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LaeA和LaeA-like蛋白调控草酸青霉无性发育及糖苷水解酶合成的研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
符号说明及缩列词第11-12页
第一章 绪论第12-27页
    1.1 真菌纤维素酶性质及其合成调控研究第12-14页
        1.1.1 木质纤维素成分和结构分析第12-13页
        1.1.2 真菌纤维素酶的组成第13页
        1.1.3 真菌纤维素酶基因表达的转录调控第13-14页
    1.2 染色质修饰参与转录调控的研究第14-21页
        1.2.1 染色质结构第15-16页
        1.2.2 染色体构象参与转录调控第16-17页
        1.2.3 组蛋白翻译后修饰第17-21页
    1.3 LaeA功能研究第21-25页
        1.3.1 LaeA的功能研究第21-23页
        1.3.2 LaeA调控染色质结构变化第23-24页
        1.3.3 LaeA-Like甲基转移酶研究进展第24-25页
    1.4 论文立题依据和研究目的第25-27页
第二章 草酸青霉LaeA调控孢子发生及次级代谢机理的研究第27-63页
    2.1 材料和方法第27-33页
        2.1.1 菌株和培养基第27页
        2.1.2 常用试剂第27-28页
        2.1.3 常用仪器第28页
        2.1.4 表达谱样品制备第28页
        2.1.5 基因表达和染色质定位的耦合分析第28-29页
        2.1.6 孢子合成相关的基因表达量分析第29-32页
        2.1.7 laeA相关突变株草酸含量测定第32-33页
    2.2 结果分析第33-59页
        2.2.1 表达谱数据分析揭示突变菌株复杂的调控网络第33-46页
        2.2.2 LaeA参与次级代谢基因簇的沉默第46-49页
        2.2.3 LaeA调控连续基因簇定位于染色质端粒区域第49-51页
        2.2.4 LaeA相关突变株中孢子合成相关基因表达量分析第51-58页
        2.2.5 LaeA和CreA的缺失降低草酸合成量第58-59页
    2.3 讨论第59-63页
        2.3.1 草酸青霉中LaeA和CreA对于无性发育的调控第59-60页
        2.3.2 LaeA和CreA调控草酸青霉基因沉默探讨第60-63页
第三章 草酸青霉类LaeA蛋白功能研究第63-91页
    3.1 材料和方法第63-77页
        3.1.1 菌株和培养基第63-64页
        3.1.2 常用试剂和仪器第64-66页
        3.1.3 LaeA为代表的第23家族甲基转移酶氨基酸序列分析第66页
        3.1.4 第23家族目标操作基因的选取第66页
        3.1.5 第23家族9个基因敲除菌株的构建第66-72页
        3.1.6 laeB、laeC、laeD及laeI四个基因回补菌株的构建第72-73页
        3.1.7 原生质体的制备及转化第73-75页
        3.1.8 野生型菌株及敲除菌株FPA酶活力测定第75-76页
        3.1.9 胞外蛋白浓度的测定第76页
        3.1.10 胞外蛋白SDS-PAGE分析第76页
        3.1.11 野生型114-2与突变菌株的表型分析第76页
        3.1.12 野生型及敲除菌株的孢子计数第76页
        3.1.13 野生型及敲除株菌落形态的显微观察第76-77页
    3.2 结果分析第77-89页
        3.2.1 第23家族甲基转移酶基因序列分析第77-79页
        3.2.2 基因敲除菌株、过表达菌株及回补菌株的构建第79-81页
        3.2.3 敲除株相关表型分析第81-84页
        3.2.4 敲除株纤维素酶活力测定及胞外蛋白分析第84-87页
        3.2.5 ΔlaeB,ΔlaeC及ΔlaeD表达谱分析第87-89页
    3.3 讨论第89-91页
论文创新性结果总结与展望第91-93页
参考文献第93-103页
攻读学位期间发表论文第103-105页
致谢第105-107页
学位论文评阅及答辩情况表第107页

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