中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
符号说明 | 第12-14页 |
前言 | 第14-25页 |
1 鞘氨醇激酶与鞘脂代谢 | 第14-18页 |
1.1 鞘脂代谢 | 第14-15页 |
1.2 “鞘脂开关” | 第15-16页 |
1.3 鞘脂代谢物在细胞存亡与癌症中的作用 | 第16-17页 |
1.4 鞘脂代谢相关激酶 | 第17-18页 |
2 维甲酸 | 第18-23页 |
2.1 维甲酸来源与活性 | 第18-19页 |
2.2 ATRA受体及其基因组活性 | 第19-21页 |
2.3 ATRA非基因组活性 | 第21-22页 |
2.4 维甲酸受体缺失与肿瘤 | 第22-23页 |
3 S1P与SphK对维甲酸活性的影响 | 第23-25页 |
材料与方法 | 第25-46页 |
1 实验材料 | 第25-32页 |
1.1 化合物 | 第25页 |
1.2 细胞株及其培养 | 第25页 |
1.3 试剂 | 第25-28页 |
1.4 仪器设备 | 第28页 |
1.5 试剂配置 | 第28-32页 |
2 实验方法 | 第32-37页 |
2.1 克隆形成抑制实验 | 第32-33页 |
2.2 基因干扰实验 | 第33页 |
2.3 细胞周期检测 | 第33页 |
2.4 Annexin V-FITC/PI双染实验 | 第33-34页 |
2.5 Western blotting检测相关蛋白 | 第34-35页 |
2.6 RT-PCR检测相关基因的mRNA水平 | 第35-37页 |
2.7 数据分析 | 第37页 |
3 实验结果 | 第37-46页 |
3.1 SiRNA干扰细胞内SphK2表达情况 | 第37-38页 |
3.2 SphK2/S1P影响ATRA对HT-29抑制活性 | 第38-39页 |
3.3 SphK2/S1P影响ATRA对HT-29周期抑制活性 | 第39-40页 |
3.4 Western Blotting检测周期相关蛋白表达量 | 第40-41页 |
3.5 SphK2/S1P影响ATRA对HT-29细胞凋亡活性 | 第41-42页 |
3.6 Western Blotting检测凋亡相关蛋白表达量 | 第42-43页 |
3.7 S1P拮抗ATRA诱导的RARβ受体表达 | 第43页 |
3.8 RT-PCR检测SiSphK2对ATRA诱导RARβ表达的影响 | 第43-44页 |
3.9 Western Blotting检测SiSphK2对ATRA诱导RARβ表达的影响 | 第44-45页 |
3.10 Western Blotting检测对相关信号通路的影响 | 第45-46页 |
讨论 | 第46-48页 |
结论 | 第48-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
攻读硕士学位期间发表论文 | 第58-59页 |
附件 | 第59页 |