| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-20页 |
| 1 鸭呼肠孤病毒的损伤机制研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1 鸭呼肠孤病毒的致病特点 | 第12-13页 |
| 1.2 鸭呼肠孤病毒的病原结构特征 | 第13-14页 |
| 2 模式识别受体 | 第14-20页 |
| 2.1 TLRs概述 | 第16-17页 |
| 2.2 TLR3 激活抗病毒反应途径 | 第17-18页 |
| 2.3 RLRs概述 | 第18-19页 |
| 2.4 RIG-I激活抗病毒反应途径 | 第19-20页 |
| 研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 材料和方法 | 第21-33页 |
| 1 实验材料 | 第21-25页 |
| 1.1 病毒 | 第21页 |
| 1.2 细胞 | 第21页 |
| 1.3 实验动物 | 第21页 |
| 1.4 参考序列 | 第21页 |
| 1.5 主要试剂 | 第21-22页 |
| 1.6 主要实验耗材 | 第22页 |
| 1.7 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 1.8 主要溶液及其配制 | 第23-25页 |
| 1.8.1 细胞生长液 | 第23页 |
| 1.8.2 细胞维持液 | 第23-24页 |
| 1.8.3 PBS的配制（0.2M，pH=7.2，无钙镁） | 第24页 |
| 1.8.4 50×TAE缓冲液 | 第24页 |
| 1.8.5 磷酸盐缓冲液 | 第24页 |
| 1.8.6 琼脂糖凝胶 | 第24页 |
| 1.8.7 10%福尔马林溶液 | 第24-25页 |
| 1.8.8 3%过氧化氢水溶液 | 第25页 |
| 2 实验方法 | 第25-33页 |
| 2.1 动物感染及样品采集 | 第25页 |
| 2.2 实验动物的病理学观察 | 第25页 |
| 2.3 实验动物体内鸭呼肠孤病毒的检测 | 第25-30页 |
| 2.3.1 BHK-21 细胞的传代培养 | 第25-26页 |
| 2.3.2 DRV病毒的接种和增殖 | 第26页 |
| 2.3.3 鸭呼肠孤病毒的纯化 | 第26页 |
| 2.3.4 鸭呼肠孤病毒粒子的观察 | 第26-27页 |
| 2.3.5 抗原灭活 | 第27页 |
| 2.3.6 鸭呼肠孤病毒多克隆抗体的制备 | 第27页 |
| 2.3.7 免疫组织染色观察感染鸭脾的病毒定位 | 第27-28页 |
| 2.3.8 RT-PCR检测DRV | 第28-30页 |
| 2.3.8.1 鸭呼肠孤病毒RNA的提取 | 第28-29页 |
| 2.3.8.2 鸭呼肠孤病毒的反转录 | 第29页 |
| 2.3.8.3 鸭呼肠孤病毒S2 基因的扩增 | 第29-30页 |
| 2.4 感染动物TLR3 与RIG-I信号通路表达水平检测 | 第30-32页 |
| 2.4.1 组织总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.4.2 总RNA的反转录 | 第31页 |
| 2.4.3 引物的设计 | 第31-32页 |
| 2.4.4 目的基因的扩增 | 第32页 |
| 2.4.5 实时荧光定量RT-PCR | 第32页 |
| 2.5 数据的统计分析 | 第32-33页 |
| 结果与分析 | 第33-48页 |
| 1 鸭呼肠孤病毒HP09318 株动物模型复制结果 | 第33-39页 |
| 1.1 鸭呼肠孤病毒的增殖与纯化结果 | 第33页 |
| 1.2 临床表现与眼观病变 | 第33-36页 |
| 1.3 组织学病理变化 | 第36-37页 |
| 1.4 鸭呼肠孤病毒脾组织内定位 | 第37-39页 |
| 1.5 鸭呼肠孤病毒S2 基因的扩增 | 第39页 |
| 2 TRL3 与RIG-I信号通路相关分子荧光定量检测结果 | 第39-48页 |
| 2.1 RT-PCR检测 β-actin和TLR3 信号通路相关基因结果 | 第39-40页 |
| 2.2 RT-PCR检测 β-actin和RIG-I结果 | 第40-41页 |
| 2.3 接毒后脾、法氏囊和胸腺内TLR3 的表达水平变化 | 第41-42页 |
| 2.4 接毒后脾、法氏囊和胸腺内TRIF的表达水平变化 | 第42-43页 |
| 2.5 接毒后脾、法氏囊和胸腺内IRF3 的表达水平变化 | 第43-44页 |
| 2.6 接毒后脾、法氏囊和胸腺内RIG-I的表达水平变化 | 第44-45页 |
| 2.7 接毒后脾、法氏囊和胸腺内IFNβ的表达水平变化 | 第45-48页 |
| 讨论 | 第48-51页 |
| 1 人工感染动物模型的复制 | 第48页 |
| 2 雏鸭感染DRV后机体内TLR3 介导的抗病毒反应 | 第48-49页 |
| 3 雏鸭感染DRV后机体内RIG-I介导的抗病毒反应 | 第49-50页 |
| 4 雏鸭感染DRV后机体内IRF3 与IFNβ 在机体内的作用 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录 硕士期间发表论文 | 第62页 |
