| 中文摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 符号说明 | 第13-15页 |
| 第一部分 前言 | 第15-29页 |
| 1 胭脂红的特性、毒性及应用情况 | 第15-19页 |
| 1.1 食品色素与胭脂红 | 第15-16页 |
| 1.2 胭脂红的理化性质 | 第16页 |
| 1.3 胭脂红的毒性 | 第16-18页 |
| 1.3.1 偶氮类合成色素的毒性 | 第16-17页 |
| 1.3.2 急性毒性 | 第17页 |
| 1.3.3 慢性毒性 | 第17页 |
| 1.3.4 一般毒性 | 第17-18页 |
| 1.3.5 生殖遗传毒性 | 第18页 |
| 1.3.6 联合毒性 | 第18页 |
| 1.4 相关应用标准 | 第18-19页 |
| 1.4.1 国外应用标准 | 第18页 |
| 1.4.2 国内应用标准 | 第18-19页 |
| 1.4.3 应用现状 | 第19页 |
| 2 胭脂红检测方法研究进展 | 第19-28页 |
| 2.1 样品前处理 | 第19-22页 |
| 2.1.1 固相萃取法 | 第20-21页 |
| 2.1.2 液-液萃取法 | 第21页 |
| 2.1.3 超声波萃取法 | 第21-22页 |
| 2.1.4 其他提取方法 | 第22页 |
| 2.2 色谱分析法 | 第22-24页 |
| 2.2.1 薄层色谱法 | 第22页 |
| 2.2.2 高效液相色谱法 | 第22-23页 |
| 2.2.3 超高效液相色谱法 | 第23-24页 |
| 2.3 液相色谱-质谱联用法 | 第24页 |
| 2.4 电化学分析法 | 第24-25页 |
| 2.4.1 极谱法 | 第24-25页 |
| 2.4.2 毛细管电泳法 | 第25页 |
| 2.5 光谱分析法 | 第25-26页 |
| 2.5.1 分光光度法 | 第25-26页 |
| 2.5.2 荧光光谱法 | 第26页 |
| 2.6 免疫分析方法 | 第26-27页 |
| 2.6.1 酶联免疫分析法 | 第26-27页 |
| 2.6.2 分子印迹技术 | 第27页 |
| 2.7 其他检测方法 | 第27-28页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
| 第二部分 胭脂红人工抗原的制备与鉴定 | 第29-39页 |
| 1 材料和方法 | 第29-33页 |
| 1.1 主要试剂 | 第29页 |
| 1.2 仪器与材料 | 第29页 |
| 1.3 主要溶液系统 | 第29-30页 |
| 1.4 胭脂红人工抗原的制备 | 第30-32页 |
| 1.4.1 透析袋的处理 | 第30页 |
| 1.4.2 完全抗原A的制备 | 第30-31页 |
| 1.4.3 完全抗原B的制备 | 第31-32页 |
| 1.5 人工抗原的分析 | 第32-33页 |
| 1.5.1 人工抗原蛋白质浓度的测定 | 第32-33页 |
| 1.5.2 人工抗原紫外光谱扫描法鉴定 | 第33页 |
| 1.5.3 人工抗原SDS-PAGE凝胶电泳鉴定 | 第33页 |
| 2 结果 | 第33-36页 |
| 2.1 人工抗原蛋白浓度的测定结果 | 第33-34页 |
| 2.2 人工抗原的紫外光谱扫描结果 | 第34-36页 |
| 2.2.1 完全抗原A的紫外光谱 | 第34-35页 |
| 2.2.2 完全抗原B的紫外光谱 | 第35-36页 |
| 2.3 人工抗原SDS-PAGE凝胶电泳鉴定结果 | 第36页 |
| 3 讨论 | 第36-39页 |
| 第三部分 胭脂红单克隆抗体的制备与鉴定 | 第39-53页 |
| 1 材料和方法 | 第39-46页 |
| 1.1 实验动物与生物材料 | 第39页 |
| 1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 1.3 实验室仪器与实验耗材 | 第39-40页 |
| 1.4 主要溶液系统 | 第40-41页 |
| 1.4.1 ELISA溶液 | 第40页 |
| 1.4.2 细胞培养液 | 第40-41页 |
| 1.4.3 蛋白纯化使用液 | 第41页 |
| 1.5 胭脂红单克隆抗体的制备 | 第41-45页 |
| 1.5.1 动物免疫程序 | 第41-42页 |
| 1.5.2 ELISA筛选系统的建立 | 第42-43页 |
| 1.5.3 细胞融合与培养 | 第43-44页 |
| 1.5.4 杂交瘤细胞株的稳定性试验及建株 | 第44-45页 |
| 1.5.5 腹水制备 | 第45页 |
| 1.5.6 腹水纯化 | 第45页 |
| 1.6 单克隆抗体的鉴定 | 第45-46页 |
| 1.6.1 抗体纯化前后蛋白回收率测定 | 第45-46页 |
| 1.6.2 抗体纯化效果SDS-PAGE鉴定 | 第46页 |
| 1.6.3 单克隆抗体特异性鉴定 | 第46页 |
| 2 结果 | 第46-50页 |
| 2.1 抗原的工作浓度和血清抗体效价的确定 | 第46页 |
| 2.2 融合前SP2/0的细胞状态 | 第46-47页 |
| 2.3 单克隆孔杂交瘤细胞生长状态 | 第47-48页 |
| 2.4 单克隆抗体细胞株的建立和稳定试验 | 第48页 |
| 2.5 腹水的制备 | 第48页 |
| 2.6 单克隆抗体的鉴定 | 第48-49页 |
| 2.6.1 腹水蛋白含量 | 第48页 |
| 2.6.2 抗体蛋白回收率 | 第48-49页 |
| 2.7 SDS-PAGE检测腹水纯化效果 | 第49页 |
| 2.8 抗体特异性鉴定 | 第49-50页 |
| 3 讨论 | 第50-53页 |
| 第四部分 鲜肉中违法添加胭脂红ELISA检测方法的建立 | 第53-62页 |
| 1 材料和方法 | 第53-54页 |
| 1.1 实验仪器与试剂 | 第53页 |
| 1.2 样品 | 第53页 |
| 1.3 ELISA检测方法的建立 | 第53-54页 |
| 1.3.1 最佳封闭条件的确定 | 第53页 |
| 1.3.2 抗原抗体最佳工作浓度的确定 | 第53页 |
| 1.3.3 icELISA标准曲线及相关参数 | 第53-54页 |
| 1.4 样品添加回收试验 | 第54页 |
| 1.4.1 样品处理方法 | 第54页 |
| 1.4.2 样品基质干扰 | 第54页 |
| 1.4.3 标准曲线的绘制 | 第54页 |
| 1.4.4 样品中胭脂红回收率的测定 | 第54页 |
| 2 结果 | 第54-60页 |
| 2.1 ELISA检测方法的建立 | 第54-58页 |
| 2.1.1 最佳封闭条件的确定 | 第54-56页 |
| 2.1.2 抗原抗体工作浓度的确定 | 第56页 |
| 2.1.3 icELISA标准工作曲线及参数 | 第56-58页 |
| 2.2 胭脂红单克隆抗体的初步应用 | 第58-60页 |
| 2.2.1 样品基质干扰 | 第58-59页 |
| 2.2.2 样品溶液中标准曲线的绘制 | 第59-60页 |
| 2.3 样品添加回收率的测定 | 第60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 全文结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第69-70页 |