中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略语/符号说明 | 第12-13页 |
前言 | 第13-16页 |
研究现状、成果 | 第13-15页 |
研究目的、方法 | 第15-16页 |
材料和方法 | 第16-32页 |
1.1 材料 | 第16-20页 |
1.1.1 细胞株 | 第16页 |
1.1.2 主要仪器设备 | 第16-17页 |
1.1.3 相关试剂及耗材 | 第17-18页 |
1.1.4 主要液体配制 | 第18-20页 |
1.2 实验方法 | 第20页 |
1.2.1 细胞培养 | 第20页 |
1.2.2 药物配制 | 第20页 |
1.3 RT-PCR检测SKOV3细胞中Beclin1、Bcl-2、CHOP的mRNA表达 | 第20-24页 |
1.3.1 实验分组及处理 | 第20页 |
1.3.2 细胞总RNA提取 | 第20-21页 |
1.3.3 紫外分光光度计测定RNA浓度和纯度 | 第21页 |
1.3.4 RNA逆转录合成cDNA | 第21页 |
1.3.5 PCR | 第21-23页 |
1.3.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
1.3.7 实验结果分析方法 | 第23-24页 |
1.4 Western Blot法检测SKOV3细胞中Beclin1、Bcl-2、CHOP的蛋白表达 | 第24-28页 |
1.4.1 实验分组及处理 | 第24页 |
1.4.2 细胞总蛋白的提取 | 第24页 |
1.4.3 蛋白质总浓度的测定 | 第24-25页 |
1.4.4 蛋白质变性 | 第25页 |
1.4.5 SDS-PAGE电泳、电转移及封闭 | 第25-27页 |
1.4.6 蛋白质免疫检测 | 第27页 |
1.4.7 辣根过氧化物酶(HRP)法显影 | 第27-28页 |
1.4.8 实验结果分析方法 | 第28页 |
1.5 GFP-LC3-Ⅱ荧光染色法检测细胞自噬 | 第28-29页 |
1.5.1 原理 | 第28页 |
1.5.2 实验分组及处理 | 第28页 |
1.5.3 BAPTA-AM及A23187分别对SKOV3细胞自噬的影响 | 第28-29页 |
1.6 流式细胞术检测SKOV3细胞凋亡 | 第29-30页 |
1.6.1 原理 | 第29页 |
1.6.2 细胞接种及培养 | 第29页 |
1.6.3 细胞分组及处理 | 第29-30页 |
1.7 MTT法测定顺铂、BAPTA-AM及A23187联合顺铂对SKOV3细胞生长的影响 | 第30-31页 |
1.7.1 MTT法的原理 | 第30页 |
1.7.2 实验分组及处理 | 第30-31页 |
1.7.3 BAPTA-AM及A23187分别联合顺铂对SKOV3细胞生长的影响 | 第31页 |
1.8 统计学方法 | 第31-32页 |
结果 | 第32-36页 |
2.1 SKOV3细胞中GRP78对Beclin1、Bcl-2、CHOP mRNA表达的影响 | 第32-33页 |
2.2 SKOV3细胞中GRP78对Beclin1、Bcl-2、CHOP蛋白表达的影响 | 第33-34页 |
2.3 GRP78对SKOV3细胞自噬的影响 | 第34页 |
2.4 GRP78对SKOV3细胞凋亡的影响 | 第34-35页 |
2.5 BAPTA-AM、A23187对SKOV3细胞顺铂敏感性的影响 | 第35-36页 |
讨论 | 第36-45页 |
3.1 GRP78与内质网应激 | 第36-37页 |
3.2 GRP78在细胞自噬中的作用 | 第37-39页 |
3.3 GRP78在细胞凋亡中的作用 | 第39-43页 |
3.4 GRP78对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响 | 第43-45页 |
结论 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第51-52页 |
综述 细胞自噬及自噬相关基因Beclin1与卵巢癌 | 第52-63页 |
综述参考文献 | 第58-63页 |
致谢 | 第63页 |