中文摘要 | 第3-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
前言 | 第13-16页 |
1.1 前列腺癌流行病学概况 | 第13页 |
1.2 前列腺癌的筛查及治疗现状 | 第13-15页 |
1.3 URG11的国内外研究进展 | 第15-16页 |
第一章 URG11siRNA筛选实验 | 第16-26页 |
1.实验材料 | 第16-21页 |
1.1 URG11siRNA 干扰序列片段及反密码链由 sigma 设计公司提供 | 第16-17页 |
1.2 实验方法 | 第17-18页 |
1.3 细胞培养 | 第18页 |
1.4 siRNA 筛选转染 | 第18-19页 |
1.5 慢病毒质粒构建 | 第19页 |
1.6 细胞转染 | 第19-20页 |
1.7 western blotting | 第20-21页 |
2.实验方法 | 第21页 |
2.1 总蛋白抽提 | 第21页 |
2.2 蛋白样品初步定量 | 第21页 |
3 SDS-PAGE 电泳 | 第21页 |
4 蛋白质转移 | 第21-22页 |
5 免疫印记 | 第22页 |
6 总 RNA 纯度和完整性检测 | 第22-24页 |
7 URG11siRNA筛选实验结果 | 第24-25页 |
8 实验结果讨论 | 第25-26页 |
第二章 RNA干扰URG11基因表达对LNCAP细胞增殖和调亡的研究 | 第26-35页 |
1.构建稳定沉默内源性URG11的前列腺癌细胞株 | 第26-29页 |
2.Western Blot 检验沉默后 LNCAP 细胞的 URG11 蛋白表达情况 | 第29-31页 |
3.MTS/CCK-8 法检测细胞增殖 | 第31-32页 |
4.Transwell 检测细胞迁移能力 | 第32页 |
5.流式检测细胞凋亡 | 第32-33页 |
6.流式检测细胞周期 | 第33页 |
7.细胞迁移实验(划痕检测) | 第33-34页 |
8.transwell 检测细胞侵袭能力 | 第34-35页 |
第三章 RNA干扰URG11基因表达对LNCAP细胞增殖和调亡的研究结果 | 第35-52页 |
1 前列腺癌细胞系的培养情况 | 第35-36页 |
2.Real-time-PCR检验沉默后LNCaP细胞的URG11mRNA表达情况 | 第36-38页 |
3.Western Blot检验沉默后LNCaP细胞的URG11蛋白表达情况 | 第38-40页 |
4.CCK-8 检验沉默后LNCaP细胞增殖检测 | 第40-41页 |
5.CCK-8 检验沉默后 LNCaP 细胞增殖检测结果 | 第41-42页 |
6.FCM 细胞周期检测 | 第42-43页 |
7.流式沉默后前列腺癌细胞周期结果 | 第43-44页 |
8.流式检测细胞凋亡率 | 第44-45页 |
9.FCM 沉默后前列腺癌细胞凋亡结果 | 第45-46页 |
10.细胞划痕实验 | 第46-48页 |
11.细胞迁移实验(划痕检测)结果 | 第48页 |
12.细胞迁移实验 | 第48-50页 |
13.Transwell 检测沉默后前列腺癌细胞迁移能力结果 | 第50页 |
14.细胞侵袭实验 | 第50-52页 |
15.Transwell 检测沉默后前列腺癌细胞侵袭能力结果 | 第52页 |
第四章 讨论 | 第52-57页 |
全文总结 | 第57-58页 |
1 本课题的选题思路及创新性 | 第57页 |
2 本研究的结果及其意义 | 第57页 |
3 本课题中存在的不足及展望 | 第57-58页 |
结论 | 第58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
实验主要试剂及仪器 | 第65-70页 |
附录 1. 缩略词表 | 第70-71页 |
附录 2 | 第71-73页 |
致谢 | 第73页 |