| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-15页 |
| 1.1 多不饱和脂肪酸 | 第10-14页 |
| 1.1.1 多不饱和脂肪酸的功能 | 第10-11页 |
| 1.1.1.1 细胞膜的重要组成成分 | 第10-11页 |
| 1.1.1.3 抗癌作用 | 第11页 |
| 1.1.1.4 抗炎症作用 | 第11页 |
| 1.1.2 多不饱和脂肪酸的应用 | 第11-12页 |
| 1.1.2.1 医用保健品 | 第11页 |
| 1.1.2.2 食品工业 | 第11页 |
| 1.1.2.3 饲料工业 | 第11-12页 |
| 1.1.3 多不饱和脂肪酸（PUFAs）的来源 | 第12-13页 |
| 1.1.3.1 微藻 | 第12页 |
| 1.1.3.2 丝状真菌 | 第12-13页 |
| 1.1.3.3 细菌 | 第13页 |
| 1.1.3.4 酵母 | 第13页 |
| 1.1.4 多不饱和脂肪酸（PUFAs）合成途径 | 第13-14页 |
| 1.2 解脂耶氏酵母 | 第14-15页 |
| 第2章 纤细裸藻?9-延长酶基因在解脂耶氏酵母中的表达 | 第15-29页 |
| 2.1 前言 | 第15页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第15-22页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第15-18页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第18-22页 |
| 2.2.2.1 纤细裸藻（Euglena gracilis）总RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.2.2.2 cDNA的合成 | 第18-19页 |
| 2.2.2.3 PCR扩增△9 延长酶基因（△9E）片段 | 第19页 |
| 2.2.2.5 大肠杆菌热击转化感受态细胞的制作及转化方法 | 第19-20页 |
| 2.2.2.6 菌落PCR验证 | 第20页 |
| 2.2.2.7 限制性酶切 | 第20页 |
| 2.2.2.8 酶切DNA片段与质粒载体连接 | 第20页 |
| 2.2.2.9 解脂耶氏酵母感受态细胞的制作方法及转化方法 | 第20页 |
| 2.2.2.10 酵母基因组提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2.11 生物量测定 | 第21页 |
| 2.2.2.12 油脂含量测定 | 第21页 |
| 2.2.2.13 脂肪酸组份分析 | 第21-22页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第22-27页 |
| 2.3.1 提取纤细裸藻（Euglena gracilis）总RNA | 第22页 |
| 2.3.2 PCR扩增△9 延长酶基因（△9E） | 第22-24页 |
| 2.3.3 △9 延长酶基因（△-9E）重组表达载体pINA1297-△9E的构建 | 第24-25页 |
| 2.3.4 重组表达质粒pINA1297-△9E转化与筛选 | 第25页 |
| 2.3.5 转△-9E基因脂耶氏酵母YL△9E细胞的生长情况 | 第25-26页 |
| 2.3.6 转△9E基因脂耶氏酵母YL△9E脂肪酸成分分析 | 第26-27页 |
| 2.4 总结 | 第27-29页 |
| 第3章 工程菌株YL?9E的摇瓶发酵工艺优化 | 第29-42页 |
| 3.1 前言 | 第29页 |
| 3.2 材料与方法 | 第29-31页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第30-31页 |
| 3.3 结果与分析 | 第31-41页 |
| 3.3.1 碳源优化 | 第31-32页 |
| 3.3.2 氮源的优化 | 第32-33页 |
| 3.3.3 初始pH值对解脂耶氏酵母生长的影响 | 第33-35页 |
| 3.3.4 响应面法优化发酵培养基 | 第35-41页 |
| 3.4 小结 | 第41-42页 |
| 第4章 解脂耶氏酵母EPA合成途径构建 | 第42-54页 |
| 4.1 前言 | 第42-43页 |
| 4.2 材料与方法 | 第43-46页 |
| 4.2.1 菌种及培养基 | 第43页 |
| 4.2.2 PCR所用扩增引物 | 第43-45页 |
| 4.2.3 实验方法 | 第45-46页 |
| 4.3 结果与分析 | 第46-52页 |
| 4.3.1 PCR扩增得到启动子及终止子 | 第46页 |
| 4.3.2 PCR扩增△-5 脱氢酶基因（△5D） | 第46页 |
| 4.3.3 基因表达组件的构建 | 第46-49页 |
| 4.3.4 重组表达载体pINA1297-ABCD的构建 | 第49-51页 |
| 4.3.5 解脂耶氏酵母的转化及阳性重组子的筛选与鉴定 | 第51-52页 |
| 4.4 小结 | 第52-54页 |
| 第5章 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
