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十字花科黑腐病菌中一类与趋化性相关的感受蛋白基因的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 前言第11-25页
    1.1 十字花科黑腐病菌的概述第11-12页
        1.1.1 十字花科黑腐病菌第11-12页
        1.1.2 黄单胞菌属的特征第12页
    1.2 XCC致病的生化因子第12-16页
        1.2.1 胞外多糖第13-14页
        1.2.2 胞外酶第14页
        1.2.3 脂多糖第14-15页
        1.2.4 Ⅲ型效应物第15-16页
    1.3 细菌趋化性的概述第16-23页
        1.3.1 细菌趋化性第16-17页
        1.3.2 细菌的运动行为第17-19页
        1.3.3 细菌趋化性的信号转导机制第19-22页
        1.3.4 细菌趋化性的调节机制第22-23页
    1.4 本研究的主要目的和意义第23-25页
第二章 材料与方法第25-49页
    2.1 本实验所用材料第25-36页
        2.1.1 菌株和质粒第25-28页
        2.1.2 本实验所用引物第28-33页
        2.1.3 本实验所用培养基第33-34页
        2.1.4 本实验试剂的配制第34-35页
        2.1.5 抗生素的使用第35-36页
    2.2 本实验的实验技术第36-49页
        2.2.1 细菌的培养及保存第36-37页
        2.2.2 细菌基因组DNA提取第37页
        2.2.3 质粒DNA提取第37-38页
        2.2.4 化学转化(CaCl_2法)感受细胞的制备第38-39页
        2.2.5 化学转化第39页
        2.2.6 三亲接合第39-40页
        2.2.7 琼脂糖凝胶电泳第40页
        2.2.8 DNA的纯化第40页
        2.2.9 限制性内切酶酶切第40-41页
        2.2.10 DNA的连接第41页
        2.2.11 常规PCR第41-42页
        2.2.12 致病性试验第42-43页
        2.2.13 过敏性反应试验第43页
        2.2.14 胞外多糖的定性检测第43-44页
        2.2.15 胞外酶的检测第44-45页
        2.2.16 运动能力的检测第45页
        2.2.17 抗逆性检测第45页
        2.2.18 生物膜形成检测第45页
        2.2.19 突变体营养缺陷型检测第45-46页
        2.2.20 缺失突变体的构建第46-48页
        2.2.21 缺失突变体的验证第48页
        2.2.22 构建突变体互补菌株第48-49页
第三章 结果与分析第49-74页
    3.1 蛋白质的生物信息学分析第49-53页
        3.1.1 基因功能分析第49-51页
        3.1.2 基因的结构域功能简介第51-52页
        3.1.3 推测蛋白的基本特征第52-53页
    3.2 缺失突变体的构建第53-55页
        3.2.1 基因旁侧同源序列的PCR扩增第53-54页
        3.2.2 将旁侧同源序列连接到pK18mobsacB载体上第54-55页
    3.3 缺失突变体的筛选和验证第55-57页
    3.4 缺失突变体的功能互补第57页
    3.5 缺失突变体的生长曲线的测定第57-60页
        3.5.1 缺失突变体在NYGB中的生长曲线第57-58页
        3.5.2 缺失突变体在MMX中的生长曲线第58-59页
        3.5.3 缺失突变体在NYGA平板上的生长情况第59页
        3.5.4 缺失突变体在MMX平板上的生长情况第59-60页
    3.6 缺失突变体胞外酶的检测第60-62页
        3.6.1 胞外蛋白酶的检测第60-61页
        3.6.2 胞外淀粉酶的检测第61页
        3.6.3 胞外纤维素酶的检测第61-62页
    3.7 缺失突变体胞外多糖的检测第62-63页
    3.8 缺失突变体运动能力的检测第63-65页
    3.9 缺失突变体抗逆性检测第65-66页
    3.10 缺失突变体生物膜检测第66-67页
    3.11 缺失突变体的致病性实验第67-68页
    3.12 过敏性反应试验第68-69页
    3.13 细菌趋化性的检测第69-74页
第四章 结果与讨论第74-77页
    4.1 结论第74-75页
    4.2 讨论第75-77页
参考文献第77-85页
致谢第85-86页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第86页

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