| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-21页 |
| 1.1 棉花生长发育与氮素营养 | 第13-15页 |
| 1.1.1 氮素的重要生理功能 | 第13-14页 |
| 1.1.2 氮素对棉花生长发育期的影响 | 第14页 |
| 1.1.3 棉花种植中施用氮肥存在的问题 | 第14-15页 |
| 1.2 植物同化氮素的途径 | 第15-16页 |
| 1.3 植物体内与氮吸收有关的酶 | 第16-17页 |
| 1.3.1 硝酸还原酶、亚硝酸还原酶 | 第16页 |
| 1.3.2 谷氨酸脱氢酶 | 第16页 |
| 1.3.3 谷氨酸合酶/谷氨酰胺合成酶 | 第16-17页 |
| 1.4 谷氨酰胺合成酶概述 | 第17-21页 |
| 1.4.1 GS的结构、分类及不同的功能 | 第17页 |
| 1.4.2 GS的生理作用 | 第17-18页 |
| 1.4.3 GS基因表达的调控 | 第18-19页 |
| 1.4.4 GS活性的影响因素 | 第19-21页 |
| 第二章 引言 | 第21-23页 |
| 2.1 立题依据 | 第21-22页 |
| 2.2 技术路线 | 第22-23页 |
| 第三章 材料与方法 | 第23-31页 |
| 3.1 材料 | 第23-26页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 3.1.2 菌株与载体 | 第23页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第24页 |
| 3.1.5 常用抗生素与GUS染液配方 | 第24-25页 |
| 3.1.6 拟南芥PNS营养液 | 第25页 |
| 3.1.7 基本培养基 | 第25-26页 |
| 3.1.8 棉花遗传转化培养基 | 第26页 |
| 3.2 方法 | 第26-31页 |
| 3.2.1 大肠杆菌质粒提取 | 第26-27页 |
| 3.2.2 农杆菌质粒提取 | 第27页 |
| 3.2.3 棉花遗传转化 | 第27页 |
| 3.2.4 转基因植株的鉴定 | 第27页 |
| 3.2.5 拟南芥遗传转化 | 第27-28页 |
| 3.2.6 拟南芥阳性转化子筛选 | 第28页 |
| 3.2.7 植物基因组DNA的提取 | 第28页 |
| 3.2.8 植物总RNA的提取 | 第28页 |
| 3.2.9 反转录成cDNA | 第28-29页 |
| 3.2.10 转基因棉花基因表达量分析 | 第29页 |
| 3.2.11 棉花的营养液培养 | 第29页 |
| 3.2.12 叶绿素的提取及测定 | 第29-30页 |
| 3.2.13 总氮含量测定 | 第30-31页 |
| 第四章 结果与分析 | 第31-47页 |
| 4.1 GhGS基因的生物信息学分析 | 第31-33页 |
| 4.2 GhGS1基因在棉花不同组织器官中的表达特性分析 | 第33-34页 |
| 4.3 不同因素对GhGS1基因表达的影响 | 第34-37页 |
| 4.3.1 不同供氮水平对GhGS1基因表达的影响 | 第34-35页 |
| 4.3.2 GhGS1基因在不同棉花品种中的表达水平 | 第35-36页 |
| 4.3.3 GhGS1基因在棉花叶片衰老时的表达水平变化 | 第36-37页 |
| 4.4 GhGS1启动子的克隆及表达模式分析 | 第37-40页 |
| 4.4.1 GhGS1启动子的克隆及表达载体构建 | 第37-38页 |
| 4.4.2 GhGS1启动子序列分析 | 第38-39页 |
| 4.4.3 GhGS1启动子在拟南芥中的表达模式 | 第39-40页 |
| 4.4.4 GhGS1启动子在棉花中的组织化学染色 | 第40页 |
| 4.5 GhGS1超量表达载体的构建及转基因棉花植株的获得 | 第40-42页 |
| 4.5.1 GhGS1超量表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 4.5.2 T_0代超表达转基因棉花植株的获得 | 第41页 |
| 4.5.3 T_1代超表达转基因棉花植株筛选 | 第41-42页 |
| 4.6 超量表达GhGS1基因对棉花生长发育的影响 | 第42-47页 |
| 4.6.1 T_1代超表达转基因棉花植株的叶绿素含量分析 | 第42页 |
| 4.6.2 T_2代超表达转基因棉花植株的叶绿素含量分析 | 第42-44页 |
| 4.6.3 超量表达GhGS1基因对棉花叶片总氮含量的影响 | 第44页 |
| 4.6.4 超量表达GhGS1基因对棉花生长发育的影响 | 第44-47页 |
| 第五章 讨论 | 第47-49页 |
| 5.1 植物体内的氮同化途径是一个受多种因素调控的复杂的过程 | 第47页 |
| 5.2 超量表达GhGS1基因对棉花耐低氮胁迫能力的影响 | 第47-48页 |
| 5.3 GhGS1基因可能参与棉花种子和纤维发育的过程 | 第48-49页 |
| 第六章 结论 | 第49-51页 |
| 6.1 主要结论 | 第49页 |
| 6.2 论文创新点 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-59页 |
| 附录一 缩略词表 | 第59-61页 |
| 附录二 | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
