水稻抗稻瘟病候选基因的筛选及功能验证
摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第9-22页 |
1.1 水稻稻瘟病的防治措施 | 第9-12页 |
1.1.1 化学防治 | 第9-10页 |
1.1.2 生物防治 | 第10页 |
1.1.3 抗性品种培育 | 第10-11页 |
1.1.4 栽培管理 | 第11-12页 |
1.2 水稻对稻瘟病的抗性 | 第12页 |
1.3 水稻稻瘟病抗性基因的定位 | 第12-17页 |
1.3.1 数量抗性基因的定位 | 第12-13页 |
1.3.2 质量抗性基因的定位 | 第13-17页 |
1.4 稻瘟病抗性基因的克隆 | 第17-20页 |
1.4.1 已克隆的抗稻瘟病基因的特点 | 第18-19页 |
1.4.2 已克隆的抗稻瘟病基因所采用的克隆策略 | 第19-20页 |
1.5 本研究的内容、目的及意义 | 第20-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-32页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.1.1 水稻材料 | 第22页 |
2.1.2 稻瘟病菌材料 | 第22页 |
2.2 实验试剂 | 第22页 |
2.3 实验方法 | 第22-32页 |
2.3.1 抗稻瘟病候选基因的筛选 | 第22-23页 |
2.3.2 CRISPR-Cas9敲除载体的构建 | 第23-26页 |
2.3.3 基因互补载体的构建 | 第26-28页 |
2.3.4 水稻转化 | 第28-29页 |
2.3.5 CTAB法大量提取植物叶片DNA | 第29-30页 |
2.3.6 潮霉素检测 | 第30页 |
2.3.7 稻瘟病菌的培养及接种 | 第30-32页 |
第三章 结果与分析 | 第32-46页 |
3.1 确定抗稻瘟病候选基因 | 第32-38页 |
3.1.1 定位区域分布情况分析 | 第32-33页 |
3.1.2 真假基因情况分析 | 第33-38页 |
3.2 敲除载体的构建 | 第38-41页 |
3.2.1 敲除引物的设计 | 第38页 |
3.2.2 敲除载体的构建 | 第38-41页 |
3.3 互补载体的构建 | 第41页 |
3.4 基因功能验证 | 第41-46页 |
3.4.1 敲除载体的功能验证 | 第41-44页 |
3.4.2 互补载体的功能验证 | 第44-46页 |
第四章 讨论 | 第46-48页 |
4.1 抗稻瘟病候选基因筛选方法分析 | 第46页 |
4.2 T0代转基因植株抗病功能验证结果分析 | 第46-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录 | 第54-61页 |