摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 前言 | 第11-25页 |
1.1 十字花科黑腐病菌的概述 | 第11-12页 |
1.1.1 十字花科黑腐病菌 | 第11-12页 |
1.1.2 黄单胞菌属的特征 | 第12页 |
1.2 XCC致病的生化因子 | 第12-16页 |
1.2.1 胞外多糖 | 第13-14页 |
1.2.2 胞外酶 | 第14页 |
1.2.3 脂多糖 | 第14-15页 |
1.2.4 Ⅲ型效应物 | 第15-16页 |
1.3 细菌趋化性的概述 | 第16-23页 |
1.3.1 细菌趋化性 | 第16-17页 |
1.3.2 细菌的运动行为 | 第17-19页 |
1.3.3 细菌趋化性的信号转导机制 | 第19-22页 |
1.3.4 细菌趋化性的调节机制 | 第22-23页 |
1.4 本研究的主要目的和意义 | 第23-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-49页 |
2.1 本实验所用材料 | 第25-36页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第25-28页 |
2.1.2 本实验所用引物 | 第28-33页 |
2.1.3 本实验所用培养基 | 第33-34页 |
2.1.4 本实验试剂的配制 | 第34-35页 |
2.1.5 抗生素的使用 | 第35-36页 |
2.2 本实验的实验技术 | 第36-49页 |
2.2.1 细菌的培养及保存 | 第36-37页 |
2.2.2 细菌基因组DNA提取 | 第37页 |
2.2.3 质粒DNA提取 | 第37-38页 |
2.2.4 化学转化(CaCl_2法)感受细胞的制备 | 第38-39页 |
2.2.5 化学转化 | 第39页 |
2.2.6 三亲接合 | 第39-40页 |
2.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第40页 |
2.2.8 DNA的纯化 | 第40页 |
2.2.9 限制性内切酶酶切 | 第40-41页 |
2.2.10 DNA的连接 | 第41页 |
2.2.11 常规PCR | 第41-42页 |
2.2.12 致病性试验 | 第42-43页 |
2.2.13 过敏性反应试验 | 第43页 |
2.2.14 胞外多糖的定性检测 | 第43-44页 |
2.2.15 胞外酶的检测 | 第44-45页 |
2.2.16 运动能力的检测 | 第45页 |
2.2.17 抗逆性检测 | 第45页 |
2.2.18 生物膜形成检测 | 第45页 |
2.2.19 突变体营养缺陷型检测 | 第45-46页 |
2.2.20 缺失突变体的构建 | 第46-48页 |
2.2.21 缺失突变体的验证 | 第48页 |
2.2.22 构建突变体互补菌株 | 第48-49页 |
第三章 结果与分析 | 第49-74页 |
3.1 蛋白质的生物信息学分析 | 第49-53页 |
3.1.1 基因功能分析 | 第49-51页 |
3.1.2 基因的结构域功能简介 | 第51-52页 |
3.1.3 推测蛋白的基本特征 | 第52-53页 |
3.2 缺失突变体的构建 | 第53-55页 |
3.2.1 基因旁侧同源序列的PCR扩增 | 第53-54页 |
3.2.2 将旁侧同源序列连接到pK18mobsacB载体上 | 第54-55页 |
3.3 缺失突变体的筛选和验证 | 第55-57页 |
3.4 缺失突变体的功能互补 | 第57页 |
3.5 缺失突变体的生长曲线的测定 | 第57-60页 |
3.5.1 缺失突变体在NYGB中的生长曲线 | 第57-58页 |
3.5.2 缺失突变体在MMX中的生长曲线 | 第58-59页 |
3.5.3 缺失突变体在NYGA平板上的生长情况 | 第59页 |
3.5.4 缺失突变体在MMX平板上的生长情况 | 第59-60页 |
3.6 缺失突变体胞外酶的检测 | 第60-62页 |
3.6.1 胞外蛋白酶的检测 | 第60-61页 |
3.6.2 胞外淀粉酶的检测 | 第61页 |
3.6.3 胞外纤维素酶的检测 | 第61-62页 |
3.7 缺失突变体胞外多糖的检测 | 第62-63页 |
3.8 缺失突变体运动能力的检测 | 第63-65页 |
3.9 缺失突变体抗逆性检测 | 第65-66页 |
3.10 缺失突变体生物膜检测 | 第66-67页 |
3.11 缺失突变体的致病性实验 | 第67-68页 |
3.12 过敏性反应试验 | 第68-69页 |
3.13 细菌趋化性的检测 | 第69-74页 |
第四章 结果与讨论 | 第74-77页 |
4.1 结论 | 第74-75页 |
4.2 讨论 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 | 第86页 |