| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9页 |
| 第一章 前言 | 第13-28页 |
| 1．肥胖及其危害 | 第13-15页 |
| 1.1.1 肥胖的简介 | 第13页 |
| 1.1.2 肥胖的诱因及危害 | 第13-15页 |
| 1.2 半胱氨酸组织蛋白酶（cysteine proteinase） | 第15-20页 |
| 1.2.1 组织蛋白酶的概述 | 第15-16页 |
| 1.2.2 半胱氨酸组织蛋白酶简介 | 第16页 |
| 1.2.3 半胱氨酸组织蛋白酶的结构和特异性 | 第16-17页 |
| 1.2.4 组织蛋白酶活性的调控 | 第17-18页 |
| 1.2.5 半胱氨酸组织蛋白酶的生理功能 | 第18-19页 |
| 1.2.6 溶酶体组织蛋白酶与细胞自噬 | 第19页 |
| 1.2.7 半胱氨酸组织蛋白酶L在肥胖研究中的作用 | 第19-20页 |
| 1.3 秀丽隐杆线虫概述 | 第20-23页 |
| 1.3.1 秀丽隐杆线虫的简介 | 第20-22页 |
| 1.3.2 秀丽杆隐线虫在肥胖研究中的应用 | 第22-23页 |
| 1.4 细胞自噬的概述 | 第23-27页 |
| 1.4.1 自噬的简介 | 第23-24页 |
| 1.4.2 利用线虫模型研究自噬的优势 | 第24-25页 |
| 1.4.3 自噬的生理功能 | 第25-26页 |
| 1.4.4 研究自噬的实验方法 | 第26页 |
| 1.4.5 自噬与脂质代谢 | 第26-27页 |
| 1.5 本课题要解决的问题及意义 | 第27-28页 |
| 第二章 材料和方法 | 第28-39页 |
| 2.1 主要试剂 | 第28-30页 |
| 2.2 主要仪器 | 第30页 |
| 2.3 菌株和载体 | 第30-31页 |
| 2.4 线虫突变体 | 第31页 |
| 2.5 实验方法 | 第31-38页 |
| 2.5.1 线虫总c DNA的提取及Real-time PCR | 第31-32页 |
| 2.5.2 引物的设计与合成 | 第32-33页 |
| 2.5.3 PCR反应体系及程序 | 第33页 |
| 2.5.4 大肠杆菌质粒DNA的提取 | 第33页 |
| 2.5.6 构建原核表达载体p ET28a-CPL-1 | 第33-34页 |
| 2.5.7 SDS-PAGE电泳检测小规模诱导的重组蛋白 | 第34页 |
| 2.5.8 SDS-PAGE电泳 | 第34-35页 |
| 2.5.9 纯化CPL-1 融合蛋白 | 第35-36页 |
| 2.5.10 配制含葡萄糖的NGM培养基 | 第36页 |
| 2.5.11 线虫的同步化 | 第36页 |
| 2.5.12 线虫油红染色 | 第36-37页 |
| 2.5.13 线虫总蛋白的提取 | 第37页 |
| 2.5.14 蛋白浓度测定方法（Bradford法） | 第37-38页 |
| 2.6 数据收集与统计分析 | 第38-39页 |
| 第三章 结果与分析 | 第39-54页 |
| 3.1 线虫组织蛋白酶L的原核表达和多克隆抗体的制备 | 第39-43页 |
| 3.1.1 PCR扩增cpl-1 | 第39-40页 |
| 3.1.2 重组原核表达载体p ET28a::CPL-1 的构建 | 第40页 |
| 3.1.3 表达和纯化重组蛋白CPL-1 | 第40-42页 |
| 3.1.4 ELISA法检测抗血清效价 | 第42页 |
| 3.1.5 western blot检测CPL-1 抗体的特异性 | 第42-43页 |
| 3.2 CPL-1 介导的细胞自噬与线虫饮食诱导的脂质沉积 | 第43-54页 |
| 3.2.1 线虫CPL-1 与葡萄糖诱导的脂肪沉积的关系 | 第43-46页 |
| 3.2.2 葡萄糖诱导线虫脂肪沉积过程自噬水平的变化 | 第46-49页 |
| 3.2.3 初步调查组织蛋白酶L与细胞自噬的相关性 | 第49-51页 |
| 3.2.4 细胞自噬调控线虫饮食诱导的脂肪沉积 | 第51-54页 |
| 第四章 讨论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第64-65页 |
