摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文献综述 | 第9-15页 |
1.1 淀粉的研究进展 | 第9-12页 |
1.1.1 淀粉概述 | 第9-10页 |
1.1.2 玉米淀粉合成的关键酶 | 第10-12页 |
1.2 基因工程技术 | 第12-13页 |
1.2.1 基因工程技术概述 | 第12-13页 |
1.2.2 过量表达技术 | 第13页 |
1.3 GRAS基因家族的研究进展 | 第13-15页 |
1.3.1 GRAS蛋白结构 | 第13-14页 |
1.3.2 GRAS的功能 | 第14-15页 |
2 引言 | 第15-17页 |
2.1 研究的目的与意义 | 第15-16页 |
2.2 技术路线 | 第16-17页 |
3 材料与方法 | 第17-34页 |
3.1 实验材料 | 第17页 |
3.1.1 植物材料 | 第17页 |
3.1.2 载体与菌株 | 第17页 |
3.1.3 酶及试剂 | 第17页 |
3.1.4 仪器设备 | 第17页 |
3.2 ZmGRAS17的不同组织表达模式 | 第17-20页 |
3.2.1 材料种植与保存 | 第17-18页 |
3.2.2 改良Trizol法提取总RNA | 第18-19页 |
3.2.3 反转录 | 第19页 |
3.2.4 荧光定量PCR反应 | 第19-20页 |
3.3 ZmGRAS17基因生物信息学分析和克隆 | 第20-24页 |
3.3.1 ZmGRAS17基因的生物信息学分析 | 第20页 |
3.3.2 ZmGRAS17基因的克隆 | 第20-22页 |
3.3.3 ZmGRAS17基因过表达载体的构建 | 第22-23页 |
3.3.4 ZmGRAS17基因过表达载体转化农杆菌 | 第23-24页 |
3.4 ZmGRAS17的转录活性分析 | 第24-25页 |
3.4.1 酵母杂交实验载体的构建 | 第24页 |
3.4.2 制备并转化酵母感受态细胞 | 第24-25页 |
3.4.3 ZmGRAS17自身激活能力的检测 | 第25页 |
3.5 ZmGRAS17亚细胞定位 | 第25-27页 |
3.5.1 亚细胞定位载体的构建 | 第25-26页 |
3.5.2 转化烟草 | 第26-27页 |
3.6 遗传转化及获取转基因水稻 | 第27-28页 |
3.6.1 水稻遗传转化 | 第27页 |
3.6.2 转基因植株的GUS染色 | 第27-28页 |
3.6.3 GUS染色阳性苗的PCR检测 | 第28页 |
3.7 检测分析转基因水稻 | 第28-34页 |
3.7.1 测定总淀粉 | 第28-30页 |
3.7.2 直链淀粉含量的测定 | 第30-31页 |
3.7.3 淀粉蓝值的测定 | 第31页 |
3.7.4 转基因种子的扫描电镜观察 | 第31-32页 |
3.7.5 可溶性糖的测定 | 第32-33页 |
3.7.6 转基因种子农艺性状的统计 | 第33-34页 |
4 结果分析 | 第34-46页 |
4.1 ZmGRAS17基因组织表达模式分析 | 第34页 |
4.2 ZmGRAS17基因生物信息学分析 | 第34-35页 |
4.3 ZmGRAS17基因的克隆 | 第35-36页 |
4.4 ZmGRAS17转录活性分析 | 第36-37页 |
4.5 ZmGRAS17亚细胞定位分析 | 第37-38页 |
4.6 ZmGRAS17转基因水稻的获得 | 第38-40页 |
4.6.1 过表达载体的构建 | 第38-39页 |
4.6.2 过量表达载体导入农杆菌 | 第39页 |
4.6.3 过表达水稻的获得 | 第39-40页 |
4.7 转基因种子的检测分析 | 第40-46页 |
4.7.1 ZmGRAS17转基因种子淀粉含量的测定 | 第41页 |
4.7.2 ZmGRAS17转基因种子淀粉的蓝值分析 | 第41-42页 |
4.7.3 ZmGRAS17转基因种子的淀粉扫描电镜观察 | 第42-43页 |
4.7.4 ZmGRAS17转基因种子可溶性糖含量的分析 | 第43-45页 |
4.7.5 ZmGRAS17转基因种子的农艺性状分析 | 第45-46页 |
5 讨论 | 第46-48页 |
6 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
附录 载体图谱 | 第55-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58-59页 |
硕士期间发表的主要研究论文 | 第59页 |