摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
1 引言 | 第9-14页 |
·病程相关蛋白质 | 第9-10页 |
·PR 基因家族分类及组成 | 第9-10页 |
·PR 蛋白质的功能 | 第10页 |
·水稻抗病基因Xa21 抗病相关研究 | 第10-12页 |
·XA21 生化特性研究 | 第11页 |
·Xa21 介导的抗病途径研究 | 第11-12页 |
·Western blotting 技术 | 第12-13页 |
·Western blotting 原理 | 第12页 |
·Western 技术的特点 | 第12页 |
·Western blotting 技术在植物分子生物学研究中的应用 | 第12-13页 |
·研究意义 | 第13-14页 |
2 材料与方法 | 第14-23页 |
·试验材料 | 第14-15页 |
·水稻材料 | 第14页 |
·质粒和菌株 | 第14页 |
·主要试剂和用品 | 第14页 |
·仪器与设备 | 第14-15页 |
·水稻种植与取材 | 第15-16页 |
·水稻种植 | 第15页 |
·培养水稻白叶枯病菌X_oo P6 小种 | 第15页 |
·水稻叶片接种和接水 | 第15-16页 |
·细菌表达载体构建 | 第16-18页 |
·引物的设计合成及PCR 产物扩增 | 第16页 |
·PCR 产物的纯化 | 第16页 |
·PCR 产物和质粒载体的酶切 | 第16-17页 |
·重组载体的构建 | 第17页 |
·细菌感受态制备 | 第17页 |
·热激法将重组载体转入宿主细胞 | 第17-18页 |
·提取质粒DNA 并酶切鉴定 | 第18页 |
·测序验证目的片段 | 第18页 |
·融合蛋白质的诱导表达及SDS-PAGE 检测 | 第18-19页 |
·融合蛋白质的大量表达和纯化 | 第19-20页 |
·融合蛋白质的诱导 | 第19页 |
·包涵体洗涤 | 第19页 |
·镍柱亲和层析 | 第19-20页 |
·多克隆抗体的制备 | 第20页 |
·水稻叶片蛋白质提取 | 第20-22页 |
·水稻叶片全蛋白质粗提 | 第20-21页 |
·水稻蛋白质的定量 | 第21-22页 |
·Westernblotting 检测 | 第22-23页 |
3 结果与分析 | 第23-32页 |
·目标PR 蛋白质的选择 | 第23页 |
·PR 基因编码序列的克隆 | 第23-24页 |
·重组质粒的酶切验证 | 第24-25页 |
·重组蛋白质的小量诱导表达 | 第25页 |
·水稻接种试验 | 第25-26页 |
·水稻蛋白质提取 | 第26-27页 |
·Western blotting 检测PR 蛋白质在不同发育时期水稻叶片中的表达 | 第27-28页 |
·PR 蛋白质在抗病反应中的表达分析 | 第28-29页 |
·PR 蛋白质在抗、感及Mock 反应中的表达 | 第29-30页 |
·感病反应中发生变化的PR 蛋白质 | 第30-32页 |
4 讨论 | 第32-34页 |
5 结论 | 第34-35页 |
参考文献 | 第35-39页 |
附录 | 第39-40页 |
细菌培养基配制 | 第39页 |
水稻叶片蛋白提取液配制 | 第39页 |
水稻白叶枯病菌X_oo 培养基制备 | 第39-40页 |
在读期间发表的学术论文 | 第40-41页 |
作者简历 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |