| 摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第7-15页 |
| 1.1 植物雄性不育研究意义 | 第7页 |
| 1.2 线粒体基因与植物细胞质雄性不育 | 第7-10页 |
| 1.2.1 植物线粒体基因 | 第7-8页 |
| 1.2.2 线粒体嵌合基因引起细胞质雄性不育 | 第8页 |
| 1.2.3 植物细胞质雄性不育分子机理研究 | 第8-10页 |
| 1.3 利用大肠杆菌研究植物细胞质雄性不育 | 第10-12页 |
| 1.4 水稻红莲型细胞质雄性不育研究现状 | 第12-13页 |
| 1.5 本课题的研究目的与意义 | 第13-15页 |
| 第2章 材料与方法 | 第15-31页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第15-19页 |
| 2.1.1 菌株与培养基 | 第15页 |
| 2.1.2 试剂配制 | 第15-18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-31页 |
| 2.2.1 构建原核表达载体pET-28a-orfH79 | 第19-23页 |
| 2.2.2 ORFH79蛋白的表达及生长曲线的测定 | 第23-25页 |
| 2.2.3 双向凝胶电泳比较差异蛋白 | 第25-31页 |
| 第3章 结果与分析 | 第31-49页 |
| 3.1 pET-28-orfH79载体构建结果 | 第31-34页 |
| 3.1.1 orfH79基因PCR扩增结果 | 第31页 |
| 3.1.2 orfH79基因及pET-28a载体双酶切结果 | 第31-32页 |
| 3.1.3 pET-28a-orfH79载体的菌落PCR鉴定酶切鉴定 | 第32-34页 |
| 3.1.4 重组质粒pET-28a-orfH79测序鉴定 | 第34页 |
| 3.2 Western Blot检测orfH79基因在大肠杆菌中的表达 | 第34-35页 |
| 3.3 生长曲线及活菌落比较结果 | 第35-37页 |
| 3.3.1 测定pET-28a-orfH79转化子表达菌株及空白对照pET-28a菌株的生长曲线 | 第35-36页 |
| 3.3.2 稀释平板法比较活菌落数 | 第36-37页 |
| 3.4 液相氧电极测pET-28a-orfH79表达菌株及pET-28a对照菌株耗氧量 | 第37-38页 |
| 3.5 双向凝胶电泳结果 | 第38-49页 |
| 3.5.1 pET-28a-orfH79转化子表达菌株及空白对照pET-28a菌株的双向凝胶电泳图谱 | 第38-39页 |
| 3.5.2 测序蛋白的数据库鉴定信息 | 第39-43页 |
| 3.5.3 差异蛋白功能分析 | 第43-47页 |
| 3.5.4 利用GO(gene ontology)及BioCyc等其它的功能注释系统来对测序蛋白进行分类 | 第47-49页 |
| 第4章 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 微量的orfH79基因的表达蛋白抑制细菌的对数期生长 | 第49页 |
| 4.2 orfH79基因可能通过影响糖代谢及呼吸电子传递链抑制大肠杆菌生长 | 第49-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第57页 |
