| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| 1.1 根瘤菌与豆科植物共生固氮概述 | 第10-13页 |
| 1.1.1 生物固氮 | 第10页 |
| 1.1.2 共生固氮 | 第10-13页 |
| 1.1.3 刺槐与根瘤菌的共生固氮 | 第13页 |
| 1.2 细菌中三型分泌系统的研究 | 第13-21页 |
| 1.2.1 分泌系统简介 | 第13-18页 |
| 1.2.2 分泌蛋白的预测和研究 | 第18-21页 |
| 1.3 研究内容及技术路线 | 第21-23页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第21页 |
| 1.3.2 实验方案及技术路线 | 第21-23页 |
| 第二章 效应蛋白NopT的预测及表达分析 | 第23-28页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.2.1 细菌和培养基 | 第23页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-25页 |
| 2.3.1 RNA的提取 | 第24页 |
| 2.3.2 cDNA合成 | 第24-25页 |
| 2.3.3 实时荧光定量实验 | 第25页 |
| 2.4 结果与分析 | 第25-27页 |
| 2.4.1 分泌蛋白的预测 | 第25页 |
| 2.4.2 类黄酮诱导基因表达 | 第25-27页 |
| 2.5 讨论 | 第27-28页 |
| 第三章 NopT生物信息学分析 | 第28-31页 |
| 3.1 引言 | 第28页 |
| 3.2 研究内容 | 第28页 |
| 3.3 结果与分析 | 第28-31页 |
| 第四章 目的基因的敲除 | 第31-40页 |
| 4.1 引言 | 第31页 |
| 4.2 材料、试剂和仪器 | 第31-32页 |
| 4.2.1 供试菌株 | 第31页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第31-32页 |
| 4.2.3 仪器及设备 | 第32页 |
| 4.3 实验方法 | 第32-37页 |
| 4.3.1 CTAB法提取根瘤菌总DNA，提取方法见附录 4。 | 第32页 |
| 4.3.2 用试剂盒小提质粒，具体方法见附录 5。 | 第32页 |
| 4.3.3 基因敲除载体的构建 | 第32-35页 |
| 4.3.4 三亲杂交 | 第35页 |
| 4.3.5 突变体的筛选 | 第35-37页 |
| 4.4 结果与分析 | 第37-39页 |
| 4.4.1 5221基因敲除载体的构建 | 第37页 |
| 4.4.2 5221基因突变体筛选 | 第37-39页 |
| 4.5 讨论 | 第39-40页 |
| 第五章 突变体菌株与刺槐的共生结瘤 | 第40-46页 |
| 5.1 引言 | 第40页 |
| 5.2 材料、试剂和仪器 | 第40-41页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第40页 |
| 5.2.2 试剂与配方 | 第40页 |
| 5.2.3 实验仪器 | 第40-41页 |
| 5.3 实验方法 | 第41-43页 |
| 5.3.1 植物结瘤实验 | 第41-42页 |
| 5.3.2 石蜡切片观察根瘤形态结构 | 第42-43页 |
| 5.4 结果与分析 | 第43-45页 |
| 5.4.1 突变体菌株对宿主植物结瘤及生长的影响 | 第43-44页 |
| 5.4.2 突变体回接刺槐的根瘤结构 | 第44-45页 |
| 5.5 讨论 | 第45-46页 |
| 第六章 结论与创新 | 第46-48页 |
| 6.1 分泌蛋白的预测 | 第46页 |
| 6.2 突变体对刺槐植物的影响 | 第46页 |
| 6.3 创新与展望 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录 | 第52-59页 |
| 缩略词 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |