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致倦库蚊被武昌罗索线虫感染后免疫基因差异表达及功能分析

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
1 前言第12-26页
    1.1 武昌罗索线虫的研究概况第12-13页
    1.2 武昌罗索线虫主要宿主第13-14页
        1.2.1 致倦库蚊第13页
        1.2.2 埃及伊蚊和白纹伊蚊第13-14页
    1.3 昆虫免疫机制第14-20页
        1.3.1 体液免疫第14-19页
        1.3.2 细胞免疫第19页
        1.3.3 自噬途径第19-20页
    1.4 模式识别受体第20-22页
    1.5 C型凝集素第22-24页
        1.5.1 CTLs的结构特征第22页
        1.5.2 CTLs在昆虫中的研究概况第22-24页
    1.6 本研究的目的和意义第24-26页
2 材料与方法第26-41页
    2.1 实验材料第26-29页
        2.1.1 实验动物的获取第26页
        2.1.2 主要菌株与载体第26页
        2.1.3 主要试剂与药品第26-27页
        2.1.4 主要仪器与设备第27页
        2.1.5 引物序列第27-28页
        2.1.6 常用溶液配制第28-29页
    2.2 实验方法第29-41页
        2.2.1 致倦库蚊被武昌罗索线感染虫后的存活率分析第29-30页
        2.2.2 库蚊总RNA的提取第30页
        2.2.3 总RNA中基因组DNA的消化和反转录第30-31页
        2.2.4 致倦库蚊被线虫感染后不同时期免疫基因的表达水平第31-32页
        2.2.5 CqCTL12和CqATG8基因的克隆第32-34页
        2.2.6 重组蛋白rCqCTL12和rCqATG8的原核表达与纯化第34-39页
        2.2.7 rCqCTL12对细菌的体外凝集第39页
        2.2.8 rCqCTL12与武昌罗索线虫感染期幼虫的体外结合第39-41页
3 结果与分析第41-64页
    3.1 致倦库蚊被武昌罗索线虫感染后的存活率分析第41-42页
    3.2 致倦库蚊总RNA的提取和反转录第42-43页
    3.3 致倦库蚊被线虫感染后不同时期免疫基因的表达水平第43-52页
        3.3.1 模式识别受体第43-45页
        3.3.2 Toll信号通路第45-46页
        3.3.3 IMD信号通路第46-47页
        3.3.4 JAK/STAT信号通路第47-49页
        3.3.5 凝结黑化途径第49-50页
        3.3.6 免疫效应分子第50-51页
        3.3.7 自噬途径第51-52页
    3.4 CqCTL12和CqATG8基因的克隆第52-56页
        3.4.1 CqCTL12和CqATG8基因的扩增第52-53页
        3.4.2 CqCTL12和CqATG8基因克隆载体的构建和阳性检测第53页
        3.4.3 CqCTL12和CqATG8基因的序列分析第53-56页
    3.5 重组蛋白rCqCTL12和rCqATG8的原核表达与纯化第56-59页
        3.5.1 CqCTL12和CqATG8基因成熟肽编码区的扩增和双酶切第56-57页
        3.5.2 PET32a空载质粒的提取和双酶切第57页
        3.5.3 表达载体的构建、阳性检测和双酶切验证第57-58页
        3.5.4 重组蛋白rCqCTL12和rCqATG8的表达和纯化第58-59页
    3.6 rCqCTL12对细菌的体外凝集第59-61页
    3.7 rCqCTL12与武昌罗索线虫感染期幼虫的体外结合第61-64页
4 讨论第64-67页
5 小结与展望第67-68页
参考文献第68-78页
硕士期间发表的论文第78-79页
致谢第79页

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