| 致谢 | 第4-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 第1章 引言 | 第11-31页 |
| 1.1 膜蛋白晶体结构解析 | 第11-19页 |
| 1.1.1 膜蛋白简介 | 第11页 |
| 1.1.2 膜蛋白的表达 | 第11-14页 |
| 1.1.3 膜蛋白的纯化方法 | 第14-18页 |
| 1.1.4 膜蛋白的结晶方法 | 第18-19页 |
| 1.2 G蛋白偶联受体的结构生物学研究 | 第19-31页 |
| 1.2.1 G蛋白偶联受体概述 | 第19-21页 |
| 1.2.2 GPCR的信号转导 | 第21-22页 |
| 1.2.3 GPCR结构研究的意义 | 第22-23页 |
| 1.2.4 GPCR的结构研究进展 | 第23-24页 |
| 1.2.5 GPCR的结构特征 | 第24-27页 |
| 1.2.6 GPCR的结构生物学研究方法 | 第27-30页 |
| 1.2.7 小结 | 第30-31页 |
| 第2章 嘌呤能受体P2Y_1R的简介 | 第31-36页 |
| 2.1 嘌呤能受体的发现 | 第31页 |
| 2.2 嘌呤能受体的分类和功能 | 第31-34页 |
| 2.3 嘌呤能受体P2Y_1R的功能和研究意义 | 第34-36页 |
| 第3章 P2Y_1R与不同配体复合物的结构生物学研究 | 第36-82页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 材料和方法 | 第36-52页 |
| 3.2.1 主要的实验试剂和仪器 | 第36-41页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第41-52页 |
| 1. P2Y_1R基因扩增 | 第41-43页 |
| 2. 蓝白斑筛选 | 第43-44页 |
| 3. 蛋白表达 | 第44页 |
| 4. 细胞膜的提纯 | 第44-45页 |
| 5. 蛋白质纯化及性质检测 | 第45-46页 |
| 6. 表达载体的优化 | 第46-47页 |
| 7. 小分子配体的筛选 | 第47页 |
| 8. 中量纯化实验 | 第47-49页 |
| 9. 蛋白结晶实验 | 第49-51页 |
| 10. 晶体采集和X-射线衍射实验 | 第51页 |
| 11. 晶体结构解析及结构分析 | 第51-52页 |
| 3.3 实验结果 | 第52-78页 |
| 3.3.1 表达载体的筛选和优化结果 | 第52-58页 |
| 3.3.2 拮抗剂的筛选 | 第58-60页 |
| 3.3.3 蛋白纯化条件的摸索 | 第60-61页 |
| 3.3.4 中量蛋白纯化的实验结果 | 第61-62页 |
| 3.3.5 P2Y_1R－MRS2500复合物蛋白的结晶实验 | 第62-68页 |
| 3.3.6 P2Y_1R－BPTU复合物蛋白的结晶实验 | 第68-69页 |
| 3.3.7 晶体衍射数据收集和结构解析 | 第69-70页 |
| 3.3.8 P2Y_1R与拮抗剂复合物晶体结构分析 | 第70-78页 |
| 3.4 P2Y_1R与激动剂复合物的结构生物学研究 | 第78-82页 |
| 3.4.1 表达载体的筛选和优化 | 第78-79页 |
| 3.4.2 激动剂的筛选 | 第79页 |
| 3.4.3 纳米抗体的筛选 | 第79-80页 |
| 3.4.4 未来计划 | 第80-82页 |
| 第4章 结论与讨论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-94页 |
| 附录1-缩略词表 | 第94-96页 |
| 附录2-图表索引 | 第96-98页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文和研究成果 | 第98-99页 |
