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水稻OsGPRP家族基因结构与表达分析

摘要第3-5页
abstract第5-6页
第一章 文献综述第10-20页
    1.1 植物富含甘氨酸/脯氨酸蛋白基因的研究进展第10-16页
        1.1.1 富含甘氨酸蛋白基因(GRP)的研究进展第10-12页
        1.1.2 富含脯氨酸蛋白基因(PRP)的研究进展第12-14页
        1.1.3 富含甘氨酸和脯氨酸蛋白基因(GPRP)的研究进展第14-16页
    1.2 水稻OsGPRP蛋白基因的研究进展第16页
    1.3 生物信息学分析在功能基因研究中的应用第16-19页
        1.3.1 生物数据库第17页
        1.3.2 多序列比对和系统进化树分析第17-18页
        1.3.3 基因组和蛋白质分析第18-19页
    1.4 本研究的主要内容、目的和意义第19-20页
第二章 材料与方法第20-39页
    2.1 实验仪器及材料第20-26页
        2.1.1 主要试剂与仪器设备第20页
        2.1.2 主要分析软件与在线网站第20页
        2.1.3 主要载体与菌体第20页
        2.1.4 植物材料第20页
        2.1.5 试剂与培养基的配制第20-26页
    2.2 实验方法第26-39页
        2.2.1 生物信息学分析水稻OsGPRP家族基因第26-27页
        2.2.2 水稻材料的处理与烟草材料的种植第27页
        2.2.3 粳稻中花11不同组织总RNA提取第27-28页
        2.2.4 cDNA第一链合成第28页
        2.2.5 qRT-PCR检测OsGPRP家族基因的表达第28-29页
        2.2.6 RT-PCR扩增目的基因片段第29-31页
        2.2.7 OsGPRPs过量表达载体的构建、转化及转基因植株的鉴定第31-35页
        2.2.8 OsGPRP与GFP融合表达载体的构建与烟草瞬时表达第35-37页
        2.2.9 OsGPRP原核表达载体的构建、蛋白表达与检测第37-39页
第三章 结果与分析第39-64页
    3.1 水稻OsGPRP家族基因生物信息学分析第39-45页
        3.1.1 水稻OsGPRP家族基因的基本信息第39-40页
        3.1.2 水稻OsGPRP家族基因的染色体分布第40-41页
        3.1.3 水稻OsGPRP基因的启动子顺式作用元件分析第41-42页
        3.1.4 水稻OsGPRP蛋白保守结构域分析第42-44页
        3.1.5 水稻OsGPRP蛋白系统进化树分析第44-45页
        3.1.6 水稻OsGPRP蛋白亚细胞定位预测第45页
    3.2 正常和逆境下OsGPRP在水稻不同组织中的表达模式第45-48页
        3.2.1 水稻不同组织的总RNA提取第45-46页
        3.2.2 正常情况下OsGPRPs在水稻不同组织中的差异表达第46页
        3.2.3 逆境胁迫下OsGPRP基因在水稻不同组织的表达模式第46-48页
    3.3 OsGPRPs过量表达转基因纯合植株的获得第48-55页
        3.3.1 过量表达目的基因片段克隆第48-49页
        3.3.2 过量表达载体的构建第49-52页
        3.3.3 过量表达载体的遗传转化第52-53页
        3.3.4 转基因T0代阳性植株的鉴定与T2代阳性纯合植株的筛选第53-54页
        3.3.5 过量表达转基因T2代纯合株系的qRT-PCR检测第54-55页
    3.4 OsGPRP蛋白亚细胞定位分析第55-59页
        3.4.1 目的基因片段的克隆第55页
        3.4.2 OsGPRPs与GFP融合表达载体的构建第55-58页
        3.4.3 OsGPRP与GFP融合表达载体转化农杆菌第58页
        3.4.4 OsGPRP蛋白亚细胞定位分析第58-59页
    3.5 OsGPRP蛋白原核表达分析第59-64页
        3.5.1 目的基因片段的克隆第59-60页
        3.5.2 原核表达载体的构建第60-62页
        3.5.3 OsGPRP蛋白在大肠杆菌中的表达与检测第62-64页
第四章 讨论与展望第64-69页
    4.1 GPRP蛋白基因结构特征和进化关系第64页
    4.2 OsGPRP基因启动子顺式作用元件分析第64-65页
    4.3 OsGPRP家族基因表达模式与功能第65-67页
    4.4 OsGPRP蛋白亚细胞定位第67页
    4.5 水稻OsGPRP基因后续生物学功能研究第67-69页
致谢第69-70页
参考文献第70-75页
附录第75-79页
攻读学位期间的研究成果第79页

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