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鸭瘟病毒UL17蛋白与UL25蛋白、UL26.5蛋白的细胞共定位研究

中文摘要第3-4页
ABSTRACT第4页
一、引言第8-12页
    1 文献综述第8-11页
        1.1 UL17基因序列的特点第8页
        1.2 UL17编码蛋白的特点第8-9页
        1.3 疱疹病毒UL17蛋白的功能第9-11页
            1.3.1 DNA切割和组装第9页
            1.3.2 衣壳在细胞内的正常分布第9页
            1.3.3 UL17蛋白与UL25蛋白复合体的作用第9-10页
            1.3.4 UL17蛋白与其它蛋白的相互作用第10-11页
    2 选题目的和意义第11-12页
二、试验研究第12-36页
    1 材料第12-13页
        1.1 试验动物第12页
        1.2 基因、载体、毒株、菌株第12页
        1.3 主要仪器设备第12页
        1.4 主要试剂第12-13页
    2 方法第13-18页
        2.1 生物信息学分析第13页
        2.2 鸭瘟病毒UL17基因克隆表达、多克隆抗体制备第13-15页
            2.2.1 引物合成和稀释第13页
            2.2.2 DPV UL17基因扩增第13-14页
            2.2.3 DPV UL17基因T克隆第14页
            2.2.4 DPV UL17基因T克隆鉴定第14页
            2.2.5 构建pET32a-UL17重组原核表达质粒第14页
            2.2.6 pET32a-UL17重组原核表达质粒的表达第14页
            2.2.7 检测重组UL17蛋白的反应原性第14-15页
            2.2.8 重组UL17蛋白的纯化第15页
            2.2.9 兔抗重组UL17蛋白多克隆抗体制备第15页
            2.2.10 鼠抗重组UL17蛋白多克隆抗体制备第15页
            2.2.11 多克隆抗体粗提纯化第15页
        2.3 鸭瘟病毒UL17基因转录及表达时相研究第15-17页
            2.3.1 引物合成及特异性验证第16页
            2.3.2 药物抑制试验确定UL17基因的类型第16页
            2.3.3 DPV UL17基因转录类型研究第16-17页
            2.3.4 DPV UL17基因表达时相研究第17页
        2.4 鸭瘟病毒UL17基因编码蛋白在DEF中的定位研究第17-18页
            2.4.1 间接免疫荧光检测DPV UL17蛋白在DEF中的分布第17页
            2.4.2 结果判定标准第17-18页
        2.5 鸭瘟病毒UL17蛋白与UL25蛋白、UL26.5蛋白的细胞共定位研究第18页
            2.5.1 双重间接免疫荧光检测DPV UL17蛋白与UL25蛋白、UL26.5蛋白的细胞共定位情况第18页
            2.5.2 结果判定标准第18页
    3 结果第18-32页
        3.1 生物信息学分析第18-22页
            3.1.1 DPV UL17基因核酸序列分析第18-19页
            3.1.2 DPV UL17蛋白的理化性质第19-21页
            3.1.3 UL17二级结构、三级结构预测第21-22页
        3.2 鸭瘟病毒UL17基因克隆表达、多克隆抗体制备第22-24页
            3.2.1 DPV UL17基因扩增第22页
            3.2.2 T克隆pMD20T-UL17鉴定第22页
            3.2.3 重组表达载体pET32a-UL17鉴定第22-23页
            3.2.4 重组UL17蛋白表达及纯化第23页
            3.2.5 重组UL17蛋白反应原性检测第23页
            3.2.6 重组蛋白多克隆抗体的制备、纯化第23-24页
        3.3 鸭瘟病毒UL17基因转录及表达时相研究第24-27页
            3.3.1 引物特异性验证第24页
            3.3.2 药物抑制试验确定UL17基因的类型第24-25页
            3.3.3 实时荧光定量PCR标准曲线第25-26页
            3.3.4 鸭瘟病毒UL17基因转录时相分析第26-27页
            3.3.5 鸭瘟病毒UL17基因表达时相分析第27页
        3.4 鸭瘟病毒UL17基因编码蛋白在DEF中的定位研究第27-29页
        3.5 鸭瘟病毒UL17蛋白与UL25蛋白、UL26.5蛋白的细胞共定位研究第29-32页
            3.5.1 UL17蛋白与UL25蛋白的共定位情况第29-31页
            3.5.2 UL17蛋白与UL26.5蛋白的细胞共定位情况第31-32页
    4 讨论第32-36页
        4.1 生物信息学分析第32-33页
        4.2 鸭瘟病毒UL17基因克隆表达、多克隆抗体制备第33-34页
        4.3 鸭瘟病毒UL17基因转录及表达时相研究第34页
        4.4 鸭瘟病毒UL17基因编码蛋白在DEF中的定位研究第34-35页
        4.5 鸭瘟病毒UL17蛋白与UL25蛋白、UL26.5蛋白的细胞共定位研究第35-36页
三、结论第36-37页
参考文献第37-41页
致谢第41-42页
作者简介及攻读硕士学位期间发表的学术论文第42页

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