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拟南芥BES1转录因子家族多基因缺失突变体的构建及表型观察统计

中文摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 前言第10-17页
    1.1 油菜素内酯信号通路第10-15页
        1.1.1 油菜素内酯的发现第10页
        1.1.2 油菜素内酯信号通路的完善第10-12页
        1.1.3 BES1/BZR1转录因子的发现及其功能研究第12-15页
        1.1.4 BES1转录因子家族第15页
    1.2 本研究的思路第15-17页
第二章 材料与方法第17-33页
    2.1 基因型鉴定第17-19页
        2.1.1 实验材料第17页
        2.1.2 拟南芥基因组DNA的快提溶液的配制方法第17页
        2.1.3 拟南芥基因组DNA的快提方法第17页
        2.1.4 拟南芥基因型鉴定第17-19页
    2.2 拟南芥遗传杂交第19-20页
        2.2.1 材料第19页
        2.2.2 杂交步骤第19-20页
    2.3 DNA的琼脂糖凝胶电泳第20-21页
        2.3.1 琼脂糖凝胶电泳的原理第20页
        2.3.2 所需试剂与仪器第20页
        2.3.3 DNA凝胶电泳的步骤第20-21页
    2.4 植物总RNA之快速提取法第21-22页
        2.4.1 所需试剂及材料第21页
        2.4.2 植物总RNA的提取步骤第21-22页
    2.5 反转录及RT-PCR第22-23页
        2.5.1 所需仪器及试剂第22页
        2.5.2 反转录的步骤第22页
        2.5.3 RT-PCR第22-23页
    2.6 基因克隆技术第23-26页
        2.6.1 实验所需试剂、仪器第23页
        2.6.2 克隆基因的步骤第23-25页
        2.6.3 BP反应第25页
        2.6.4 BP反应产物转化DH5α 感受态细胞第25页
        2.6.5 菌落PCR与结果判断第25-26页
        2.6.6 对入门载体做LR反应第26页
        2.6.7 表达载体的获得第26页
    2.7 转基因植物材料的构建第26-27页
        2.7.1 农杆菌的热激转化第26-27页
        2.7.2 农杆菌浸花感染第27页
    2.8 大肠杆菌DH5α 感受态细胞的制备第27-29页
        2.8.1 所需试剂及仪器第27-28页
        2.8.2 DH5α 感受态细胞的制备的方法步骤第28-29页
    2.9 GUS染色技术第29-30页
        2.9.1 试剂、材料与仪器第29-30页
        2.9.2 GUS染色的具体步骤第30页
    2.10 拟南芥种子的消毒处理第30页
        2.10.1 试剂及材料第30页
        2.10.2 种子消毒的步骤第30页
    2.11 实验室常用抗生素的配制第30-31页
        2.11.1 试剂与材料第30-31页
        2.11.2 常见抗生素的工作浓度及储存浓度第31页
        2.11.3 配制方法第31页
    2.12 实验室常用培养基的配制第31-33页
        2.12.1 LB培养基的配制第31-32页
        2.12.2 MS培养基的配制第32-33页
第三章 实验结果第33-74页
    3.1 对所有T-DNA突变体基因型鉴定第33-34页
    3.2 RT-PCR检测各T-DNA插入突变第34-35页
    3.3 BES1转录因子家族六个基因表达模式分析第35-42页
    3.4 单基因缺失突变体的表现型第42-50页
        3.4.1 单基因缺失突变体的莲座表型观察与统计第42-44页
        3.4.2 单基因缺失突变体的光下、暗下生长表型观察与统计第44-46页
        3.4.3 单基因缺失突变体激素处理的表型观察与数据统计分析第46-48页
        3.4.4 单基因缺失突变体抽薹时间、分枝数的统计分析第48-50页
    3.5 现有单基因缺失突变体的遗传杂交结果第50-51页
    3.6 现有双基因、多基因缺失突变体表型观察与数据分析统计第51-67页
        3.6.1 双基因、多基因缺失突变体的莲座表型观察与统计第51-54页
        3.6.2 双基因、多基因缺失突变体的光下、暗下生长表型观察与统计第54-59页
        3.6.3 双基因、多基因缺失突变体激素处理的数据统计分析第59-62页
        3.6.4 双基因、多基因缺失突变体抽薹时间、分枝数的统计分析第62-65页
        3.6.5 部分多基因缺失突变体 100 nM BL处理前后BR合成基因的表达量变化第65-67页
    3.7 BZR1-SRDX和BES1-SRDX转基因植株构建、表型观察与统计第67-74页
        3.7.1 转基因材料的莲座叶表型观察与数据统计第67-69页
        3.7.2 转基因材料的光下、暗下生长表型观察与统计第69-71页
        3.7.3 激素处理前后的转基因植株的表型观察与数据统计分析第71-72页
        3.7.4 转基因植株的抽薹时间、分枝数的统计分析第72-74页
第四章 讨论第74-78页
附录第78-81页
参考文献第81-85页
致谢第85页

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