | 第32-33页 |
| 2.3.1.4 花生四烯酸诱导子 | 第33页 |
| 2.3.1.5 柠檬酸铵诱导子 | 第33-34页 |
| 2.3.1.6 水杨酸诱导子 | 第34-35页 |
| 2.3.2 次生代谢产物与诱导子的相关性分析 | 第35-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-41页 |
| 第3章 不同浓度柠檬酸铵对秦艽次生代谢产物的影响 | 第41-49页 |
| 3.1 引言 | 第41页 |
| 3.2 材料方法 | 第41-44页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第41页 |
| 3.2.2 诱导子处理 | 第41页 |
| 3.2.3 秦艽主要环烯醚萜苷类次生代谢产物的含量测定 | 第41-42页 |
| 3.2.4 UPLC方法学验证 | 第42-44页 |
| 3.3 结果与分析 | 第44-48页 |
| 3.3.2 马钱酸苷的含量 | 第44-45页 |
| 3.3.3 獐牙菜苦苷的含量 | 第45-46页 |
| 3.3.4 龙胆苦苷的含量 | 第46-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-49页 |
| 第4章 基于转录组和代谢产物初步探讨秦艽对柠檬酸铵和茉莉酸甲酯响应的异同 | 第49-81页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 材料和方法 | 第49-56页 |
| 4.2.1 植物材料 | 第49页 |
| 4.2.2 秦艽总RNA提取 | 第49-50页 |
| 4.2.3 RNA反转录 | 第50-51页 |
| 4.2.4 实时荧光定量PCR | 第51页 |
| 4.2.5 转录组RNA测序及数据分析 | 第51-52页 |
| 4.2.6 基于转录组数据对内参的筛选方法 | 第52-54页 |
| 4.2.7 代谢产物检测 | 第54-56页 |
| 4.3 结果 | 第56-75页 |
| 4.3.1 转录组数据分析 | 第56-64页 |
| 4.3.1.1 Illunima HiSeq 2000测序数据评估及统计 | 第56-58页 |
| 4.3.1.2 转录组数据GO注释 | 第58-61页 |
| 4.3.1.3 KEGG pathway分析 | 第61-64页 |
| 4.3.2 基于转录组数据对龙胆苦苷代谢途径基因的挖掘 | 第64-70页 |
| 4.3.3 基于转录组数据对秦艽内参的筛选 | 第70-71页 |
| 4.3.4 代谢途径基因的定量表达分析 | 第71-73页 |
| 4.3.5 代谢产物分析 | 第73-75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-81页 |
| 4.4.1 细胞对诱导子的识别 | 第75-77页 |
| 4.4.2 探讨诱导子可能影响次生代谢产物积累的“靶点” | 第77-81页 |
| 第5章 内源NO对诱导子胁迫下秦艽生理生化及代谢组的研究 | 第81-95页 |
| 5.1 引言 | 第81页 |
| 5.2 材料和方法 | 第81-83页 |
| 5.2.1 植物材料 | 第81页 |
| 5.2.2 NO抑制及NO信号检测 | 第81-82页 |
| 5.2.3 细胞凋亡检测 | 第82-83页 |
| 5.2.4 初生代谢产物检测 | 第83页 |
| 5.2.5 次生代谢产物检测 | 第83页 |
| 5.3 结果 | 第83-92页 |
| 5.3.1 诱导子与NO信号的变化 | 第83-84页 |
| 5.3.2 NO抑制剂对诱导子胁迫后NO的影响 | 第84-85页 |
| 5.3.3 龙胆苦苷诱发NO信号与细胞凋亡 | 第85-87页 |
| 5.3.4 NO信号分子与初生代谢产物氨基酸 | 第87-91页 |
| 5.3.5 NO抑制剂对次生代谢产物的影响 | 第91-92页 |
| 5.4 讨论 | 第92-95页 |
| 5.4.1 NO信号分子与诱导子诱导代谢产物的关系初探 | 第92-93页 |
| 5.4.2 柠檬酸铵在代谢过程中的利用 | 第93-95页 |
| 第6章 总结与展望 | 第95-99页 |
| 参考文献 | 第99-111页 |
| 附录 | 第111-113页 |
| 致谢 | 第113-115页 |
| 攻读博士学位期间科研成果 | 第115页 |
