石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第3-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
论文中常用缩写词英汉对照表 | 第10-13页 |
前言 | 第13-15页 |
综述部分 | 第15-34页 |
1. RNA 干扰的原理 | 第15-24页 |
1.1 RNAi 的发展史 | 第15-16页 |
1.2 RNAi 的作用机理 | 第16-17页 |
1.3 RNAi 的常用载体 | 第17-22页 |
1.4 RNAi 的设计原则 | 第22-24页 |
2. 性别控制技术的研究进展 | 第24-29页 |
2.1 Gadd45G 基因 | 第24-25页 |
2.2 MAPK 细胞通路 | 第25-26页 |
2.3 GATA4 基因 | 第26页 |
2.4 Sry 基因 | 第26-27页 |
2.5 Zfy 基因 | 第27-28页 |
2.6 Sox 基因 | 第28-29页 |
3. 总结和展望 | 第29页 |
参考文献 | 第29-34页 |
试验研究 | 第34-64页 |
实验一 绵羊 Zfy 基因 mRNA 序列的克隆 | 第34-41页 |
1. 材料与方法 | 第34-37页 |
1.1 材料 | 第34-35页 |
1.2 方法 | 第35-37页 |
2. 结果与分析 | 第37-39页 |
2.1 睾丸组织总 RNA 的提取 | 第37页 |
2.2 PCR 扩增结果 | 第37-38页 |
2.3 菌液 PCR 鉴定 | 第38页 |
2.4 测序结果 | 第38-39页 |
3. 讨论 | 第39页 |
参考文献 | 第39-41页 |
实验二 绵羊 Zfy 基因 shRNA 表达载体的构建 | 第41-50页 |
1. 材料与方法 | 第41-44页 |
1.1 主要试剂 | 第41页 |
1.2 主要仪器 | 第41-42页 |
1.3 方法 | 第42-44页 |
2. 结果与分析 | 第44-47页 |
2.1 siRNA 序列的选择 | 第44-45页 |
2.2 表达载体的克隆与酶切鉴定 | 第45-47页 |
3. 讨论 | 第47-48页 |
3.1 siRNA 的表达方法 | 第47页 |
3.2 表达载体的选择 | 第47-48页 |
3.3 重组质粒的鉴定 | 第48页 |
参考文献 | 第48-50页 |
实验三 绵羊 Zfy 基因体外干扰实验 | 第50-58页 |
1. 材料 | 第50-52页 |
1.1 主要试剂 | 第50-51页 |
1.2 主要仪器 | 第51页 |
1.3 主要 PCR 引物 | 第51页 |
1.4 主要实验动物 | 第51-52页 |
2. 主要实验方法 | 第52-54页 |
2.1 重组表达质粒的制备 | 第52页 |
2.2 生精细胞的分离与培养 | 第52页 |
2.3 重组表达质粒转染生精细胞 | 第52-53页 |
2.4 测定生精细胞 Zfy 基因 mRNA 表达水平 | 第53-54页 |
3. 结果与分析 | 第54-56页 |
3.1 重组表达载体转染生精细胞 | 第54页 |
3.2 PCR 结果分析 | 第54-55页 |
3.3 Zfy 基因 mRNA 表达水平 | 第55-56页 |
4.讨论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-58页 |
实验四 Zfy 基因 shRNA 表达载体的体内 RNA 干扰试验 | 第58-64页 |
1.材料与方法 | 第58-59页 |
1.1 主要试剂 | 第58页 |
1.2 主要仪器 | 第58-59页 |
1.3 主要实验动物 | 第59页 |
1.4 重组表达质粒的大量制备与纯化 | 第59页 |
1.5 绵羊体内 Zfy 基因 RNAi 实验 | 第59页 |
2.结果与分析 | 第59-62页 |
2.1 后代性别比例 | 第59-61页 |
2.2 Zfx 基因 mRNA 表达水平 | 第61-62页 |
3.讨论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-64页 |
结论 | 第64-65页 |
创新点 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介 | 第67页 |