摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-25页 |
1.1 哮喘 | 第13-15页 |
1.1.1 哮喘概述 | 第13-14页 |
1.1.2 治疗哮喘的药物及其作用机理 | 第14-15页 |
1.2 手性药物 | 第15-18页 |
1.2.1 手性药物概述 | 第15-16页 |
1.2.2 β_2-AR激动剂类手性药物 | 第16-18页 |
1.3 大电导钙激活的钾离子(BK_(Ca))通道 | 第18-23页 |
1.3.1 膜片钳技术简介 | 第18-20页 |
1.3.2 BK_(Ca)通道概述 | 第20-21页 |
1.3.3 BK_(Ca)通道的分布及结构特点 | 第21-22页 |
1.3.4 BK_(Ca)通道的生理功能与疾病的联系 | 第22-23页 |
1.4 研究背景、意义和内容 | 第23-25页 |
1.4.1 研究背景 | 第23页 |
1.4.2 研究意义 | 第23-24页 |
1.4.3 研究内容 | 第24-25页 |
第二章 HEK293-β_2细胞株的构建及BK_(Ca)通道的鉴定 | 第25-52页 |
2.1 引言 | 第25-26页 |
2.2 实验试剂与仪器 | 第26-30页 |
2.2.1 实验试剂 | 第26-29页 |
2.2.2 实验仪器 | 第29-30页 |
2.3 实验方法 | 第30-46页 |
2.3.1 溶液的配制 | 第30-33页 |
2.3.2 细胞培养 | 第33-34页 |
2.3.3 高表达β_2-AR的HEK293细胞株的构建 | 第34-35页 |
2.3.4 高表达β_2-AR的HEK293细胞株的鉴定 | 第35-38页 |
2.3.5 DH5α 感受态的制备 | 第38-39页 |
2.3.6 BK_(Ca)及GFP质粒的扩增、提取 | 第39-40页 |
2.3.7 BK_(Ca)质粒瞬时转染HEK293-β_2细胞 | 第40-41页 |
2.3.8 Western blot检测β_2-AR及BK_(Ca)蛋白 | 第41-44页 |
2.3.9 膜片钳单通道模式记录BK_(Ca)通道 | 第44-45页 |
2.3.10 统计学方法 | 第45-46页 |
2.4 结果与讨论 | 第46-51页 |
2.4.1 高表达β_2-AR的HEK293细胞株构建及鉴定 | 第46-47页 |
2.4.2 BK_(Ca)及GFP质粒提取的鉴定 | 第47-48页 |
2.4.3 BK_(Ca)通道蛋白的鉴定 | 第48-51页 |
2.5 本章小结 | 第51-52页 |
第三章 Rac-、R-及S-terbutaline对BK_(Ca)通道作用影响 | 第52-67页 |
3.1 引言 | 第52-53页 |
3.2 实验试剂与仪器 | 第53-54页 |
3.2.1 实验试剂 | 第53-54页 |
3.2.2 实验仪器 | 第54页 |
3.3 实验方法 | 第54-57页 |
3.3.1 溶液的配制 | 第54-55页 |
3.3.2 Rac-terbutaline不同作用时间对BK_(Ca)通道开放概率测定 | 第55-56页 |
3.3.3 Rac-terbutaline不同浓度对BK_(Ca)通道开放概率测定 | 第56页 |
3.3.4 R-terbutaline对BK_(Ca)通道开放概率测定 | 第56-57页 |
3.3.5 S-terbutaline对BK_(Ca)通道开放概率测定 | 第57页 |
3.3.6 统计学方法 | 第57页 |
3.4 结果与讨论 | 第57-65页 |
3.4.1 Rac-terbutaline不同作用时间对BK_(Ca)通道开放概率影响 | 第57-59页 |
3.4.2 Rac-terbutaline不同浓度对BK_(Ca)通道开放概率影响 | 第59-63页 |
3.4.3 R-及S-terbutaline对BK_(Ca)通道开放概率影响 | 第63-64页 |
3.4.4 讨论 | 第64-65页 |
3.5 本章小结 | 第65-67页 |
第四章R-和S-terbutaline对BK_(Ca)通道作用机制研究 | 第67-76页 |
4.1 引言 | 第67-68页 |
4.2 实验试剂与仪器 | 第68-69页 |
4.2.1 实验试剂 | 第68页 |
4.2.2 实验仪器 | 第68-69页 |
4.3 实验方法 | 第69-71页 |
4.3.1 溶液的配制 | 第69页 |
4.3.2 HEK293和HEK293-β_2细胞上BK_(Ca)通道开放概率测定 | 第69页 |
4.3.3 R-及S-terbutaline在β_2-AR阻断剂下对BK_(Ca)通道开放概率测定 | 第69-70页 |
4.3.4 S-terbutaline在M受体阻断剂下对BK_(Ca)通道开放概率测定 | 第70页 |
4.3.5 统计学方法 | 第70-71页 |
4.4 结果与讨论 | 第71-74页 |
4.4.1 HEK293和HEK293-β_2细胞上BK_(Ca)通道开放概率比较 | 第71页 |
4.4.2 R-和S-terbutaline在β_2-AR阻断剂下对BK_(Ca)通道开放概率比较 | 第71-72页 |
4.4.3 S-terbutaline在M受体阻断剂下对BK_(Ca)通道开放概率影响 | 第72-73页 |
4.4.4 讨论 | 第73-74页 |
4.5 本章小结 | 第74-75页 |
4.6 R-和S-terbutaline激活BK_(Ca)通道作用机制总结 | 第75-76页 |
结论与展望 | 第76-78页 |
结论 | 第76页 |
创新之处 | 第76-77页 |
展望 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-88页 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第88-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
附表 | 第90页 |