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玉米淀粉合成相关调控基因ZmGRAS17的功能分析

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1 文献综述第9-15页
    1.1 淀粉的研究进展第9-12页
        1.1.1 淀粉概述第9-10页
        1.1.2 玉米淀粉合成的关键酶第10-12页
    1.2 基因工程技术第12-13页
        1.2.1 基因工程技术概述第12-13页
        1.2.2 过量表达技术第13页
    1.3 GRAS基因家族的研究进展第13-15页
        1.3.1 GRAS蛋白结构第13-14页
        1.3.2 GRAS的功能第14-15页
2 引言第15-17页
    2.1 研究的目的与意义第15-16页
    2.2 技术路线第16-17页
3 材料与方法第17-34页
    3.1 实验材料第17页
        3.1.1 植物材料第17页
        3.1.2 载体与菌株第17页
        3.1.3 酶及试剂第17页
        3.1.4 仪器设备第17页
    3.2 ZmGRAS17的不同组织表达模式第17-20页
        3.2.1 材料种植与保存第17-18页
        3.2.2 改良Trizol法提取总RNA第18-19页
        3.2.3 反转录第19页
        3.2.4 荧光定量PCR反应第19-20页
    3.3 ZmGRAS17基因生物信息学分析和克隆第20-24页
        3.3.1 ZmGRAS17基因的生物信息学分析第20页
        3.3.2 ZmGRAS17基因的克隆第20-22页
        3.3.3 ZmGRAS17基因过表达载体的构建第22-23页
        3.3.4 ZmGRAS17基因过表达载体转化农杆菌第23-24页
    3.4 ZmGRAS17的转录活性分析第24-25页
        3.4.1 酵母杂交实验载体的构建第24页
        3.4.2 制备并转化酵母感受态细胞第24-25页
        3.4.3 ZmGRAS17自身激活能力的检测第25页
    3.5 ZmGRAS17亚细胞定位第25-27页
        3.5.1 亚细胞定位载体的构建第25-26页
        3.5.2 转化烟草第26-27页
    3.6 遗传转化及获取转基因水稻第27-28页
        3.6.1 水稻遗传转化第27页
        3.6.2 转基因植株的GUS染色第27-28页
        3.6.3 GUS染色阳性苗的PCR检测第28页
    3.7 检测分析转基因水稻第28-34页
        3.7.1 测定总淀粉第28-30页
        3.7.2 直链淀粉含量的测定第30-31页
        3.7.3 淀粉蓝值的测定第31页
        3.7.4 转基因种子的扫描电镜观察第31-32页
        3.7.5 可溶性糖的测定第32-33页
        3.7.6 转基因种子农艺性状的统计第33-34页
4 结果分析第34-46页
    4.1 ZmGRAS17基因组织表达模式分析第34页
    4.2 ZmGRAS17基因生物信息学分析第34-35页
    4.3 ZmGRAS17基因的克隆第35-36页
    4.4 ZmGRAS17转录活性分析第36-37页
    4.5 ZmGRAS17亚细胞定位分析第37-38页
    4.6 ZmGRAS17转基因水稻的获得第38-40页
        4.6.1 过表达载体的构建第38-39页
        4.6.2 过量表达载体导入农杆菌第39页
        4.6.3 过表达水稻的获得第39-40页
    4.7 转基因种子的检测分析第40-46页
        4.7.1 ZmGRAS17转基因种子淀粉含量的测定第41页
        4.7.2 ZmGRAS17转基因种子淀粉的蓝值分析第41-42页
        4.7.3 ZmGRAS17转基因种子的淀粉扫描电镜观察第42-43页
        4.7.4 ZmGRAS17转基因种子可溶性糖含量的分析第43-45页
        4.7.5 ZmGRAS17转基因种子的农艺性状分析第45-46页
5 讨论第46-48页
6 结论第48-49页
参考文献第49-55页
附录 载体图谱第55-57页
致谢第57-58页
作者简介第58-59页
硕士期间发表的主要研究论文第59页

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